外源性金属硫蛋白对β-淀粉样蛋白所致大鼠海马氧化应激的影响

目的　观察金属硫蛋白对 β 淀粉样蛋白 (Aβ)所致的氧化应激 (OS)的影响。 方法　在成年大鼠侧脑室内注入聚集态 β 淀粉样蛋白1 5nmol后 ,随即在实验组用微渗泵持续注射不同剂量和种类的金属硫蛋白 (metallothionein ,MT) ,对照组金属硫蛋白用生理盐水代替。 5d后测定大鼠海马几种氧化 抗氧化指标以及与认知能力有关的乙酰胆碱酯酶 (AChE)的活力。结果　相对于对照组 ,低浓度MT2 (0 0 5g/L)和高低 (1 0和0 0 5g/L)两种浓度的MT3均可导致GSH水平升高 ,低浓度MT3还可以使海马中GSH Px的活性增强。高浓度MT3不但对抗氧化酶无影响 ,组织中MDA含量反而升高。结论　MT脑室内注射可以提高鼠脑的抗氧化能力 ,但MT3的作用效果与浓度有关。相同浓度的MT2和MT3后者使动物抗氧化能力提高的作用更强。     

蛋白质组学研究相关技术及其在生物医学研究中的应用

蛋白质组学是以生物体系整体蛋白质为研究对象的新的研究领域，重点介绍了蛋白质组学研究常用技术方法及其在生物医学研究应用方面的进展。     

基因重组小肠三叶因子预防和治疗大鼠胃溃疡的研究

实验制备重组人小肠三叶因子（ｒｈＩＴＦ），用乙醇诱发大鼠胃溃疡模型研究该蛋白在体内的预防和治疗效果。先用９０％的乙醇１ｍｌ诱发溃疡，然后分不同的时间和不同的剂量尾静脉注射ｒｈＩＴＦ，以牛血清白蛋白作对照。结果发现在胃溃疡发生１ｈ前注射０．２～１ｍｇ的ｒｈＩＴＦ有明显的预防保护作用；而溃疡发生后０．５～５ｈ，静脉注射０．２～１ｍｇ的ｒｈＩＴＦ的较好的治疗作用。     

金属硫蛋白对快速老化痴呆小鼠海马抗氧化损伤作用的研究

目的研究金属硫蛋白对快速老化痴呆小鼠（SAMP8）海马抗氧化损伤的作用。方法成年SAMP8小鼠腹腔注射不同剂量和种类的金属硫蛋白（metallothionein，MT，MT3和MT1）。空白对照组用生理盐水代替，连续注射28d后测定小鼠海马几种氧化-抗氧化生化指标。结果高、中浓度MT3组与空白对照组比较总超氧化物歧化酶（SOD）活性升高，丙二醛（MDA）水平降低P〈0．05。中浓度MT1和高、中、低3种浓度的MT3均可导致海马组织谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）的活性增强P〈0．05；相同浓度的MT3组SOD、GSH—Px活性高于MT1组P〈0．05。结论MT可以提高鼠脑的抗氧化能力，MT3的作用效果与浓度有关。相同浓度的MT1和MT3，后者使海马抗氧化能力提高的作用更强。     

在大肠杆菌表达体系中以包涵体形式存在的真核生物蛋白质的分离、复性和二硫键的形成

在大肠杆菌中表达的含有二硫键真核生物的重组蛋白，往往以包涵体的形式存在。存在于包涵体的重组蛋白，因分子内及分子间二硫键的错配，而常常导致重组蛋白无生物活性。着重介绍了一些从包涵体中分离有正确配对的二硫键重组蛋白新的技术条件，总结了含有二硫键真核生物重组蛋白的不同分离和复性步聚及方法，并对重组蛋白在体外折叠的机理进行了探讨．     

外源性的锌诱导兔肝金属硫蛋白对原代肝细胞铅毒性的保护作用

锌诱导兔肝金属硫蛋白（Zn7-MT)是一种富含半胱氨酸的低分子量的锌结合蛋白，在金属代谢和解毒方面起着十分重要的作用。本项研究是采用外源性的MT在鼠原代肝细胞（RPHC）中，对金属铅毒性方面所起的保护作用进行研究，其方法是将RPHC单层培养24小时，然后加入一定浓度的（Zn7-MT)后，并将RPHC在各种浓度铅中，实施暴露24小时，分别测定细胞乳酸脱氢酶的渗出量和K^ 的损失来评价它们对细胞的毒性作用，同时，研究铅在细胞内，外的铅元素的分布和吸收情况，以及在Zn7-MT的存在下，探讨Zn7-MT在RPHC中对铅毒性方面所起的作用，实验结果证明，在Zn7-MT的存在下，铅对细胞的毒性作用显著性降低，其细胞对铅元素的吸收和聚集产生一定的改变，在对照组细胞的胞质中，铅可能主要与高分子量的蛋白结合，而在Zn7-MT存在下，这些金属可能主要与Zn7-MT相结合。     

睾酮对大鼠肝脏金属硫蛋白诱导合成的作用

本研究主要观察了睾酮对大鼠肝脏金属硫蛋白(Metallothionein,MT)诱导合成的作用,并动态观察了不同锌营养状态的大鼠在急性力竭运动后的恢复期中,肝脏金属硫蛋白诱导合成和锌、铜、铁离子含量的变化,探讨了它们之间的关系.结果显示大鼠皮下注射睾酮能够刺激诱导肝脏MT的合成.锌缺乏引起安静状态下大鼠肝脏MT含量下降,MT下降的原因可能与睾酮低下和锌离子减少有关.睾酮可能是MT在体内的正向调节因子.营养性锌缺乏不仅引起大鼠肝脏MT和锌基础水平的下降,而且导致急性力竭游泳后肝脏MT峰值较晚出现.这表明锌缺乏造成MT对运动的应激能力和合成速率下降,这将不利于运动后自由基的清除和组织的恢复.不管大鼠的锌营养状态如何,力竭游泳后,肝脏锌、铜、铁的含量均出现不同程度的升高或升高趋势.这些金属离子的升高和再分布,可能与MT的升高有关.     

从生产胰岛素后的猪胰残渣中提取制备胰酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶的研究

在党的无产阶级教育方针指引下,从我国国民经济实际需要出发,我们在学校教学、科研、生产三结合基础上选择了胰脏综合利用这一研究课题,从生产胰岛素后的猪胰残渣中制备了胰酶、结晶胰蛋白酶、糜蛋白酶和具有高度专一性的胰蛋白酶抑制剂等多种生化药品,为扩大胰岛素和胰酶的生产开辟了一条新途径。通过调查了解,目前国内还没有一种较好的方法能从胰脏中同时大量制得胰岛素和各种酶类。几种产品不能同时兼得,造成互争原料,在一定程度上影响胰岛素的生产。国外曾报道从牛胰脏残渣中提取牛胰蛋白酶等,但因收率较低,方法繁杂,成本高,未见在生产中广泛     

小肠三叶因子保护胃黏膜促进溃疡愈合的实验研究

目的:研究基因重组人小肠三叶因子(recombinant human intestinal trefoil factor , rhITF)促进慢性胃溃疡的愈合、保护胃黏膜抵抗多种损伤的作用及其机制.方法:(1) 急性损伤方法:用乙醇,阿司匹林,应激和幽门结扎诱发胃黏膜损伤,用Guth法测定损伤指数.(2)慢性溃疡产生法:用50%(质量分数)乙酸接触胃体部桨膜面.损伤后第2天开始经口灌 rhITF 11 d,第12天麻醉下测定胃黏膜面血流量(GMBF),取胃液测定胃酸排除量,检查溃疡指数、胃黏膜氨基己糖和一氧化氮浓度,检测溃疡底部一氧化氮合酶iNOS mRNA的表达.结果: rhITF有保护胃黏膜抗急性损伤的作用,在应激诱发的损伤中,胃黏膜糖蛋白含量增加.rhITF促进慢性胃溃疡的愈合,治疗组和对照组比较,溃疡指数和胃酸排除量明显减少(P<0.05),GMBF、Hex和NO含量及iNOS mRNA表达增加(P<0.05).结论:rhITF 保护胃黏膜可能和胃黏膜黏液糖蛋白增加有关.rhITF促进慢性胃溃疡愈合,其机制可能增加Hex含量和GMBF,抑制胃酸,刺激 iNOS的表达.     

大鼠侧脑室内注射β淀粉样蛋白(25～35)致氧化应激反应的动态变化

观察外源性β淀粉样蛋白（β－Amyloid peptide,Aβ)25-35引起大鼠大脑的氧化应激。于大鼠侧脑室内一次性注射聚集态的Aβ（25－35）15nmol后，5，9和14d分别测定海马的脂质过氧化产物丙二醛（malodialdehyde,MDA)含量的还原型谷胱甘肽（reduced glutathione,GSH)水平以及谷胱革肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-PX)和超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD)活性。与对照组相比，Aβ组大鼠术后5d时MDA含量增加（P＜0．05），抗氧化酶GSH－PX活性下降（P＜0．001），9d时GSH－PX和SOD活性显著升高（P＜0．01和P＜0．05）。14d时，两组间各个指标均无明显差别。结果表明在大鼠脑室内一次性注射Aβ（25－35）可导致氧化应激反应，这一改变与时间相关，可被机体抗氧化系统所代偿。