脱氧核糖核酸甲基化对肝细胞核因子4α表达的影响

目的 探讨DNA甲基化对肝细胞核因子4α(HNF4α)表达的影响,及其在转化生长因子-β1 (TGF-β1)调节HNF4α表达过程中所起的作用.方法 用实时RT-PCR方法检测6种人肝癌细胞株(HepG2、Huh-7、Hep3B、SMMC-7721、BEL-7405、FOCUS)、20份人肝癌和相应癌旁组织中HNF4αP1 mRNA的表达.用亚硫酸盐测序法(BSP法)检测6种人肝癌细胞株中HNF4αP1启动子区甲基化程度.用5-脱氧杂氮胞苷(5-AZA-CdR)处理FOCUS细胞株,用BSP法检测HNF4αP1启动子区甲基化程度,用实时RT-PCR法检测HNF4αP1 mRNA的表达.用TGF-β1处理6种人肝癌细胞株,用实时RT-PCR法检测HNF4αP1 mRNA的表达.分别用5-AZA-CdR、TGF-β1、5-AZA-CdR联合TGF-β1处理FOCUS细胞株,用实时RT-PCR法检测HNF4αP1 mRNA的表达.采用f检验进行统计学分析.结果 在20份人肝癌和癌旁组织中,13份肝癌组织的HNF4αP1 mRNA相对表达量低于癌旁组织(f=2.350,P＜0.05).HepG2、Huh-7、Hep3B中的HNF4αP1 mRNA相对表达量较高,SMMC-7721、BEL-7405、FOCUS中则相对较低.HepG2、Huh-7、Hep3B中HNF4αP1启动子区甲基化程度较低,SMMC-7721、BEL-7405、FOCUS中则较高.随着5-AZA-CdR浓度上升(分别为0、0.1、1.0、2.5 μmol/L),FOCUS的HNF4αP1启动子甲基化程度逐渐降低(分别为61％、46％、32％、27％),而HNF4αP1 mRNA相对表达量则逐渐增加(分别为[(9.661±0.336)×10-7、(2.001±0.432)×10-6、(3.689±0.714)×10-6、(4.732±2.451)×10-6].经TGF-β1刺激后,启动子区甲基化程度较低的HepG2、Huh-7、Hep3B的HNF4αP1 mRNA相对表达量下调(t=12.994、8.441、9.032,P均＜0.01),启动子区甲基化程度较高的SMMC-7721、BEL-7405、FOCUS的HNF4αP1 mRNA相对表达量变化差异均无统计学意义(P均＞0.05).经5-AZA-CdR处理的FOCUS细胞株的HNF4αP1 mRNA相对表达量[(4.972±0.035)×10-6]高于空白对照组[(1.411±0.104)×10-6],差异有统计学意义(t=13.212,P＜0.01).经5-AZA-CdR联合TGF-β1处理的FOCUS细胞株的HNF4αP1 mRNA相对表达量[(1.181±0.132)×10-6]低于单用5-AZA-CdR处理组[(4.972±0.035)×10-6],差异有统计学意义(t=13.873,P＜0.01).结论 肝癌组织中HNF4αP1表达水平下调.DNA甲基化可调控HNF4αP1在人肝癌细胞株中的表达.HNF4αP1启动子区甲基化可抑制TGF-β1对HNF4αP1表达的调节作用.     

文本交互办公场景中蔑视对攻击与绩效的影响:反刍的调节作用

目的:对文本交互办公场景下的蔑视及其影响进行探索,为企业管理与个人职业生涯决策提供依据。方法:通过Tower软件平台,设计基于文本交互办公场景的多轮商业产品决策任务,对蔑视/失败反馈的影响进行研究。结果:实验一中蔑视组与失败组的攻击(t=3.806,P0.001)与绩效(t=5.989,P0.001)都存在显著差异。实验二中蔑视与攻击(F=55.588,P0.001,η~2=0.042)和绩效(F=12.776,P=0.001,η~2=0.061)的关系再次证实了实验一的结果,同时反刍在蔑视对攻击(F=14.094,P0.001,η~2=0.011)与绩效(F=25.286,P0.001,η~2=0.121)的影响中交互效应显著;绩效(t=6.421,P0.001)与攻击(t=2.763,P=0.007)的简单斜率分析差异显著。结论:在文本工作场景中蔑视将同时导致接受者绩效和攻击的提高;但相对于低反刍特质的个体而言,高反刍特质的个体接受到蔑视会使他们产生更强的攻击,且并不会提高其绩效。     

以商标法为视角探析我国中医药知识产权保护

目的:以商标法为视角探析保护我国中医药知识产权的方法。方法:分析中医药商标保护的意义、存在的问题,提出中医药商标保护对策。结果与结论:商标是商品质量信誉的保证,企业的无形资产,市场竞争的利器。但我国中医药企业在商标保护方面存在缺乏品牌意识,将中药药品名与商品名混淆,商标设计质量低,道地中药材保护欠缺等问题。今后应从加强商标竞争力,重视商标宣传,建立完善的联合商标及防御商标体系,申请国际注册塑造品牌文化,引用地理标志对道地药材进行保护等方面加强中医药商标保护。     

新生儿蛛网膜下腔出血97例临床分析

新生儿蛛网膜下腔出血９７例临床分析抚顺市矿务局总医院儿科（１１３００８）李永昕，胡静娴，郎会利，郎秀荣随着头颅ＣＴ检查的普遍应用，蛛网膜下腔出血的诊断率有了很大的提高。我院于１９９２年２月至１９９４年１１月收治新生儿蛛网膜下腔出血９７例，其中２８例进...     

DNA甲基化与肝癌的研究现状

原发性肝细胞癌(肝癌)是最常见的恶性肿瘤之一,其发生是一个多阶段的过程,包括遗传学和表观遗传学改变引起的原癌基因激活和抑癌基因失活。既往研究普遍认为,遗传学改变是肝癌发生的核心环节,近年来随着对肝癌认识的深入,发现表观遗传学改变对其发生发展亦起着重要作用,其中DNA甲基化的研究较为广泛和深入。此文就DNA甲基化与肝癌发生发展的关系,以及甲基化在肝癌临床诊治和预后评估中的意义进行综述。     

siRNA抑制饥饿素-O-乙酰基转移酶对肝细胞脂肪变性的影响及作用机制

目的探讨siRNA抑制饥饿素-O-乙酰基转移酶(GOAT)对肝脂肪变性影响及作用机制。方法游离脂肪酸(FFA)作用于人肝细胞系LO2细胞以诱导肝细胞脂肪变性。FFA与siRNA-GOAT单独或联合处理LO2细胞,分为4组,即空白对照(NC)组:仅用PBS处理;siRNA-GOAT组:仅以终浓度为10 nmol/L的siRNA-GOAT处理;FFA组:仅以终浓度为1 mmol/L的FFA处理;FFA+siRNA-GOAT组:采用上述浓度FFA和siRNA-GOAT混合处理。肝细胞油红O染色检测脂肪滴形成情况;TG检测试剂盒检测LO2细胞脂质水平;免疫印迹法(Western Blot)、实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫荧光染色、电子显微镜检测自噬活性;酶联免疫吸附测定法、RT-PCR检测TNFα、IL-6水平。Western Blot检测雷帕霉素(m TOR)、磷酸化m TOR(pm TOR)、AMP-活化蛋白激酶(AMPK)以及磷酸化AMPK(p-AMPK)的蛋白水平变化。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 FFA+siRNA-GOAT组脂肪滴形成较FFA组明显减轻,TG水平明显低于FFA组,差异有统计学意义(P0.001)。FFA+siRNA-GOAT组TNFα和IL-6蛋白、mRNA表达水平较FFA组均明显下降,差异均有统计学意义(P值均0.005)。siRNA-GOTA组LC3-Ⅱ、Beclin-1 mRNA表达水平明显高于NC组,差异均有统计学意义(P值均0.001)。FFA+siRNA-GOAT组LC3-Ⅱ、Beclin-1 mRNA表达水平明显高于FFA组,差异均有统计学意义(P值均0.001)。siRNA-GOAT组LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白水平明显高于NC组,差异均有统计学意义(P值均0.05)。FFA+siRNA-GOAT组LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白水平明显高于FFA组,差异均有统计学意义(P值均0.05)。免疫荧光染色示FFA+siRNA-GOAT组LO2细胞中内源性LC3-Ⅱ表达水平较FFA组、siRNA-GOAT组升高。电子显微镜观察结果示FFA+siRNA-GOAT组自噬体表达较FFA组增加。自噬抑制剂siRNA-ATG5、3-MA或刺激剂雷帕霉素处理LO2细胞后,FFA+siRNA-ATG5组、FFA+3-MA组TG水平分别与FFA+siRNA-GOAT组、FFA+雷帕霉素组比较,差异均有统计学意义(P值均0.001)。FFA+siRNA-GOAT组、FFA+雷帕霉素组LC3-Ⅰ/Ⅱ水平明显高于FFA+siRNA-ATG5组、FFA+3-MA组,差异均有统计学意义(P值均0.05)。FFA+siRNA-GOAT组p-AMPK蛋白表达水平明显高于于FFA组、p-m TOR蛋白表达水平明显低于FFA组,差异均有统计学意义(P值均0.05)。结论 siRNA抑制GOAT可通过调节AMPK/m TOR通路,上调自噬活性,进而减轻肝细胞内脂肪变性。     

外周血胃饥饿素水平与幽门螺杆菌感染患者胃黏膜萎缩程度的关系研究

目的 探讨胃黏膜萎缩程度不同分期(OLGA分期)与血清胃饥饿素水平的关系.方法 选择2018年8月至2019年8月在复旦大学附属金山医院消化内科门诊就诊,并经14C尿素呼气试验检测呈阳性的217例幽门螺杆菌(Hp)感染患者作为研究对象,所有患者均行电子胃镜检查,并取胃黏膜组织行病理检查,按照OLGA分期系统将胃黏膜萎缩...     

颈部椎管内占位性病变致痛性痉挛1例报告

颈部椎管内占位性病变致痛性痉挛１例报告中国医科大学第二临床学院儿科（１００３）周晓薇衣曼抚顺矿务局总医院郎会利胡静娴患儿男，１４岁。左侧肢体痉挛伴疼痛及尿失禁３６天于１９９６年３月入院。患儿于入院前３６天无明显诱因出现左侧肢体痉挛。发作前左足第２、３...     

MTA和CH糊剂用于根尖诱导成形术的临床疗效对比

目的对比无机三氧化物聚合体（MTA）和CH糊剂在根尖诱导成形术中的临床疗效。方法将120颗牙根未完全发育完成的年轻恒牙随机平分为两组,用无机三氧化物聚合体（MTA）和CH糊剂,分别进行根尖诱导成形术,术后3个月复诊一次,随访2年,对比观察临床疗效。结果MTA组平均就诊次数3．1次,平均治疗周期14．1d,根尖诱导成功率96．7％;CH组平均就诊次数7．2次,平均治疗周期363．2d,根尖诱导成功率71．7％,两组根尖诱导成功率比较有统计学差异（P〈0．01）。结论MTA进行根尖诱导成形术,周期短,疗效确切,成功率高,有望替代传统氢氧化钙诱导制剂。     

白血病病人家庭抗逆力的研究进展

通过对家庭抗逆力的概念、理论模型及测量工具进行概述,同时也对白血病病人家庭抗逆力的影响因素和干预措施进行综述,以期为今后白血病病人家庭抗逆力的干预和研究提供参考。