人载脂蛋白E基因型测定方法的建立

目的：建立一种准确、简便和经济的适用于大范围测定载脂蛋白Ｅ基因型的方法。方法：自中血中采用ＴＫＭ法提取人基因组ＤＮＡ,ＰＣＲ－ＲＦＬＰ确定载脂蛋白Ｅ的基因型,硝酸银染色聚丙烯酰胺凝胶,若银染效果不佳可用硝酸脱色后重染。结果：ＴＫＭ法获得ＤＮＡ在产量和质量上均能满足ＰＣＲ需求;电泳凝胶经银染可得清晰的ＤＮＡ特异带,据此能准确确定样品载脂蛋白Ｅ的基因基因型;用硝酸溶液脱色后的凝胶经重染仍可得到清晰的图     

脂蛋白脂肪酶基因突变的研究

目的：筛查国人脂蛋白脂肪酶(LPL)基因的突变，并探讨其与高甘油三酯血症的关系。方法：对高甘油三酯血症组(48例)和正常甘油三酯对照组(121例)的各扩增片段进行分析，电泳图谱异常者进行PCR产物测序。对于频率较高的多态性位点，引入限制性核酸内切酶位点利用PCR-RFLP进行鉴定。结果：在高甘油三酯血症人群中，检出2例内含子3受位剪接点上游6bp的C→T转换的突变杂合子，1例外显子5Pm^207→Leu突变杂合子，在全部样品中检出1例Ser^447→stop突变纯合子，50例Ser^447→stop杂合子。结论：天津地区人群中存在着LPL基因突变，除Ser^447→stop外，内含子3和外显子5的突变多与高甘油三酯血症相关，可能是高甘油三酯血症的遗传易感因子。     

国人脂蛋白脂肪酶基因突变的筛查

目的筛查天津地区脂蛋白脂肪酶基因突变情况,并探讨其对血脂水平的影响。方法利用聚合酶链反应—单链构象多态性分析技术对386例样本(血脂正常组278例,血脂异常组108例)的脂蛋白脂肪酶基因进行突变筛查,对可疑突变的扩增样品进行DNA序列测定。对于频率较高的多态性位点,引入限制性核酸内切酶位点利用聚合酶链反应限制片长多态性进行鉴定。结果在386例样本中,共检出4种突变,检出率为14.5%,其中1例为目前国内外未见报道的外显子3 Leu103→Leu同义突变杂合子,1例为目前亚洲首报的外显子5 Pro207→Leu突变杂合子,3例内含子3受位剪接点上游6 bp的C→T转换的突变杂合子,1例Ser447→stop突变纯合子,50例Ser447→stop突变杂合子。结论我国天津地区人群存在着广泛的脂蛋白脂肪酶基因变异,既具有与大多数国家相同的Ser447→stop多态性位点,也具有自身的特点。     

老年人血脂水平与载脂蛋白E等位基因的关系

为了解老年人血脂水平与载脂蛋白Ｅ基因多态性的关系，并探讨载脂蛋白Ｅ等位基因对老年人血脂水平的内在影响，利用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法测定了载脂蛋白Ｅ基因型，并用酶学方法对其血脂水平进行了测定。结果发现存在五种不同基因型：与携有ε３等位基因的人群相比，携有ε４等位基因的人群倾向具有较高的总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平以及较低的甘油三酯水平，而携有ε２等位基因的人群则有较低的低密度脂蛋白胆固醇水平以及较高的     

人血清载脂蛋白E表型的测定(简报)

人血清载脂蛋白E显示有明显的多形性,不同的Apo E具有不同的受体结合活性。Apo E的某些表型与高脂蛋白血症和动脉粥样硬化的形成关系密切,Apo E_2纯合子是Ⅱ型高脂蛋白血症必要的诊断条件之一。 国外测定Apo E表型首先利用长达约20小时的超速离心分离人血清VLDL,然后进行等电点聚焦电     

一种新的脂蛋白脂肪酶基因突变（C^56→T）

目的：筛查国人（天津地区）脂蛋白脂肪酶基因突变情况，并探讨其对血脂水平的影响。方法：利用聚合酶链反应-单链构象多态性分析技术，对386例患者（血脂正常组278例，血脂异常组108例）的脂蛋白脂肪酶基因进行突变筛查，对可疑突变的扩增样品进行DNA序列测定。结果：在386例样本中，检出1例外显子3 C^56→T（Leu^103→Leu）同义突变杂合子。结论：新LPL突变（C^56→T）的发现，对进一步阐述IJPL结构与功能的关系有重要的参考价值。     

载脂蛋白E等位基因与血清胆固醇水平的关系

本文报告95例健康人组与123例非继发性高脂蛋白血症疾病组的载脂蛋白 E 表型分布和血脂水平。疾病组载脂蛋白 E 等位基因ε_4频率和血清总胆固醇平均值分别为10.95%和189mg/dl,健康组相应数值分别为6.40%和150mg/dl;疾病组总胆固醇高于平均值人群的ε_4频率比低于平均值人群的ε_4频率明显增高,分别为14.05%和8.30%;分别计算具不同等位基因人群的血消总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的平均水平,二者均是ε_4最高,ε_3居中:ε_2最低。这些结果提示,载脂蛋白 E 是影响机体血清胆固醇水平的内在因子,等位基因ε_4是机体高胆固醇血症的遗传易患因素。     

北京鸭载脂蛋白A－Ⅰ的—级结构研究及其在动脉粥样硬化发病和生物学中的意义（简报）

北京鸭载脂蛋白Ａ－Ⅰ的—级结构研究及其在动脉粥样硬化发病和生物学中的意义（简报）王克勤，贺延春，李游，陈保生，戈托，顾梓伟，杨曼兰，解用虹，杨朝谕（中国医学科学院，中国协和医科大学，北京基础医学研究所，北京１００００５）以往本组发现北京鸭富含高密度脂...     

鸭血清脂蛋白的研究Ⅱ.鸭血清高密度脂蛋白的分离提纯与鉴定

利用硫酸右旋糖酐沉淀和区带头密度梯度超速离心一次即可获得总量达377毫克的鸭血清HDL,平均浓度为2.69毫克/毫升。样品经琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫双扩散、免疫电泳、双向免疫电泳及分析超离心鉴定,证实为纯净的HDL。制备的鸭HDL仍保持其抗原性,对牛乳脂蛋白脂肪酶有激活作用。本法提纯鸭血清HDL耗时短,纯度高,产量大,重复性佳;提纯样品为深入研究HDL及其载脂蛋白结构、功能和代谢等创造了条件。