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蛋白质磷酸化是生物体内重要的翻译后修饰,几乎参与调节着细胞增殖、信号转导、新陈代谢、肿瘤发生等过程在内的所有生命活动。对磷酸化蛋白质组的全面分析可以帮助人们深入了解磷酸化蛋白在生命过程中的作用,协助发现生物标志物,辅助疾病的诊疗。然而,磷酸化蛋白丰度低、信号被非磷酸化肽段所掩盖等问题限制了磷酸化蛋白质组学的发展。因此,亟需开发高效的富集策略,如设计新型纳米材料,合并多种分析方法等,以提高检测灵敏度、富集特异性,增大富集容量。本文回顾了近年来磷酸化蛋白质组学研究策略中的富集策略进展及其在疾病研究中的应用。 相似文献
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目的:建立液相色谱串联质谱法(LC-MS-MS)测定人血浆中法罗培南浓度,研究法罗培南钠颗粒在健康中国志愿者体内的药动学行为。方法:选取10名健康志愿者(男女各半)口服100mg的法罗培南钠颗粒,进行单次给药及多次给药达稳态后的药动学研究,采集静脉血样,血浆样品用三氯乙酸沉淀蛋白后用液相色谱串联三级四极杆质谱检测原形药物浓度。结果:法罗培南在5.02~6528ng/mL范围内线性关系良好,最低检测限为2ng/mL(S/N≈3),平均回收率〉90%,批间批内RSD均小于10%。计算得到单次口服100mg法罗培南钠颗粒的主要药动学参数:Cmax为(2322±1345)ng/mL,tmax为(0.78±0.32)h,t1/2为(0.98±0.34)h,MRT为(1.8±0.4)h,AUC0-8为(3953±1906)ng·mL^-1.h,AUC0-∞为(3980±936)ng·mL^-1.h。连续多次口服法罗培南钠颗粒达稳态后,测得法罗培南钠的主要药代动力学参数:Cssmax为(2870±1178)ng/mL,Cssmin为(72±55)ng/mL,Cssav为(658±439)ng/mL,tmax为(0.80±0.20)h,t1/2为(0.91±0.16)h,AUCss为(5263±3513)ng·mL^-1.h。结论:LC-MS-MS法操作简便快速,灵敏度高,结果准确,适合人血浆中法罗培南的浓度测定;多次给药达稳态时主要药动学参数与单次给药基本一致,统计分析差异无统计学意义,表明法罗培南钠在体内基本无积蓄。 相似文献
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建立LC-MS/MS法对替米沙坦氨氯地平双层片的有关物质进行鉴定。双层片中的替米沙坦层及氨氯地平层分别取样和反相高效液相色谱线性梯度法分析测定,替米沙坦及氨氯地平均与其有关物质分离良好。检测出替米沙坦中14个有关物质峰,对其中主要7个有关物质经二级质谱测定和解析鉴定了它们的结构,同时检测出氨氯地平中2个为英国药典收载的有关物质。 相似文献
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核磁共振技术在新精神活性物质筛查中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
新精神活性物质结构多变,对照品难以获得,目前常用的气质联用和液质联用技术在结构的确证上存在一定的局限性,导致禁毒实战中对新精神活性物质的快速鉴定受到限制。核磁共振技术是解析未知物结构最有效的手段,特别适合于结构变异迅速的新精神活性物质的快速分析确证鉴定。本文综述了核磁共振技术在合成大麻素类、合成卡西酮类、哌嗪类、苯乙胺类、氯胺酮及苯环利定类和芬太尼类新精神活性物质结构筛查中的应用,发现各类新精神活性物质均有各自基本一致的特征母体结构和相应的NMR信号,可以为快速鉴定新精神活性物质的结构类别提供科学证据。并对扩散排序谱以及液核联用技术在新精神活性物质的应用前景进行展望,为新精神活性物质的筛查工作提供新的思路。 相似文献
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采用1,2-二(三乙氧基硅基)乙烷和胺丙基三乙氧基硅烷为双硅源,阳离子表面活性剂十八烷基三甲基氯化铵(C18 TAC)为模板,在碱性条件下成功制备了一种新型胺丙基杂化介孔硅胶(APMO)。经粉末X-射线衍射法、傅里叶-红外光谱法和扫描电子显微镜等表征方法证明,APMO具有良好的单分散性微球形貌、有序介孔、比表面积大等优点,并将该介孔材料直接用作色谱固定相并进行色谱性能分析。结果表明,APMO自制柱通透性良好,能够有效分离3种多环芳香族化合物,在快速分离分析方面具有一定的优势。 相似文献
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以正硅酸乙酯(TEOS)为硅源,插入三嵌段聚合物,十二烷基磺酸钠(SDS)为助模板剂,乙醇为助溶剂,在弱酸性条件下合成有序介孔氧化硅微球(OMSs),并对其进行表征,研究其性能。结果表明,OMSs具有大的比表面积(700 m2/g)、有序的孔结构、窄的孔径分布及表面光滑的单分散球形形貌,其对苦参素具有强的吸附性能。将此OMSs匀浆装柱,在高流速流动相条件下具有较低的柱压降,能够有效分离芳香族化合物苯和硝基苯。作为色谱填料,OMSs有较好的应用前景。 相似文献
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目的:建立同时测定盐酸普萘洛尔原料药中乙醇、异丙胺、环氧氯丙烷、三乙胺和二甲苯残留量的方法。方法:采用毛细管气相色谱法。色谱柱为Wonda Cap-1毛细管柱,氢火焰离子化检测器,载气为氮气,流速为3 ml/min,进样口温度为180℃,检测器温度为250℃,程序升温,直接进样,进样量为1μl,以N,N-二甲基甲酰胺为溶剂,采用外标法计算溶剂残留量。结果:5种有机溶剂均能得到良好分离;各溶剂在所考察的质量浓度范围内与峰面积线性关系良好(r=0.993 8~0.999 8);精密度试验的RSD≤4.07%;平均加样回收率为98.31%~103.75%(RSD=0.12%~3.66%,n=3)。结论:该方法简便、准确、可靠,可用于盐酸普萘洛尔原料药中多种有机溶剂残留量的同时测定。 相似文献
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建立一种巯基衍生化LC-MS/MS法测定大鼠血浆中内源性谷胱甘肽含量的方法。血浆样品经衍生化处理后采用电喷雾离子源(ESI)-三重四极杆质谱仪于正离子模式下进行选择反应检测(SRM)。色谱柱为Zorbax HILIC PLUS(4.6 mm×100 mm,3.5 μm);流动相为乙腈-水(含0.1%甲酸)(75∶25);流速为1 mL/min;柱温为35 ℃。甘氨酰酪氨酸作为内标物,4-(N-马来酰亚胺)苯基三甲基碘化铵(MPTA)作为衍生化试剂。方法学验证结果表明:衍生化后的谷胱甘肽在3.000~2 000 ng/mL范围内线性良好,r=0.997 1,最终定量下限约为10 pmol/L。准确度、提取回收率和基质效应均符合生物样本分析的要求。该方法对生物体内谷胱甘肽准确的定量、定性分析,以及其存在状态的正确评价有着重要的临床意义。 相似文献
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基于核磁共振代谢组学法研究雷公藤多苷片对大鼠代谢的影响 总被引:1,自引:1,他引:1
目的:采用核磁共振(NMR)代谢组学法研究雷公藤多苷片对大鼠代谢的影响.方法:以生物核磁共振技术结合模式识别和偏最小二乘-辨别分析法(PLS-DA)测定和分析灌胃不同剂量雷公藤多苷片混悬液后正常大鼠尿液内源性代谢物的变化,研究雷公藤多苷片对正常大鼠代谢过程的影响,并结合组织病理学检查结果进行验证.结果:不同剂量给药后,尿样中牛磺酸、葡萄糖、氮氧三甲胺水平均有所上升,而三羧酸循环中间产物柠檬酸和α-酮戊二酸水平均有所降低.偏最小二乘分析表明,给药组与对照组的代谢谱有明显差异.肾组织病理学检查未见改变,但肝组织病理学检查有明显病变.结论:雷公藤多苷片对正常大鼠代谢过程具有显著影响,其机制可能与肝线粒体功能受损及三羧酸循环中能量代谢异常有关,并导致葡萄糖代谢紊乱.代谢组学研究有助于认识雷公藤多苷片的毒性作用机制. 相似文献
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目的:建立盐酸雷莫司琼中S-异构体检查的高效毛细管电泳方法。方法:采用石英毛细管柱(50μm×50 cm,有效长度41.5 cm),运行缓冲液为20 mmol/L的磷酸二氢钠溶液(含1%的磺化-β-环糊精,磷酸调pH至3.0)。操作电压为-20 kV,柱温为25℃,检测波长为210 nm。结果:S-异构体和R-异构体的分离度为8.2,线性范围4.048-80.96μg/mL,平均回收率为99.80%,检测限为2μg/mL。结论:所建立的高效毛细管电泳方法灵敏、简便、准确、可靠,适用于盐酸雷莫司琼中S-异构体的检查。 相似文献