四氢大麻酚对C57BL/6小鼠自身免疫性肝炎的保护作用

为研究大麻素成分[四氢大麻酚(tetrahydrocannabinol, THC)]对C57BL/6小鼠自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis, AIH)的影响,尾静脉注射质粒pCYP2D6和pcDNA3.1,腹腔重复注射四氯化碳(carbon tetrachloride, CCl_4)和THC,ELISA检测自身免疫应答程度,微板法检测血清中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)活性,HE染色检测肝脏炎症反应程度,天狼猩红染色检测肝脏纤维化程度。结果显示,THC对由CCl_4/CYP2D6引起的AIH造成的肝损伤有显著改善,而且对自身免疫应答有显著抑制作用,自身抗体和抗CYP2D6抗体水平显著降低,对于单独由CYP2D6引起的抗CYP2D6抗体能够完全抑制。THC对AIH和肝纤维化也有显著的抑制作用,且THC的抑制作用与其浓度有关。由此THC对由CCl_4/CYP2D6引起的C57BL/6小鼠的AIH有显著抑制作用,并且呈剂量依赖性。由此大麻素类药物THC对AIH可能有保护作用。     

非霍奇金淋巴瘤中p73基因甲基化与mRNA表达的相关性研究

目的：探讨NHL中p73基因启动子甲基化与其mRNA表达的相关性。方法：用甲基化特异性PcR（MsP）方法对24例非霍奇金淋巴瘤（NHL）p73基因启动子的甲基化状况进行检测,用RT—PCR检测其1TIRNA表达。结果：24例NHL中21例发生甲基化,甲基化阳性率87．5％;对照组均未出现甲基化。24例NHL中20例p73mRNA阴性表达,占83．33％,对照组p73mRNA表达阳性。结论：在NHL中p73tuRNA表达下调,且p73基因表达与p73基因启动子的甲基化呈显著负相关;p73基因启动子的甲基化可能是造成p73基因表达下调进而导致NHL发病的原因之一。     

5-氮-2'-脱氧胞苷对非霍奇金淋巴瘤p73基因甲基化的逆转作用

目的探讨5-氮-2'-脱氧胞苷对非霍奇金淋巴瘤(NHL)p73基因甲基化的逆转作用。方法用甲基化特异性PCR(MSP)方法对24例NHL p73基因启动子的甲基化进行检测,用5-氮-2'-脱氧胞苷处理部分NHL原代培养细胞后,检测p73 mRNA表达情况。结果 24例NHL中21例发生甲基化,甲基化阳性率高达87.5%;对照组(12例反应性增生淋巴结细胞及22例正常人外周血淋巴细胞)均未出现甲基化。部分未经治疗的NHL样本经5-氮-2'-脱氧胞苷处理后,p73 mRNA表达恢复。结论 p73基因启动子的甲基化可被5-氮-2'-脱氧胞苷逆转,导致因甲基化而被抑制的p73基因表达上调。     

表达BG4蛋白对人胃癌AGS细胞凋亡和端粒酶逆转录酶表达的影响

目的:构建G-四链体抗体BG4基因的真核表达载体p EGFP-N1-BG4,探讨转染该真核表达载体致BG4蛋白过表达对人胃癌细胞株AGS凋亡和端粒酶逆转录酶表达的影响。方法:以BG4基因原核表达载体p SANG10-BG4为模板,PCR扩增出含有BG4基因的目的片段,经TA克隆与p MD18-T载体连接,测序正确后,经Sac I和Pst I双酶切,与真核表达载体p EGFP-N1连接后转化感受态大肠杆菌DH5α,并进行酶切分析和序列测定,Western blot鉴定BG4蛋白表达;流式细胞术检测细胞周期;DAPI法及HE染色检测各组细胞凋亡;q PCR和Western blot检测空白对照组、p EGFP-N1组和p EGFP-N1-BG4组端粒酶逆转录酶mRNA和蛋白表达的变化。结果:酶切分析显示,目的基因条带与预期结果相符,DNA测序表明克隆的BG4基因序列正确,Western blot结果表明转染p EGFP-N1-BG4质粒可以成功表达BG4蛋白。转染p EGFP-N1-BG4质粒可抑制细胞进入S期。DAPI法及HE染色显示,p EGFP-N1-BG4组出现明显的新月形核和核固缩的细胞凋亡现象。q PCR和Western blot结果表明,p EGFPN1-BG4组端粒酶逆转录酶表达受到抑制。结论:用p EGFP-N1-BG4真核表达载体转染胃癌细胞株AGS可以抑制该细胞端粒酶逆转录酶表达,诱导细胞凋亡。     

PBL与CBL综合教学法在医学生化课教学中的探索与实践

面对生物化学课理论知识抽象,难以理解、难以记忆的问题,结合国内外教学改革的经验和生化课教学特点,在教学中实施一种新型的PBL与CBL综合教学模式,旨在促使教师改变传统教学方法,在教学过程中不断提高自身教学水平,从而提高生物化学课教学质量。     

“互联网+”背景下模块教学法在生物化学与分子生物学实验教学中的应用研究

目的：探讨生物化学与分子生物学课程实验教学改革模式。方法：以医学检验学专业的两个班学生为研究对象,分为实验组和对照组。实验组采用模块教学法;对照组采用传统实验教学模式。结果：实验组的考核成绩均高于对照组(P<0.05),问卷调查显示实验组多数学生满意该教学法。结论：实验组方法对提升教学效果有显著促进作用。     

靶向干扰前列腺源性ETS因子促进HT29细胞的增殖与侵袭

目的:结直肠癌是常见的消化道肿瘤之一,研究发现在结直肠组织,前列腺源性ETS因子(Prostate-derived Ets factor,PDEF)的表达可以促进分泌性祖细胞向杯状细胞分化,因此结直肠癌的发生可能与PDEF的表达有关。本研究旨在探讨靶向干扰前列腺源性ETS因子对结直肠癌细胞株HT29增殖与侵袭的影响。方法:阳离子脂质体法将PDEF干扰质粒和空白对照空质粒瞬时转染HT29细胞,通过荧光显微镜、RT-PCR、Western blot技术测定正常对照组、空白对照组和shRNA组中PDEF mRNA和蛋白的表达情况;MTT法检测HT29细胞的增殖情况;采用Transwell迁移实验观察细胞侵袭能力。结果:干扰质粒、空质粒成功转染HT29细胞,通过荧光显微镜可以观察到绿色荧光蛋白的表达;Western blot结果可见shRNA组PDEF蛋白的表达较正常对照组和空白对照组降低;MTT法检测发现干扰PDEF基因的表达能够明显促进HT29细胞的增殖(P<0.05);48 h后,shRNA组细胞侵袭能力明显强于正常对照组和空白对照组(P<0.05)。结论:在HT29细胞中干扰PDEF的表达,可以促进细胞的增殖与侵袭。     

人DMP1结构及功能的生物信息学分析

目的预测分析人DMP1的结构与功能,为进一步探讨DMP1作用机制提供借鉴。方法生物信息学方法分析DMP1蛋白的理化性质、亚细胞定位、跨膜区和信号肽、二级结构、三级结构,潜在磷酸化及糖基化位点、蛋白相互作用网络、5’非翻译区潜在转录因子结合位点和DMP1分子的进化保守性等指标。结果人DMP1蛋白是酸性亲水蛋白;信号肽切割位点位于第16与17位氨基酸之间,无跨膜区;主要二级结构形式为无规卷曲;磷酸化位点123个,O-糖基化位点118个、N-糖基化位点8个;DMP1具有利于蛋白间相互作用的结构特点,5’非翻译区存在多种转录因子潜在结合位点,人体各类组织均有表达,且具有在多种亚细胞结构中定位的特征。结论疏松的结构特征、表达的广泛性、丰富的修饰位点及多种转录因子结合位点均提示DMP1具有更为复杂的生物学功能。     

混合式教学模式在生物化学与分子生物学教学中的应用

混合式教学模式是传统课堂教学与数字化网络教学相结合的教学模式,近年来广泛应用于医学专业课程教学。本研究以长治医学院2019级五年制临床医学专业学生的生物化学与分子生物学课程为例,阐述了混合式教学模式在生物化学与分子生物学课程中的设计和实施过程,通过学生在线微课视频和作业完成情况、在线篇章测试成绩、问卷调查结果等评价教学...