14-3-3ζ蛋白单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用

为了探讨14-3-3ζ蛋白在中枢神经系统内的分布,本文采用纯化的基因重组型14-3-3ζ蛋白免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术制备抗14-3-3ζ蛋白单克隆抗体;Western blot及免疫组织化学法鉴定抗体。结果显示:制备的单克隆抗体能特异性识别基因重组14-3-3ζ蛋白和大鼠脑匀浆32kD蛋白。免疫组化染色结果显示,14-3-3ζ蛋白在大鼠中枢神经系统广泛分布,在皮层、海马、杏仁核和基底前脑的免疫阳性染色较强,免疫阳性产物位于神经元胞浆内。本研究结果提示,14-3-3ζ蛋白可能具有多样化的生理功能。     

肝纤泰冲剂对肝硬化患者血小板四项参数的影响

肝硬化患者血小板的减少和上升,可作为评估肝硬化病情的指标.本文观察了肝纤泰冲剂对肝硬化患者治疗前后血小板参数的影响,结果如下.     

黄芪、复方丹参注射液对肝硬化患者红细胞体积分布宽度的影响

目的　观察黄芪、复方丹参注射液对肝硬化患者治疗前后红细胞体积分布宽度的影响。方法　将 6 5例肝硬化患者随机分为治疗组和对照组。治疗组给予黄芪及复方丹参注射液 ,对照组给予复方丹参注射液 ,均每日 1次 ,治疗 3个月 ,并与健康人做对照。结果　两组治疗前红细胞体积分布宽度标准差 (RDW SD)和红细胞体积分布宽度变异系数 (RDW CV)均显著高于健康人 (P <0 0 0 1) ,治疗后治疗组明显降低 (P <0 0 1) ,治疗组优于对照组 (P <0 0 5 ) ,治疗组治疗后肝功能丙酮酸氨基转移酶 (ALT)、门冬氨基转移酶 (AST)及球蛋白 (Glb)均显著降低 (P <0 0 1) ,白蛋白 (Alb)较治疗前升高 (P <0 0 5 ) ,以治疗组为优。结论　黄芪、复方丹参注射液具有改善红细胞变形能力 ,恢复肝功能 ,促进肝病恢复等作用。     

小鼠脑14-3-3蛋白ζ亚型cDNA克隆及其原核表达分析

14-3-3是一类脑中丰富存在的蛋白质。在许多神经疾病患者的脑脊液中含量升高。最近的研究显示该蛋白相关于Parkinson病的病理过程。本研究采用RT-PCR法从小鼠脑中分离出编码14-3-3ζ亚型的cDNA片段,构建了基因重组质粒,分析了14-3-3ζ亚型cDNA在原核细胞中的表达并制备了基因重组蛋白。结果显示,RT-PCR扩增产物为738bp,编码245个氨基酸。重组质粒在原核细胞中的表达受IPTG诱导呈时间依赖性递增。纯化的目的蛋白在SDS-PAGE中的表观分子量为32kD,在Su-perdexS-200HR中的表观分子量为96kD。每升菌液可收获目的蛋白4.0mg。研究结果提示,14-3-3ζ亚型cDNA在原核细胞中高水平表达,基因重组蛋白易纯化可用于制备抗体和研究其生理功能。     

肝脏巨大血管平滑肌脂肪瘤误诊为肝癌1例

探讨肝脏血管平滑肌脂肪瘤的临床病理特征、影像学特征、诊断及治疗。结合临床病例,通过对肝脏血管平滑肌脂肪瘤文献的综合分析,发现肝脏血管平滑肌脂肪瘤由扭曲的血管、平滑肌及脂肪组织组成,临床呈非特异性表现,影像学上有一定的特征性,黑色素瘤抗体（HMB-45）阳性、平滑肌抗体（SMA）阳性有助于诊断。肝脏血管平滑肌脂肪瘤是一种少见的良性间叶组织瘤,由于其缺乏特异性表现,影像学上因其构成成分比例及分布的不同而表现多样,术前诊断较为困难,易误诊为原发性肝癌、肝血管瘤、肝脂肪瘤等。影像学上的特征及黑色素瘤抗体（HMB-45）阳性、平滑肌抗体（SMA）阳性在诊断中有重要意义,早期外科手术是首选治疗。     

肝脏巨大血管平滑肌脂肪瘤误诊为肝癌1例

探讨肝脏血管平滑肌脂肪瘤的临床病理特征、影像学特征、诊断及治疗.结合临床病例.通过对肝脏血管平滑肌脂肪瘤文献的综合分析,发现肝脏血管平滑肌脂肪瘤由扭曲的血管,平滑肌及脂肪组织组成,临床呈非特异性表现,影像学上有一定的特征性,黑色素瘤抗体(HMB-45)阳性、平滑肌抗体(SMA)阳性有助于诊断.肝脏血管平滑肌脂肪瘤是一种少见的良性间叶组织瘤,由于其缺乏特异性表现,影像学上因其构成成分比例及分布的不同而表现多样,术前诊断较为困难,易误诊为原发性肝癌、肝血管瘤、肝脂肪瘤等.影像学上的特征及黑色素瘤抗体(HMB-45)阳性、平滑肌抗体(SMA)阳件在诊断中有重要意义,早期外科手术是首选治疗.     

DAPT抑制胃癌BGC-823细胞增殖的体外实验研究

目的探讨Notch信号通路抑制剂氮-[氮-（3,5-二氟苯乙酰）-L-丙氨酰]-S-苯基甘氨酸丁酯（DAPT）对胃癌细胞系BGC-823增值率的影响及其机制。方法体外培养BGC-823细胞,利用MTT检测DAPT引起的BGC-823细胞增值率的变化以及Western Blotting检测DAPT对凋亡相关蛋白caspase-3、Cytochrome C、Bcl-2和Bax表达水平的影响。结果与对照组相比,不同浓度DAPT可以引起明显的BGC细胞增值率的下降,同时凋亡相关蛋白caspase-3表达水平明显上升,线粒体凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2比率、Cytochrome C表达水平明显升高。结论 Notch信号通路抑制剂DAPT可以通过线粒体凋亡通路诱导BGC-823细胞凋亡,抑制细胞增殖。     

奥曲肽加凝血酶治疗食管胃底曲张静脉破裂出血116例

食管胃底曲张静脉破裂出血是肝硬化门脉高压症常见的并发症,止血是抢救生命的关键.我院近十年应用静滴奥曲肽加口服凝血酶治疗食管骨底曲张静脉破裂出血116例,疗效显著,现总结分析如下.     

康复新液联合奥美拉唑三联疗法治疗消化性溃疡45例

目的探讨康复新液联合奥美拉唑三联疗法治疗消化性溃疡的临床疗效。方法90例消化性溃疡患者随机分为两组,均给予口服奥美拉唑20 mg,克拉霉素0.25 g,甲硝唑0.4 g,2次/d,治疗7 d。治疗组加服康复新液10 ml,3次/d,疗程4周;对照组加服铝镁加混悬液1.5 g,3次/d,疗程4周。治疗期间以腹痛作为判断症状改善的指标,疗程结束后复查胃镜观察溃疡愈合情况。结果治疗组临床症状改善及溃疡病灶愈合明显优于对照组(P<0.05)。结论康复新液联合奥美拉唑三联疗法可有效治疗消化性溃疡。     

重组小鼠脑14-3-3γ蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

目的 制备重组小鼠脑14-3-3γ蛋白单克隆抗体(McAb),为神经系统退行性疾病的诊断提供标志物.方法 采用重组小鼠脑14-3-3γ蛋白免疫小鼠,制备抗小鼠脑14-3-3γ蛋白的多克隆抗体,并应用多克隆血清检测14-3-3蛋白在大鼠脑中的分布.进一步应用杂交瘤技术制备其单克隆抗体,并鉴定其特异性以及与天然抗原的亲合力.结果 制备的多克隆血清能有效识别大鼠脑组织的14-3-3蛋白,免疫组化显示在黑质,蓝斑,室周核,背外侧核染色阳性.制备的单克隆抗体可特异性识别重组14-3-3γ蛋白、大鼠脑及人脑中14-3-3蛋白.结论 重组小鼠脑14-3-3γ蛋白多克隆血清和单克隆抗体成功制备;此可用于神经系统退行性疾病的诊断.