无血清培养富集乳腺癌干细胞的初步研究

目的：探讨富集乳腺癌干细胞的方法,以获得稳定数量的肿瘤干细胞。方法：（1）采用无血清悬浮培养方法,从乳腺癌MDA-MB-435细胞中筛选和培养肿瘤干细胞。（2）采用相差显微镜观察含胰岛素和不含胰岛素的无血清培养基中干细胞球形成大小、数量及随时间生长变化情况。（3）采用荧光显微镜观察Hoechst33342染料对MDA-MB-435肿瘤干细胞染色情况。（4）将MDA-MB-435肿瘤干细胞转人有血清培养基培养诱导分化,观察是否能有分化现象。结果：（1）采用无血清悬浮培养方法筛选和培养MDA-MB-435肿瘤干细胞成功。（2）发现不含胰岛素的无血清培养基中,形成的肿瘤干细胞团数量多且体积大。（3）随着培养时间延长,肿瘤干细胞球数量逐渐增多,体积逐渐变大。（4）Hoechst33342染料对肿瘤干细胞染色鉴定,约有90％肿瘤干细胞蓝色荧光染料较弱,呈暗淡区。（5）MDA-MB-435肿瘤干细胞经含血清培养基再次培养,具有分化功能。结论：含生长因子的无血清培养基培养MDA-MB-435细胞,可生成肿瘤干细胞球;不含胰岛素的无血清培养基更适合作为筛选肿瘤干细胞的培养基。     

汉防己甲素衍生物HL-27对BLM解旋酶生物学特性的影响北大核心CSCD

目的研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶生物学特性的影响。方法利用荧光偏振技术研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶DNA结合活性、解链活性的影响;利用孔雀绿-磷钼酸铵比色法研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶ATPase活性的影响;利用紫外吸收光谱法研究汉防己甲素衍生物HL-27对BLM^(642-1290)解旋酶构象的影响。结果当HL-27浓度达到33.34μmol·L^(-1)时,其对dsDNA或ssDNA与BLM^(642-1290)解旋酶结合活性的抑制率分别为41.35%、59.54%;当HL-27浓度达到50 μmol·L^(-1)时,其对BLM^(642-1290)解旋酶解链活性的抑制率为78.68%;当HL-27的浓度为100μmol·L^(-1)时,其对BLM^(642-1290)解旋酶ATPase活性的抑制率为43.8%。结论汉防己甲素衍生物HL-27可以抑制BLM^(642-1290)解旋酶的DNA结合活性、解链活性与ATPase活性。     

莽草酸抑制BLM解旋酶活性及肝癌细胞的研究

目的：研究莽草酸( shikimic acid)对BLM解旋酶的生物学特性的影响及对肝癌细胞的抑制作用。方法2012年11月—2013年7月应用荧光偏振技术研究莽草酸对 BLM解旋酶的 DNA结合活性,CCK-8检测莽草酸对肝癌细胞增殖的抑制作用。结果培养24 h,A100(100μmol/L)﹑A50(50μmol/L)﹑A25(25μmol/L)三组与不加药对照组相比,抑制率分别为25.73%﹑21.31%﹑18.25%,对肝癌细胞HepG2增殖具有抑制作用(P<0.05)。结论①莽草酸不能结合BLM 解旋酶,不能抑制其与 DNA 的结合,不能抑制BLM解旋酶的生物学活性。②莽草酸对HpG2细胞的生长有一定的抑制作用,HpG2细胞的生长抑制作用随药物作用时间的延长有减弱的表现。③莽草酸抑制肿瘤细胞生长的作用机制不是其通过对BLM解旋酶DNA结合活性的抑制来实现的。     

WB抗体不确定/阴性受检者HIV-1-RNA检测结果分析

目的 探讨核酸定量检测对诊断HIV-1抗体不确定/阴性受检者感染的临床应用价值。方法 收集贵州省3市2021年1月—10月艾滋病初筛实验室进行的筛查实验(酶联免疫吸附法、化学发光和快速检测法)且抗体有反应性的受检者进行免疫印迹法(western blotting, WB),对WB检测结果为HIV-1抗体不确定/阴性受检者进行随访追踪并增加核酸定量检测作为补充实验，后将初筛试验结果、WB试验结果及核酸定量检测结果纳入统计分析。结果 3 800例初筛有反应性的受检者经过WB确证为抗体阳性占76.9%、抗体阴性占6.6%、抗体不确定占16.4%。876例WB抗体不确定及阴性受检者核酸定量检测分布显示，病毒载量(viral load, VL)>5 000copies/ml有175例，占20.0%;VL水平在250～5 000copies/ml有4例，占0.5%;低于检测下限6例，占0.7%;未检出691例，占78.9%。初筛试验不同检测方法间与VL阳性率有明显差异，快速检测法和VL阳性符合率最低，占12.1%,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent as...