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野生型p16和p53抑癌基因共转染对 K562细胞增殖的抑制作用 总被引:2,自引:0,他引:2
抑癌基因p16和p53在抑制肿瘤的发生中起重要作用,在髓细胞白血病细胞系K562中检测出这两种基因有纯合缺失。为探讨野生型p16和p53基因的转染与表达对K562细胞的生长影响,采用了脂质体介导外源野生型p16和p53共转染K562细胞,用免疫细胞化学染色检测p16和P53基因的表达,检测细胞生长曲线,采用流式细胞术进行细胞周期分析。结果显示,共转染后p53和p16在K562细胞中表达阳性率分别为23%和28%;细胞生长受到一定程度的抑制,G1期细胞的比例增加,S期细胞减少,与单独转染p53或p16基因的抑制作用有明显差别(P<0.05)。结论:外源野生型p16和p53基因的共转染比转染单基因对K562细胞生长有更明显的抑制作用,有可能成为白血病基因治疗的一种方法。 相似文献
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类风湿性关节炎和血清阴性脊柱关节病患者血清急性时相反应蛋白的测定及其临床意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:观察活动期类风湿性关节炎(RA)和血清阴性脊柱关节病患者血清4种急性时相反应蛋白α1-酸性糖蛋白(AAG)、α1-扶胰蛋白酶(AAT)、触珠蛋白(HPT)和铜蓝蛋白(CER)浓度的变化及其临床意义。方法采用ARRAY360蛋白质测定系统测定61例RA和血清阴性脊柱关节病患者及31例正常对照组血清AAG、AAT、HPT、CER浓度并进行比较,结果RA、血清阴性脊柱关节病及差了炎综合组患者该4项指标浓度均显著高于正常对照组(P<0.001),并与血沉、C-反应蛋白呈正相关。结论动态观察血清4种急性时相反应蛋白浓度的变化对照于关节炎患者病变活动的监测以及及药物疗效的判断等有一定的临床指导意义。 相似文献
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本研究旨在探讨Notch1信号通路的配体delta-like ligand4(DLL4)基因过表达对K562细胞增殖的影响及其可能的作用机制.采用脂质体介导将含配体DLL4基因的质粒pBudCE4.1-DLL4转染K562细胞,通过RT-PCR和Western blot检测转染48 h后DLL4基因的mRNA及蛋白表达,同样检测转染后Notch1受体胞内区(NICD)、下游靶基因Hesl的mRNA及蛋白表达;通过Western blot检测与Notch信号通路相关的细胞转录因子YY1、原癌基因C-MYC及抑癌基因Rb蛋白的表达水平;用CCK-8法检测转染后细胞的增殖情况;用流式细胞术检测转染质粒48 h后各组细胞的凋亡情况.结果表明,DLL4基因转染后的K562细胞中DLL4、NICD及下游靶基因Hesl的mRNA及蛋白表达量比对照组明显增多(P<0.05),说明DLL4的过表达激活了Notch1信号通路;Western blot方法检测显示,DLL4的转染增加了细胞转录因子YY1、原癌基因C-MYC及抑癌基因Rb蛋白的表达,从而抑制了K562细胞的生长,诱导细胞周期停滞于G1期及细胞凋亡的增加.结论:外源性DLL4基因过表达可有效活化K562细胞内Notch1信号通路,可能通过YY1、C-MYC及Rb等Notch信号通路相关基因的高表达诱导K562细胞的生长减慢及细胞凋亡. 相似文献
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共转染抑癌基因p16、p53对白血病细胞株HL-60及K562的抑制作用 总被引:1,自引:0,他引:1
人类髓系白血病细胞株HL 6 0、K5 6 2同时有p16、p5 3抑癌基因的缺失[1,2 ] 。已有研究将正常的p5 3或p16基因单独导入这两种细胞 ,可以不同程度地抑制肿瘤细胞的生长[1,2 ] 。如果同时将缺失的p16、p5 3两种基因导入HL 6 0及K5 6 2细胞中 ,可能有更好的抑制作用。材料和方法1 质粒与试剂 含野生型p16cDNA的质粒pBluescript p16由GordonPeters教授 (ImperialCancerResearchFund .London)惠赠 ,含野生型p5 3cDNA的质粒pC5 3 SN3及真核表达载体pCNe… 相似文献
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目的构建原癌基因c-myc核酶表达载体以抑制心血管系统细胞异常增殖。方法采用DNASIS软件对大鼠c-mycmRNA进行二级结构和最低自由能分析,确定第4600位核苷酸作为核酶的切割位点,设计并合成c-myc核酶。通过体外切割实验证明该核酶的有效性。进一步构建成c-myc核酶表达载体,转染同步化血管平滑肌细胞(VSMC)以检测其对原癌基因c-myc表达的影响。结果体外切割实验显示该核酶能有效地将85bp的模板切割成60和25bp的二个片段。所构建载体经酶切法和基因测序法证明其序列的正确性。转染VSMC后能有效抑制血管紧张素Ⅱ诱导的c-myc的表达。结论c-myc核酶表达载体能有效抑制VSMC的c-myc过度表达,适合用于动脉增殖性疾病的基因治疗。 相似文献
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急性白血病细胞中增殖细胞核抗原的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 探讨急性白血病细胞的增殖活性及其在白血病预后判断上的作用。方法 运用单克隆抗体免疫细胞化学染色技术检测了急性淋巴细胞白血病(ALL)和急性淋巴细胞白血病(ANLL)中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果 PCNA在ALL和ANLL中表达无显著性差异(P〉0.05),在ALL和ANLL中PCNA表达阳性细胞百分率分别为28% ̄95%和26% ̄96%。急性白血病中PCNA阳性细胞百分率与患者骨 相似文献
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研究内皮型一氧化氮合成酶(endothelialnitric oxide synthase,eNOS)CDNA 腺病毒载体 PadRSVeNOSCDNA 导入在人胎肾 293细胞 ( )中的表达。方法:大量制备及纯化质粒 eNOSCDNA ,将纯化eNOSCDNA 载体通过脂质体转染 293细胞48h 后,应用化学比色法测定293细胞提取物NOS 活性。结果:被转染 293细胞 NOS活性显著提高于未转染293细胞 NOS 活性犤( 0.62±0.03),(0.093±0.01)kU /L,P <0.001犦。结论:PA dRSVeNOSCDNA 导入人胎肾 293细胞是一种能使 NOS 活性显著升高的方法,为基因治疗原发性高血压及肾脏血管性疾病研究提供一条新的途径。 相似文献
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研究急性非淋巴细胞白血病细胞中原癌基因c-myc的表达及临床意义。方法采用蛋白质免疫印渍和单克隆抗体免疫细胞化学染色方法检测30例ANLL细胞中原癌基因c-myc的表达。结果19例表达阳性,阳性率为63%。ANLL中白血病细胞的阳性细胞百分率为29%-96%,c-myc在不同病人的白血病细胞中表达水平不一样;c-myc的表达和患者骨髓中白血病细胞百分率显著相关,和患者年龄,性别,外周血白细胞计数。 相似文献
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27例重叠综合征分析 总被引:2,自引:0,他引:2
重叠综合征(overlapsyndrome,OS)近年来已被公认是一组独立的结缔组织病,国内外陆续有所报道。现将我们收治的对例报告如下。1临床资料1.1一般资料27例OS患者均为住院患者,男2例,女25例,男:女为1:12.5。年龄15~66岁,平均38.7岁,其中21~50岁青壮年人18例(66.7%)。系统性红斑狼疮重叠类风湿性关节炎(SLE+RA)12例(44.4%),类风湿性关节炎重叠多肌炎或皮肌炎(RA+PM或DM)4例(14.5%),系统性红斑狼疮重叠多肌炎或皮肌炎(SLE+PM或DM)3例(11.1%),系统性红斑狼疮重叠系统性硬皮病(SLE+SSC)2… 相似文献
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本研究探讨p16,dll4基因真核表达载体在白血病细胞中的表达和作用,设计并构建包含野生型p16cDNA,dll4cDNA的真核双表达载体pBudCE4.1-16-dll4,用脂质体法转染白血病细胞,用Western blot方法检测外源性p16及dll4的表达情况;通过CCK-8和流式细胞仪检测细胞的生长曲线和周期。结果表明:成功构建p16、dll4基因双表达真核载体,体外成功转染入白血病细胞。在白血病细胞检测到外源性P16、Dll4蛋白的表达。转染48小时后,试验组与对照组比较,细胞周期被阻滞(p0.001),细胞增殖下降(p0.001)。结论:重组质粒pBudCE4.1-16-dll4体外转染白血病细胞后,两个目的基因能够在细胞中同时表达,并诱发细胞周期阻滞于G0/G1期。 相似文献