牛乳中β-乳球蛋白的仿生亲和纯化

目的研究牛乳中β-乳球蛋白的仿生亲和分离技术。方法从仿生亲和介质库中筛选亲和配体,并进行吸附条件优化。结果得到可以特异吸附乳球蛋白的固定化三乙烯四胺亲和配体,确定最佳结合缓冲液为10mmol/L磷酸盐缓冲液(含0.15 mmol/L NaCl,pH7.0),在此条件下,可实现一步从牛乳中纯化乳球蛋白,其纯度达到95%以上,回收率为83.35%。测定得到固定化三乙烯四胺的最大吸附容量为52.54 mg/g干介质。结论固定化三乙烯四胺亲和介质可从牛乳中纯化出高纯度β-乳球蛋白,且纯化流程简便,介质吸附量较大(52.54 mg/g干介质),适合工业化生产。     

转基因牛乳中重组人乳铁蛋白的仿生亲和纯化

目的从转基因牛乳中亲和纯化重组人乳铁蛋白。方法从仿生亲和介质库中筛选亲和配体,进行重组人乳铁蛋白的纯化研究。结果筛选出可以特异性结合重组人乳铁蛋白的固定化β-丙氨酸亲和配体,从转基因牛乳中一步纯化的重组人乳铁蛋白纯度为95.2%,蛋白回收率可达81.9%。经放大实验表明该亲和纯化工艺适合工业上大规模纯化乳铁蛋白。结论固定化β-丙氨酸可从转基因牛乳中纯化出高纯度重组人乳铁蛋白,工艺适合工业化生产。     

日本医蛭中一种新抗凝血蛋白质的仿生亲和纯化及鉴定

目的从日本医蛭中快速提取和纯化生物活性蛋白质。方法利用仿生亲和介质库进行配体筛选和1步纯化。结果从日本医蛭中纯化出了1种具有抗凝血活性的新型低丰度蛋白质,命名为NLP-1(New Leech Protein-1)。通过进一步分析,其相对分子质量为13800,蛋白回收率可达到69.2%,其在血浆中含量为0.02 mg/mL时即可产生明显的抗凝血现象。利用MALDI-TOF-TOF分析,在蛋白质数据库中未找到相似蛋白质或多肽。结论从日本医蛭中纯化出的NLP-1蛋白质是1种新型的抗凝血物质,具有很高的开发研究价值。