大鼠胰腺发育过程中Munc13-1对胰岛素释放功能的影响

目的:研究大鼠胰腺发育不同阶段Munc13-1基因及蛋白表达的变化及Munc13-1在胰岛素释放过程中的作用. 方法:应用显微分离及提取技术获得大鼠胚胎发育12.5d(E12.5),E15.5,E18.5,新生大鼠,出生后21 d(P21)及成年大鼠胰腺组织;另外,从大鼠胚胎发育15 d开始给予孕鼠半量饮食,造成宫内发育迟缓动物模型,提取其新生大鼠胰腺组织. 采用RT-PCR, Real-time PCR和Western blot技术确定Munc13-1的表达情况,并测定不同发育时期血中胰岛素浓度. 结果:胰岛素基因从E12.5开始出现,Munc13-1基因从E15.5开始表达,随着胎龄的增长,二者表达量皆增多. E15.5和E18.5时munc13-1蛋白表达量较少,以后明显增多. 自E18.5即检测到血中胰岛素的存在,随着胚胎的发育,血胰岛素浓度逐渐升高. 宫内发育迟缓新生大鼠比正常新生大鼠血胰岛素浓度低,同时Munc13-1基因及蛋白表达量亦比正常对照组明显减少. 结论:Munc13-1在胰岛素释放过程中的作用,随着胚胎发育期胰岛素分泌的增多表达也增加,宫内发育迟缓新生大鼠胰岛素分泌减少时,Munc13-1的表达亦减少.     

糖尿病患者调脂治疗的临床研究及其意义

糖尿病和脂质代谢紊乱是常见的内分泌代谢性疾病，糖尿病患者血脂异常的发生率远高于非糖尿病患者，脂质代谢紊乱又有助于高血糖和糖尿病的发生。由于血脂异常与动脉粥样硬化、冠脉事件的发生发展又有着密切关系，所以糖尿病患者的调脂治疗显得非常重要。近年来许多大型临床试验证明，调脂治疗是预防糖尿病患者发生冠心病的有效措施。     

大鼠胚胎胰腺发育后期基因表达谱的研究

目的：研究大鼠胚胎发育至第15.5和18.5天胰腺基因表达谱,探讨特异性基因表达在正常内外分泌胰腺发育及糖尿病中所起的作用.方法：①实验于2003-09/2004-06在南京医科大学生化与分子生物学实验室完成.选用SD大鼠,雌雄各10只,将雌雄鼠按1：2合笼,分别于胚胎发育至第15.5和18.5天,剖腹取出孕子宫,分离胚胎.②应用显微分离及提取技术获得胚胎发育不同阶段胰腺组织并提取RNA,采用高密度寡核苷酸芯片（Affemetrix芯片）对胚胎发育至第15.5天和第18.5胚胎胰腺进行基因转录水平分析,用生物信息学方法分析具体基因的表达情况.结果：胚胎发育至第18.5天与胚胎发育至第15.5天相比,差异表达2倍以上的基因共1 319条.其中表达上升的基因664条,表达下降的基因655条,功能已知基因占63%,表达序列标识占37%.控制胰腺细胞分化的转录因子明显下调,与功能代谢相关的转录因子有上升趋势,内外分泌酶类、激素类表达有上升趋势,骨架蛋白有下降趋势,与激素、酶类分泌相关的因子基本无表达.结论：大鼠胚胎胰腺发育至第15.5～18.5天,内分泌典型胰岛结构及外分泌腺泡、导管结构已基本形成,功能细胞分化基因表达下降,而细胞代谢调节功能基因表达上升,因此,在大鼠胚胎发育至第15.5天胰腺,功能细胞的代谢调节功能开始完善.     

糖尿病患者血脂异常的临床分析

目的：了解糖尿病患者血脂异常的发病特点及其对降糖降脂治疗的反应。方法：对374例糖尿病患者血脂情况进行分析。根据年龄和性别不同分别观察50岁前、后男女糖尿病患者的血脂谱，并按治疗情况分成糖尿病未经任何药物治疗组、单纯降糖治疗组、降糖降脂联合治疗组，分别观察各组血脂基值和变化情况。结果：374例患者中接受血脂检查者占68．3％，其中血脂异常者55．4％，服用降脂药者12．8％。1型糖尿病患者高血脂比例为18．3％，2型糖尿病患者为58．4％。＜50岁的女性糖尿病患者高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)高于男性，而≥50岁后这种差异消失，反而出现甘油三酯(TG)、胆固醇(CHOL)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)高于男性的现象。单纯降糖治疗可使血糖和血脂降低，但不能使后者降至正常范围，降糖同时加用调脂药物，则有望使血脂达到理想水平。结论：糖尿病患者常伴有脂代谢紊乱，以血TG增高最明显。年龄性别不同，血脂谱有所差别。而调脂治疗对纠正糖尿病患者血脂异常有重要作用。     

护理干预对妊娠糖尿病患者血糖水平的影响

妊娠期间发现或发生糖耐量异常而引起不同程度的高血糖,当血糖异常达到诊断标准时,称为妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)[1].     

钠／碘共转运体单克隆抗体的制备与应用

钠／碘共转运体(NIS)是甲状腺滤泡细脑膜上的一类特殊糖蛋白，具有摄取并浓集碘的功能。利用杂交瘤技术经过动物免疫、细胞融合、筛选阳性克隆、亚克隆制备鼠抗人NIS单克隆抗体，并用酶联免疫吸附分析法、Western印迹等方法鉴定其特异性。NIS单克隆抗体为NIS抗原—抗体的研究提供了新的工具，它不仅可以用于甲状腺、乳腺等领域的基础研究，而且可以用于临床，为甲状腺疾病的诊断和治疗提供切实保障。     

Graves’甲亢对妊娠结局的影响

目的：探讨Graves’甲亢对妊娠结局的影响。方法：选取Graves’甲亢孕妇95例,其中37例入组时甲状腺功能控制良好（控制组）,58例入组时甲状腺功能控制不佳（未控制组）;根据入组时是否使用抗甲状腺药物（ATDs）再分成用ATDs与未用ATDs亚组。选取同期正常妊娠产妇125例作为正常对照组。分析各组孕期甲状腺功能和促甲状腺激素受体抗体（TRAb）水平变化及其对妊娠结局的影响。结果：控制组中孕期甲功持续缓解占24.32%（9/37）,缓解及甲功完全正常的比例为37.84%（14/37）和16.22%（6/37）,有8.11%的孕妇甲亢复发。未控制组62.07%的孕妇孕期持续甲亢,甲功缓解及完全正常分别有18.97%（11/58）和15.51%（9/58）。未控制组TRAb水平在孕早、中、晚期及产后均显著高于控制组（P < 0.05）;两组孕早期TRAb均显著高于孕中期（P < 0.05）。未控制组妊娠高血压、子痫前期、低出生体重、产后出血及新生儿甲减的发生率显著高于控制组及对照组（P < 0.05）,控制组与对照组比较差异无统计学意义（P > 0.05）。结论：Graves’甲亢对妊娠结局产生不良影响。孕期甲亢控制不佳增加母婴不良结局的发生。合理使用抗甲状腺药物可稳定甲功和TRAb,但由于其可通过胎盘,可能导致胎儿或新生儿甲减的发生,仍需谨慎使用。     

大鼠胰腺发育过程中胰岛素释放功能完善的研究

目的: 明确大鼠胰腺发育不同时期胰岛素合成及释放相关基因的表达差异,探讨胰岛素分泌功能完善的过程? 方法:分离并提取SD大鼠胚胎发育12.5天(E12.5)?E15.5?E18.5?新生?出生后21天及成年大鼠胰腺组织,利用Affymetrix公司的高密度寡核苷酸芯片检测大鼠发育各阶段胰腺组织基因表达谱并分析胰岛素合成及释放相关基因的特异及差异表达情况?分别进行正常新生鼠?成年鼠血糖水平及正常新生第1?3?7?10?12天大鼠腹腔葡萄糖耐量试验(IPGTT)?采用ELISA法测定新生鼠和成年鼠血中胰岛素浓度?新生大鼠胰岛细胞原代培养观察新生鼠胰岛细胞的形态?结果:在胰岛素合成及释放相关基因中,胰岛素基因及其特异性转录因子如PDX-1在大鼠E12.5~E15.5时即开始有表达,以后胰岛素基因持续存在且表达增多;胰岛素胞吐过程中的关键基因Syntaxin-1a?Vamp-2?Rab-3a?Munc13-1等从E15.5开始出现,以后表达量亦增多;而葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)相关基因中,葡萄糖转运体-2(Glut2)在胚胎早期开始表达,葡萄糖激酶(GCK)在胚胎中晚期才表达?自E18.5即检测到大鼠血中胰岛素的存在,随着胚胎的发育,血胰岛素浓度逐渐升高?新生大鼠对葡萄糖负荷不能耐受,出现IPGTT异常,出生1周以后IPGTT才逐渐趋于正常?新生鼠的胰岛形态与成年鼠相似,但体积相对较小,透亮度稍差?结论:大鼠胚胎胰腺发育早中期即已具备胰岛素合成及分泌的能力,但新生鼠刚出生时,其胰岛功能仍尚未完善,出生以后才逐渐对葡萄糖负荷有良好的反应性?     

大鼠胚胎发育后期胰腺中Mesothelin的表达

目的: 探讨大鼠胰腺胚胎发育后期胰岛形成及β细胞功能完善相关的基因表达调控. 方法:采用高密度寡核苷酸芯片(Affymetrix芯片)对孕15.5(E15.5)和E18.5胰腺进行基因转录水平分析并用RT-PCR验证基因在大鼠胰腺E12.5,E15.5,E18.5,初生和成年这五个不同发育时期的表达情况. 结果:在差异或特异表达的基因中与胰腺细胞分化相关的转录因子和信号分子表达均下调,而与胰岛结构形成及β细胞代谢功能完善相关的基因表达上调,其中细胞黏附分子Mesothelin是在E18.5特异表达的基因,RT-PCR亦显示Mesothelin在大鼠胰腺胚胎发育后期特异性高表达. 结论: Mesothelin可能对胰岛结构的形成和功能的完善及维持有重要作用.