抑制囊泡转运对大鼠内皮祖细胞增殖及钙库操纵性钙内流的影响

 目的: 研究囊泡转运在大鼠内皮祖细胞(EPCs)增殖及钙库操纵性钙内流(SOCE)调控中的作用。方法: 密度梯度离心法分离获取、并用acLDL-DiI和FITC-UEA-I荧光双染鉴定脾源性EPCs。布雷菲德菌素A(BFA)抑制囊泡转运,CCK-8法和实时无标记细胞功能分析仪观察EPCs增殖变化,流式细胞术检测凋亡情况,并检测囊泡转运关键蛋白ADP核糖基化因子GTP酶活化蛋白1(ARFGAP1)的表达。激光共聚焦显微镜观察囊泡转运抑制后SOCE并用Western blot检测SOCC复合体蛋白表达,进一步采用RNA干扰的方式观察囊泡转运对瞬时受体电位通道1(TRPC1)蛋白表达及SOCE的影响。结果: 双染鉴定大鼠脾源性EPCs阳性率为82.53%±6.12%。BFA显著抑制EPCs的增殖但对凋亡无明显影响,同时ARFGAP1表达也明显降低,说明EPCs的囊泡转运受到抑制。抑制EPCs囊泡转运显著下调TRPC1的表达,并降低SOCE。siTRPC1使EPCs的SOCE下降,但si-TRPC1预处理并抑制囊泡转运并没有使EPCs的SOCE进一步降低。结论: 抑制EPCs的囊泡转运可以抑制EPCs的增殖并通过下调TRPC1的表达降低SOCE水平。     

斯钙素1激活PI3K/Akt/eNOS通路促进内皮祖细胞增殖和迁移

目的 研究斯钙素1(stanniocalcin 1,STC1)对内皮祖细胞(endothelial precusor cells, EPCs)增殖和迁移的影响并探讨其机制.方法 密度梯度离心法分离、培养后,采用荧光双染法鉴定SD大鼠脾源性EPCs.不同浓度人重组斯钙素1(recombinant human stanniocalcin 1,rhSTC 1)处理EPCs,结合siRNA技术干扰EPCs STC1表达,检测EPCs增殖能力及迁移能力的变化;观察STC1对蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/Akt)、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)及其磷酸化水平的影响;然后观察使用磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)特异性抑制剂LY294002和eNOS特异性抑制剂L-NAME预处理的EPCs对rhSTC1的反应.结果 荧光双染法鉴定EPCs阳性率约为88.5％;外源性给予rhSTC1呈浓度依赖性的促进EPCs增殖与迁移;而干扰内源性STC1的表达,则抑制其增殖与迁移;外源性给予rhSTC1增加EPCs中Akt和eNOS的磷酸化水平,而运用PI3K抑制剂(LY294002)和eNOS抑制剂(L-NAME)分别处理EPCs后,rhSTC1诱导的EPCs增殖与迁移能力明显降低.结论 STC1通过激活PI3K/Akt/eNOS信号通路,增强EPCs增殖、迁移能力,为损伤血管的修复提供了新的靶点.     

长QT综合征15例临床分析

目的：分析长QT综合征（ LQTS）的高危因素、预警心电图表现、治疗方法与效果。方法统计15例LQTS病例临床情况、血钾、血镁、心电图特征、治疗方法以及效果,总结分析。结果年龄（63．8±10．0）岁,男4例,女11例,仅1例考虑先天性,其余均考虑获得性。有明确基础心脏病者10例（67％）,心脏彩超提示心室肥厚、心腔扩大者8例（53％）,心动过缓10例（66．6％）,低血钾9例（60％）、低血镁4例（27％）。所有患者给予补钾、补镁、提高心率。14例（93％）终止尖端扭转性室速（TdP）发作,1例反复发作TdP死亡,治疗前QTc间期（556±13）ms,治疗后QTc间期（464±15）ms。多数病例存在预警心电图,13例（87％） T?U畸型、7例（47％） T波电交替,11例（73％）出现R?on?T。结论高龄、基础心脏病、女性、低钾、低镁、心动过缓是LQTS的高危因素,尽快纠正可逆因素,可有效终止TdP发作。绝大部分病例存在预警心电图表现,应早期识别。     

住院医师规范化培训中基于导师制的病历书写教学实践

目的:对基于导师制的病历书写教学进行探索和研究。方法:导师和规培医师使用评分表,对病历进行双评分,观察指标包括:两个版本评分表在评分时间方面的差异;导师和规培医生评分数值的差异;病历书写扣分分布;实施1年后病历评分的变化趋势。结果:评分数值导师明显低于规培医师( t=8.919, P<0.05);病历扣分主要在现病史、体格检查、诊断分析、诊疗计划等方面;实施1年后导师评分呈上升趋势,规培医师评分呈下降趋势。 结论:该方法有效提高了病历书写教学质量,提高了规培医师辨识病历书写中存在问题的能力。