远志皂苷元对新生大鼠皮质神经元的营养作用

目的 研究远志皂苷元(senegenin)对新生大鼠皮质神经元的神经营养作用.方法 原代培养新生24 h内SD大鼠皮质神经元,采用0.4% B27+DMEM/F12培养基制备营养缺乏模型.远志皂苷元0.5,1 和2 μmol·L-1及阳性对照组碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)10 μg·L-1.倒置显微镜下观察各组皮...     

大黄素甲醚对新生大鼠皮质神经元营养作用的靶点研究

目的探讨大黄素甲醚(physcion,Phy)对新生大鼠皮质神经元营养作用的靶点。方法选用与神经营养作用相关的工具药酪氨酸激酶Trk受体抑制剂K252a、腺苷A2a受体抑制剂ZM241385及蛋白激酶C抑制剂G6976,实验设溶媒对照组、抑制剂组、Phy组、抑制剂+Phy组,四甲基偶氮唑蓝法分析各抑制剂对神经元存活的影响,倒置显微镜下观察神经元突起生长情况,Image-pro plus 6.0软件测量突起长度,分析各抑制剂能否拮抗Phy促进突起生长的作用,初步推断Phy对皮质神经元神经营养作用的靶点。结果溶媒(0.1%DMSO)对照组、K252a(100μmol/L)组、ZM241385(20 nmol/L)组和G6976(100μmol/L)组的神经元活性分别与空白对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.01)。K252a(100μmol/L)+Phy组神经元平均突起长度与Phy组比较,差异有统计学意义(P<0.01);而ZM241385(20 nmol/L)+Phy组、G6976(100μmol/L)+Phy组与Phy组比较,神经元平均突起长度差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 Phy对新生大鼠神经元的神经营养作用可被酪氨酸激酶Trk受体抑制剂K252a阻断,而腺苷A2a受体抑制剂ZM241385和蛋白激酶C抑制剂G6976的阻断作用则不明显,提示Phy神经营养作用的靶点可能是Trk受体,即Phy通过激动Trk受体而发挥神经营养作用的。     

大黄素甲醚对体外新生大鼠皮质神经元的营养作用

目的研究大黄素甲醚对新生大鼠皮质神经元的神经营养作用。方法体外以0.4%B27+DMEM/F12培养出生24h内的大鼠皮层神经元。采用NSE免疫细胞化学染色法进行神经元鉴定。分为溶媒对照组,大黄素甲醚(0.5、1、2、4μmol/L)组和碱性成纤维细胞生长因子bFGF(10 ng/mL)组。显微镜观察各组皮质神经元的形态,利用软件统计神经元平均突起长度;MTT法检测神经元的存活情况;RT-PCR检测MAP-2表达量。加入Trk受体抑制剂或腺苷受体抑制剂单独作用或与大黄素甲醚相互作用,检测突起长度变化。结果与溶媒对照组相比,培养3d后的大黄素甲醚1、2、4μmol/L剂量组均可延长神经元的存活时间,促进神经元突起生长,增加MAP-2 mRNA的表达量。加入Trk受体抑制剂能抑制大黄素甲醚对神经元的影响,而加入腺苷受体抑制剂则无影响。结论大黄素甲醚对新生大鼠皮层神经元具有神经营养作用。