核酸外切酶降解单链DNA以阻止慢性关卡激活及自身免疫性疾病的发生Yang Y-G等

Trex1是哺乳动物细胞中主要的3＇DNA核酸外切酶，人TREX1基因的突变会导致Aicardi—Goutieres综合征的发生。然而，Trex1缺陷相关的疾病机理尚不明确。本研究在用γ照射或羟基脲处理细胞后，发现位于内质网上的Trex1重新定位于S期的细胞核中。即使没有外源压力，由于S期持续不断产生单链DNA分子并在内质网上积累，Trex1缺陷细胞无法正常完成G1／S期的转换，并造成慢性的ATM依赖的检测点活化。     

利用改进的基因组步行技术克隆新型水解酶全基因

利用同源-简并的混合寡核苷酸引物（consensus-degeneratehybrid oligonucleotide primers，CODEHOP）介导新微粒酶的PCR筛选，得到这些酶所有的基因片段，并用改进的基因组步行技术得到所鉴定基因的全序列。本研究基于盒式一连接改进了基因组步行方法，主要在于可用任意的限制性内切酶消化基因组DNA，用Taq DNA聚合酶对消化的DNA进行末端平滑化，并加上一个腺嘌呤（A）避免自身环化，随后腺嘌呤3’端连接于同样未磷酸化的寡核苷酸盒完成TA连接。     

B38-22 杀菌性抗生素诱发细胞死亡的共同机制

研究了三大类结构不同的杀菌性抗生素，实验表明它们均能刺激革兰阴性及阳性菌产生高毒性的羟基自由基，最终导致细胞死亡；而抑菌性抗生素则无法诱发羟基自由基的产生。羟基的形成是胞内氧化损伤细胞致死亡途径的终产物，该途径涉及到三羧酸循环、NADH的短暂缺失、铁硫蛋白簇的脱稳定以及诱发Fenton反应的发生。实验结果表明这三大类杀菌性药物均可能作用于细菌体内羟基自由基损伤的修复系统，包括参与应答DNA损伤反应的蛋白质，如RecA蛋白。通过抑制细菌对DNA损伤的修复应答反应，三类杀菌性抗生素的抗菌效果均明显增强。     

围手术期疼痛管理在加速康复外科腹腔镜胆囊切除术中的应用效果分析

目的:分析围手术期疼痛管理在加速康复外科腹腔镜胆囊切除术中的应用效果.方法:选取2020年2月—2021年6月我院收治的500例腹腔镜胆囊切除手术(LC)患者,随机分为试验组和对照组,每组各250例.对照组实施常规护理,试验组实施围术期疼痛护理管理.对比两组患者心理状态、疼痛程度及并发症发生率.结果:试验组SAS评分(...     

交联漆酶聚合物的制备和鉴定及其在清除内分泌干扰物上的应用

将来源于白腐真菌Coriolopsis polyzona的漆酶制成交联酶聚合物（CLEAs）将该酶固定化，利用聚乙二醇（1000g／L酶溶液）作为沉淀剂，200μmol／L戊二醛作为交联剂。在以2，2’-连氮-双-（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）（ABTS）为底物时，CLEAs的漆酶活性为148u／g，活力回收率为60．2％。     

固定化重组β-半乳糖苷酶对HIV抗体的变构分子传感

在固定化大肠杆菌β-半乳糖苷酶的变构反应的基础上，论证了定性及半定量测定HIV抗体的可行性。在先前的研究中已证实该重组酶的适用性与匀相测定法的条件。本研究确定了在活化的琼脂糖载体上固定化重组大肠杆菌β-半乳糖苷酶的操作条件，根据此方法制备了这种固相化酶，并研究了其性质，以测定在有HIV抗体存在时固定化酶的活化程度。     

A型肉毒杆菌神经毒素两个亚型的抗体交叉反应性的分子进化

在保持原有抗体亲和力的基础上扩展其特异性，更有利于检测及中和各种毒素及病毒亚型。本研究利用酵母展示技术及辅助筛选策略增加了单链抗体scFv对A型肉毒杆菌神经毒素（BoNT／A）的交叉反应性。     

利用trxB及gor双突变的大肠杆菌生产重组可溶性2型登革热病毒包膜域Ⅲ蛋白的优化Saejung W等

目前在热带及亚热带地区，登革热病毒是黄病毒属中对人类致病危害最严重的病毒。2型登革热病毒包膜蛋白域Ⅲ（D2EⅢ）能诱发机体产生保护性和中和性抗体。在大肠杆菌中使其与六聚组氨酸标签进行N端融合表达。     

利用改进的基因组步行技术克隆新型水解酶全基因

利用同源-简并的混合寡核苷酸引物（consensus—degenerate hybrid oligonucleotide primers，CODEHOP）介导新微粒酶的PcR筛选，得到这些酶所有的基因片段，并用改进的基因组步行技术得到所鉴定基因的全序列。     

天然大麦α-淀粉酶／枯草杆菌蛋白酶抑制剂在毕赤酵母中的高水平表达

利用甲醇诱导的醇氧化酶1（AOX1）启动子，构建了天然大麦α-淀粉酶／枯草杆菌蛋白酶抑制剂在毕赤酵母中的高水平表达系统。为了提高表达水平，在紧邻野生型编码区处设计了两种密码子优化的编码区并使之表达。利用来源于酿酒酵母的截短的α交配因子分泌信号，以保证天然成熟蛋白的分泌。利用PCR方法筛选AOX1基因被替换的单拷贝插入转化子，比较不同克隆的表达水平。经甲醇诱导后，野生型的表达水平为125mg／L，两种含有密码子优化编码区的突变株分别为65和125mg／L。纯化的重组蛋白通过埃德曼降解、液相色谱、质谱以及不溶性蓝色淀粉测定等方法显示重组蛋白与大麦中的野生型蛋白具有相同特征。