盐酸小檗碱对人黑色素瘤A375-S2细胞增殖、凋亡的影响及其机制研究

摘要：目的:探讨盐酸小檗碱对人黑色素瘤A375-S2细胞增殖、凋亡以及核因子κB（NF-κB）通路相关蛋白表达的影响。方法:体外培养A375-S2细胞,实验分为对照组（不添加任何药物处理）、盐酸小檗碱高、中、低剂量组(25,50,100μmol·L-1)、阳性对照组(顺铂,0.01 mmol·L-1)。采用CCK-8法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡以及周期分布情况;免疫印迹法（WB）检测细胞中NF-κB的抑制蛋白α（IκB-α）、p-NF-κB、NF-κB、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、剪切的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（cleaved-caspase3）蛋白表达情况。结果:与对照组相比,盐酸小檗碱不同剂量组A375-S2细胞增殖抑制率、凋亡率、G1期DNA量、IκB-α、Bax、cleaved-caspase3蛋白表达均显著升高,p-NF-κB、Bcl-2蛋白表达显著降低（P<0.05）,且盐酸小檗碱高剂量组、阳性对照组与盐酸小檗碱中、低剂量组比较,差异有统计学意义（P<0.05）,高剂量组与阳性对照组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论:盐酸小檗碱可明显抑制人黑色素瘤A375-S2细胞增殖并诱导细胞凋亡,其可能与引起细胞周期G1期阻滞及抑制NF-κB信号通路激活有关。     

松生等总黄酮提取工艺及镇痛抗炎作用研究

目的：研究松生等总黄酮的最佳优化提取工艺,并对不同极性溶剂提取部分的镇痛抗炎作用进行研究。方法通过单因素实验和正交实验,考察提取时间、料液比、乙醇浓度和提取次数对松生等总黄酮提取率的影响;采用小鼠冰醋酸扭体法及二甲苯致小鼠耳肿胀模型筛选松生等不同溶剂提取部分镇痛抗炎作用。结果回流提取法提取松生等总黄酮的最佳条件为：提取时间3 h、料液比1：30、乙醇浓度60%、提取2次,黄酮提取率最高5.63%;松生等乙醇提取物、正丁醇提取物和乙酸乙酯提取物均能够抑制冰醋酸引起的小鼠扭体反应和二甲苯引起的小鼠耳肿胀。结论该工艺提取松生等总黄酮提取率高,方法简便,重复性好。松生等乙醇提取物、正丁醇提取物和乙酸乙酯提取物均具有明显镇痛抗炎作用。     

藏药松生等醇提物不同极性提取部分体外抗氧化活性研究

目的: 通过体外还原力和抗氧化评价方法研究藏药松生等提取物的抗氧化活性。 方法: 将松生等用70% 乙醇浸泡、提取、浓缩所得浸膏依次用石油醚, 二氯甲烷,乙酸乙酯, 正丁醇、乙醇进行萃取,各组分都配制成适当稀释倍数的溶液, 通过普鲁士蓝法、Fenton法和,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法分别测定各组分的还原力,·OH自由基的清除能力以及抗氧化的活性,并计算各组分的IC₅₀。 结果: 3种抗氧化实验表明乙酸乙酯、正丁醇、乙醇部分都具有明显抗氧化的作用。其中用DPPH法测得的IC₅₀分别是乙酸乙酯0.060 5 g·L^-1,正丁醇0.076 3 g·L^-1,乙醇0.083 3 g·L^-1。 结论: 提取物清除率与样品浓度存在明显的量效关系,浓度大于1.0 g·L^-1时其还原能力几乎接近于维生素(VC),清除能力接近甚至超过60%。其中在大极性溶液层还原力和抗氧化的能力最强。