慢性心功能不全时经主动脉移植干细胞的可行性研究

心肌梗死或/和慢性心功能不全时,心脏干细胞移植是一项颇有应用前景的新的治疗技术。但是,对于非缺血性心脏病所致的慢性心功能不全,目前所采用的移植路径有一定的局限性。本试验拟研究慢性心功能不全时,封堵主动脉窦上部经主动脉根部移植干细胞是否可行。阿霉素所致的慢性心功能不全兔模型,采用双球囊封堵主动脉窦上部经主动脉根部自体移植骨髓单核细胞,4周后评价心功能。在封堵主动脉窦上部经主动脉根部移植干细胞时,无1例因移植手术死亡。双球囊充盈时造影显示,主动脉窦显影良好,大部分情况下,左、右冠状动脉可显影。骨髓单核细胞移植4周后,左室射血分数改善明显(P=0 .0 34)。所以,慢性心功能不全时,封堵主动脉窦上部经主动脉根部移植干细胞安全可行。     

瞬时外向钾电流在糖尿病心肌病电重构中的作用

目的：探讨糖尿病心肌病（DCM）大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流（Ito）的变化,了解其在电重构中的作用。方法选用20只健康成年SD大鼠,随机分为对照组（n=10）和DCM组（n=10）,并通过病理组织学证实为DCM心肌病理学改变。分别对两组大鼠采用改进的耐钙成年大鼠急性酶分离方法分离心肌细胞,运用膜片钳技术以全细胞模式分别记录两组大鼠心室肌单细胞的Ito和膜电容,并分析比较两组大鼠心室肌Ito的变化。结果与对照组比较,DCM组大鼠左心室心肌细胞的Ito电流密度显著低于对照组[＋70 mV时,（16.80±9.10） pA/pF v s（36.25±5.20）pA/pF]（P〈0.05）,DCM组的Ito的I-V曲线明显较对照组下移。结论 DCM的Ito数量明显减少,在DCM心肌电重构中起着重要作用。 Ito的减少及Ito通道的分布密度不同,可导致动作电位时程与有效不应期发生变化,可能与临床严重心律失常的发生有关。     

硫氢化钠对糖尿病心肌病大鼠心脏保护作用及对JNK/FoxO1/Bcl-2信号通路的影响

摘要： 目的 观察外源性硫化氢的供体硫氢化钠 （NaHS） 对糖尿病心肌病 （DCM） 大鼠模型心肌损伤的保护作用及相关机制。方法 运用糖尿病饮食及链脲佐菌素 （STZ） 腹腔注射法建立DCM大鼠模型; 选取DCM大鼠16只, 正常大鼠16只, 随机分为DCM+0.9%氯化钠组 （DCM+Saline组）、 DCM+硫氢化钠组 （DCM+NaHS组）、 正常大鼠+0.9%氯化钠组 （Control+Saline组）、 正常大鼠+硫氢化钠组 （Control+NaHS组）, 每组8只; 予以DCM+NaHS组、 Control+NaHS组腹腔注射NaHS溶液100 mmol/ （kg·d）（浓度12 mmol/L, 体积8.3 mL/kg）, DCM+Saline组、 Control+Saline组大鼠腹腔注射等量生理盐水, 持续12周。实验结束行心脏超声测定左室射血分数 （LVEF） 及左室缩短分数 （LVFS）, 随后取左室心肌组织, 采用HE染色及Masson染色观察心肌组织病理改变, Western blot实验检测B淋巴细胞瘤-2基因 （Bcl-2）、磷酸化氨基末端蛋白激酶 （p-JNK）、 磷酸化叉头蛋白家族1 （p-FoxO1） 蛋白的表达。结果 糖尿病及硫氢化钠对大鼠心功能指标、 p-JNK、 p-FoxO1及Bcl-2蛋白有影响, 除外Bcl-2蛋白均存在交互作用 （P＜0.05）; 其中, DCM大鼠 LVEF及LVFS下降、 心肌细胞肥大及心肌间质纤维化, Bcl-2、 p-FoxO1蛋白表达下降、 p-JNK蛋白表达增加 （P＜ 0.05）; NaHS可以使DCM大鼠心功能指标、 病理组织变化得到改善, Bcl-2、 p-FoxO1蛋白表达增加、 p-JNK蛋白表达减少 （P＜0.05）。结论 DCM心肌损伤与细胞凋亡相关, 硫氢化钠可以减轻DCM心肌损伤保护心脏功能, 可能通过作用于JNK/FoxO1/Bcl-2发挥作用。     

齐墩果酸对血管紧张素II诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响及其作用机制

目的 研究齐墩果酸（OA）对血管紧张素II（Ang II）诱导的大鼠心肌成纤维细胞（CFs）增殖的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 采用胰酶消化法及差速贴壁法培养大鼠CFs,实验分为空白对照组、Ang II（10-6 mol·L-1）组、Ang II（10-6 mol·L-1）+OA（60,80,100 μmol·L-1）组。细胞长至融合状态时,先加入OA（60,80, 100 μmol·L-1）预处理1 h,然后加入Ang II（10-6 mol·L-1）作用24 h。应用二甲基四唑氮蓝（MTT）法测定细胞增殖活性,酶联免疫吸附法（ELISA）测定细胞上清中I型胶原含量,蛋白质印迹法（Western blotting）和激光扫描共聚焦显微镜分别检测各组CFs中结缔组织生长因子（connective tissue growth factor,CTGF）蛋白表达和活性氧（ROS）变化。结果 Ang II能诱导CFs增殖,并能增加细胞上清中I型胶原的含量,同时CTGF的蛋白表达及CFs中ROS水平也显著增加。OA在60~100 μmol·L-1浓度范围内呈浓度依赖性抑制Ang II诱导的CFs增殖,并且OA能减弱Ang II诱导的CTGF和ROS表达。结论 OA可通过ROS-CTGF途径抑制Ang II诱导的CFs增殖和胶原生成。     

慢性充血性心力衰竭心脏干细胞移植后心肌电生理学特性的变化

研究慢性充血性心力衰竭(简称心衰)时,干细胞移植对心肌电生理学特性的影响。日本大耳白兔分为健康对照(8只)和心衰两大组,后者包括骨髓间充质细胞移植组(8只)、骨骼肌成肌细胞移植组(6只)和假手术组(8只)。慢性心衰模型由阿霉素制成。干细胞移植采用经双球囊封堵主动脉窦上部灌注自体骨髓间充质细胞或骨骼肌成肌细胞。比较干细胞移植前后心功能有无变化。测定多部位的有效不应期(ERP)及离散度(ERPd);右室流出道、左室心尖部或室间隔连续刺激(S1S1)或早搏刺激时,其它各部位的兴奋传导时间(AT)和兴奋传导时间离散度(ATd),比较各组间有无差异。结果:骨髓间充质细胞移植4周后,左室射血分数有改善的趋势。各组间ERP及ERPd无差异。与健康对照组和假手术组相比,骨骼肌成肌细胞移植组和骨髓间充质细胞移植组的AT和ATd有增加,在骨骼肌成肌细胞移植组更加明显。AT和ATd的变化在左室心尖部刺激时最为显著。在骨髓间充质细胞移植组,出现1例自发性室性心动过速,并猝死。结论:慢性充血性心衰时,干细胞自体心脏移植后,心肌组织的电传导能力下降,离散度增大。     

内皮祖细胞及其在缺血性心脏病治疗中的应用

缺血性心脏病(ischemic hcart disease,IHD)是由于冠脉循环改变引起冠脉血流和心肌需求之间不平衡而导致的心肌损害,其中最常见的原因是冠心病.     

慢性充血性心力衰竭患者血清基质金属蛋白酶与肿瘤坏死因子-α变化的相关性研究

目的探讨慢性充血性心力衰竭(CHF)患者血清基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制因子(TIMPs)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化及相关性。方法CHF患者48例,正常对照组30例。采用ELISA法测定血清MMP-9和TIMP-1的含量,双抗体夹心法测定血清TNF-α的含量,分析MMP-9/TIMP-1值与TNF-α和左室舒末内径(LVEDD)及射血分数(EF)的关系。结果CHF患者血清MMP-9、MMP-9/TIMP-1值和TNF-α含量明显增加(P均<0.01),TIMP-1含量明显减少(P<0.01),MMP-9/TIMP-1值与TNF-α含量和LVEDD呈正相关(P<0.05),与EF呈负相关(P<0.05)。结论CHF患者MMP-9/TIMP-1值与TNF-α含量呈明显的正相关。MMP-9/TIMP-1值可作为左室重构和左心功能恶化的指标。     

内皮祖细胞与冠心病的研究

内皮祖细胞是内皮细胞的前体细胞,是一类能够迁移、增殖,并分化为成熟血管内皮细胞的前体细胞,其参与人胚胎血管生成,及出生后血管新生和内皮损伤后的修复过程。近年来的研究表明其与冠心病发生、发展及治疗的关系密切,为冠心病治疗提供了新思路。现就内皮祖细胞的生物学特性及其在冠心病中的研究现状做一综述。     

TNF-α对大鼠骨髓间充质干细胞黏附分子L-选择素表达的影响

目的 研究大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)经不同浓度的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)预处理后,表面的黏附分子L-选择素(L-selectin,CD62L)的表达变化以及其表达变化与细胞因子浓度之间的关系.方法 采用等密度梯度离心法收集大鼠MSCs并用贴壁培养法进行扩增纯化,经免疫组化法鉴定后,加入不同浓度TNF-α分别作用24小时,将其消化分离和标记后,采用流式细胞仪(flow cytometer,FCM)对其表面的CD62L的表达进行检测.结果 经TNF-α预处理24小时的大鼠MSCs经流式细胞仪检测,其表面CD62L成阳性表达的细胞占所检测细胞的百分比与未加入任何细胞因子预处理的空白组大鼠MSC相比较,差异显著,不同浓度组间比较,差异显著.结论 经不同浓度TNF-α预处理的大鼠MSCs表面CD62L表达较空白组要高,并且随着TNF-α浓度的升高大鼠MSCs表面CD62L的表达也相应升高.