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目的 构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为标记的原核表达栽体,并观察EGFP基因在大肠杆菌中的表达情况.方法 据已知的EGFP基因序列,设计引物,并引入Nde Ⅰ和Xho Ⅰ酶切位点.采用PCR技术从含有EGFP的质粒pEGFP-C1中克隆EGFP编码序列;将其亚克隆入表达载体pTWIN1,得到以EGFP为标记的原核表达载体pTWIN-EGFP.转化大肠杆菌ER2566菌株,IPTG诱导EGFP基因表达.结果 经过IPTG诱导后,细菌培养物在长波紫外线的照射下,发出明亮的绿色荧光.结论 成功构建了原核表达载体pTWIN-EGFP,为应用EGFP作为报告基因和筛选标记奠定了实验基础. 相似文献
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目的 观察醒神通经导气针法联合康复治疗脑卒中后偏瘫的临床疗效。方法 将符合纳入标准的105例患者随机分为联合组、针刺组和康复组,每组35例。联合组采用醒神通经导气针法联合康复疗法治疗,针刺组采用醒神通经导气针法治疗,康复组应用Bobath技术神经生理疗法治疗。比较治疗前后美国国立卫生研究院卒中量表(national institute of health stroke scale, NIHSS)评分、肌张力评定(改良Ashwoth)、Fugl-Meyer评估表(fugl-meyer assessment scale, FMA)运动功能评分、血清白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)含量变化及临床疗效。结果 联合组有效率(91.4%)明显高于针刺组(80.0%)、康复组(77.1%)(P<0.05)。治疗后,3组NIHSS评分、肌张力Ashwoth分级评定、FMA运动功能评分较治疗前均明显改善(P<0.001),血清中IL-6含量均下降(P<0.001),康复组和针刺组T... 相似文献
5.
贵州荔波水族人群CSF1PO,TPOX和TH01STR基因座遗传多态性 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:调查贵州荔波水族人群CSF1PO,TPOX和TH01 STR基因座的遗传多态性. 方法:采集贵州省荔波县水尧水族乡97名水族无关个体EDTA抗凝血标本,Chelex-100法提取DNA, PCR进行扩增,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染方法进行分型,获取CSF1PO,TPOX和TH01 STR基因座的基因型,基因频率及杂合度(H),多态信息量(PIC),个体识别率(DP)和非父排除率(PPE)等法医学相关数据,并利用该人群这3个STR基因座的基因频率与文献报道的广西侗族等南方其他6个民族群体相同基因座的基因频率进行聚类分析. 结果:贵州荔波水族人群CSF1PO,TPOX和TH01 STR基因座分别检出等位基因6,5和5个,基因型分别为15,12和13个,各基因座基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05). 三个基因座的H分别为0.7287,0.5423,0.6904;PIC分别为0.6652,0.4880和0.6806; DP为0.8782,0.7361和0.8563;PPE为0.6148,0.3646和0.5737. 结论:CSF1PO和TH01基因座在贵州荔波水族人群中有较高的遗传多态性,该人群与广西侗族等6民族群体间的遗传关系和民族学研究的结果基本吻合. 相似文献
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重组内皮抑素腺病毒联合卡铂抗小鼠肺癌的实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 将重组内皮抑素腺病毒(Ad-E)和化疗药物卡铂联合治疗小鼠Lewis肺癌,观察其对肿瘤的抑制作用以探索其在肺癌治疗中的可行性.方法 建立小鼠LL/2肺癌模型,将荷瘤小鼠随机分为5组:生理盐水(NS)组,空载腺病毒(Ad-null)组,卡铂组,Ad-E组,Ad-E+卡铂组;观察肿瘤体积、瘤重、小鼠生存期、肿瘤血管生成、肿瘤细胞凋亡及治疗毒副反应.结果 与Ad-E或卡铂单药组相比,联合治疗组的肿瘤生长减慢,瘤重减轻,小鼠生存期延长,肿瘤组织微血管密度减少,肿瘤细胞凋亡增加,差异均有统计学意义(P<0.05).各治疗组小鼠均未出现明显毒副反应.结论 以腺病毒为载体的抗血管基因治疗联合化疗有较好的抑制小鼠Lewis肺癌效应,且无明显毒副作用. 相似文献
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目的:分离和克隆灭蚊真菌卡地腐霉类枯草杆菌蛋白酶基因已知片段的3′端未知序列。方法:采用PANHANDLE PCR,以基因组DNA为模板,通过链内退火及延伸形成一个类似锅柄形状的结构,经嵌套式PCR扩增得到未知目的片段。通过已知cDNA片段设计引物,PCR扩增得到该蛋白酶部分基因组序列,采用限制性内切酶BamH Ⅰ消化卡地腐霉基因组DNA,经去磷酸化处理后,在消化片段3′端连接一段与卡地腐霉类枯草杆菌蛋白酶基因5′端已知序列互补的5′端磷酸化寡核苷酸链NA,经链内退火及聚合酶延伸形成一锅柄状结构。结果:获得一大小为876bp的PCR产物,经序列分析验证,该panhandle PCR产物包含了已知卡地腐霉类枯草杆菌蛋白酶基因3′端未知的853bp核苷酸序列。结论:这种特殊的PCR方法可以高度有效地克隆和鉴定已知片段两侧的未知基因片段。 相似文献
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