骨癌痛大鼠脊髓背角pCREB表达的变化

目的:观察脊髓背角磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(pcREB,phosphorylated cAMP re-sponse element binding protein)在骨癌痛大鼠中的表达变化,探讨其在骨癌痛中枢敏化中的作用.方法:雌性SD大鼠32只,随机分为4组(n=8),分别为对照组,骨癌痛6d、12d、18d组.对照组和骨癌痛各组分别于左胫骨上端注射Hank's液和walker256肿瘤细胞5μl.分别于术前(基础值)、术后6d、12d、18d测定机械性痛阈值.对照组于术后18d,其余三组在各时点测定机械性痛阈值后立即处死大鼠,取L4～L6脊髓组织,采用免疫组化法计数pcREB免疫反应阳性细胞数量.结果:骨癌痛术后6d、12d、18d组机械性痛阈值进行性下降(P<0.01),对照组差异无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,骨癌痛术后6d、12d、18d组脊髓pcREB免疫反应阳性细胞数逐渐增多(P<0.01).结论:骨癌痛大鼠脊髓背角pcREB表达的增加,可能是产生中枢敏化的机制之一.     

骨癌痛大鼠鞘内注射U0126的抗痛觉过敏作用

目的研究鞘内注射(it)U0126对骨癌痛大鼠机械痛敏的影响和对脊髓背角磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(pCREB)表达的影响,探讨ERK-CREB信号转导通路在骨癌痛中的作用。方法①40只成年♀SD大鼠分为5组,假模型组Ⅰ和骨癌痛模型组Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ。建模后d 10每只大鼠分别it 10μg U0126、5%二甲亚砜10μl和U0126 0.1、1、10μg(U0126溶于10μl 5%二甲亚砜中),测机械性缩爪阈值(MWT)和双下肢负重差(WBD);②25只成年♀SD大鼠分为5组,T1、T2和T3组在制作骨癌痛模型后d 10,itU0126 10μg后1、6、24 h处死大鼠,M组为模型对照组,it5%二甲亚砜10μl后6 h处死大鼠,S组为空白对照组。免疫组化方法测定L4-6术侧脊髓背角pCREB免疫反应阳性神经元数量。结果鞘内注射U0126 1μg和10μg明显逆转了骨癌痛引起的机械痛敏;鞘内注射10μg U0126明显减少脊髓背角pCREB表达,且效果至少可持续6 h。结论 ERK-CREB通路可能参与骨癌痛。     

快速扩容或麻黄碱预处理对无痛人流手术患者血流动力学的影响

目的观察快速扩容或麻黄碱预处理对无痛人流手术患者血流动力学的影响。方法90例ASAⅠ级行无痛人流手术患者,随机分为3组（每组30例）,A组（对照组）：芬太尼1.5μg/kg＋异丙酚2mg/kg;B组（麻黄碱组）：异丙酚20ml加入麻黄碱15mg（0.15mg/kg）;C组：在麻醉诱导前15～20min内快速输入乳酸钠林格液12ml/kg。结果A组诱导后SBP、DBP、MAP下降,与基础值相比,差异有统计学意义（P〈0.05）;B组、C组诱导后SBP、DBP、MAP无明显变化（P〉0.05）;A组诱导后SBP、DBP、MAP低于B组和C组,差异有统计学意义（P〈0.05）。A组、C组诱导后HR减慢,与基础值相比,差异有统计学意义（P〈0.05）,B组HR无明显变化（P〉0.05）。3组SpO2组间和组内比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）。结论快速扩容或麻黄碱预处理均能减轻无痛人流手术过程中异丙酚引起的循环功能抑制,可预防低血压的发生。     

大鼠鞘内注射MCP-1中和抗体缓解骨癌痛

目的观察脊髓趋化因子单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1,或CCL2)在骨癌痛大鼠中的可能作用。方法大鼠胫骨骨髓腔接种Walker256肿瘤细胞建立骨癌痛模型。观测造模前、后大鼠机械性痛觉超敏Von Frey阈值并观察造模后d 10～12,鞘内给予MCP-1中和抗体对大鼠Von Frey阈值和脊髓小胶质细胞激活标志物(ox-42)表达的影响。结果大鼠种瘤后6～12 d,机械性痛觉超敏Von Frey阈值进行性下降(P<0.01);与对照组相比,鞘内给予MCP-1中和抗体后,脊髓ox-42的表达水平明显降低(P<0.01),Von Frey阈值的明显升高(P<0.01)。结论大鼠鞘内注射MCP-1中和抗体缓解骨癌痛,其机制可能与抑制小胶质细胞的激活相关。     

趋化因子Fractalkine在骨癌痛大鼠中的作用及其脊髓机制

目的 探讨趋化因子Fractalkine在骨癌痛中的作用及其脊髓部位的作用机制.方法 采用Walker 256肿瘤细胞,注射在胫骨内建立骨癌痛模型.雌性SD大鼠40只,随机分为5组(n=8),Ⅰ组为Hank's液对照组,Ⅱ组为骨癌痛组,Ⅲ组为对照组+CX3CR1中和抗体,Ⅳ组为骨癌痛组+IgG;V组为骨癌痛组+CX3CR1中和抗体.术后第10～12天,鞘内分别注射CX3CRI中和抗体或IgG,每天1次,剂量10μg/10μl.分别于术前及术后隔日开始测定大鼠机械性痛阈值.术后第12天鞘内注射抗体后6 h处死大鼠,测定脊髓小胶质细胞标志物(OX-42)的表达水平.结果 术后第10～12天,与Ⅰ组比较,Ⅱ组、Ⅳ组机械性痛阈值显著下降,脊髓OX-42染色阳性细胞数(Num)及积分吸光度(IA)显著增加,差异均有高度统计学意义(均P<0.01),Ⅲ组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05);与Ⅱ组、Ⅳ组比较,Ⅴ组机械性痛阈值显著增高,脊髓OX-42染色Num及IA显著减少,差异均有高度统计学意义(均P<0.01).结论 Fractalkine通过激活脊髓小胶质细胞参与了骨癌痛的形成.     

p38MAPK信号转导通路在大鼠骨癌痛中的作用

目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号转导通路在大鼠骨癌痛中的作用.方法 雌性sD大鼠56只,体重150～170 g,随机分为4组(n=14):生理盐水对照组(NS组)、骨癌痛组(BC组)、二甲基亚砜组(DMSO组)和p38MAPK抑制剂组(SB203580组).骨髓腔内注射Walker256细胞悬液制备大鼠骨癌痛模型,注射后10 d,DMSO组和SB203580组分别鞘内注射5%二甲基亚砜和SB203580(10 μg)10 μl.各组随机取8只大鼠,于注射Walker256细胞悬液前、注射后1、3、5、7、10 d,鞘内给药后1、3、6、12、24 h时采用von Frey纤维丝测定术侧后爪机械缩足反射阈值(MWT);各组余6只大鼠鞘内给药后6 h时取L_(4,5)脊髓,采用免疫组化法检测脊髓背角磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(pCREB)的表达水平.结果 骨髓腔内注射Walker256细胞悬液后7 d大鼠术侧后爪MWT开始降低,鞘内注射SB203580提高了MWT;骨髓腔内注射Walker256细胞悬液后脊髓背角pCREB表达上调,鞘内注射SB203580后脊髓背角pCREB表达下调.结论 鞘内注射SB203580可通过抑制脊髓背角pCREB的表达减轻骨癌痛;p38MAPK信号转导通路在骨癌痛中起重要作用.     

骨癌痛大鼠脊髓CX3CR1表达的变化

目的 评价骨癌痛大鼠脊髓趋化因子Fractalkine受体1(CX3CRl)表达的变化.方法 雌性未交配SD大鼠650只,体重150～180 g,随机分为3组:对照组(n=10)、假手术组(n=10)和骨癌痛组(n=40).对照组不给予任何处理,假手术组、骨癌痛组分别在左胫骨上端注射Hank液和Walker 256乳腺癌细胞5 μl.对照组和假手术组于术前1 d、术后6、12、18 d时测定机械痛阈和双后肢负重;骨癌痛组于术前1 d、术后6、12、18 d时各取10只大鼠测定机械痛阈和双后肢负重.对照组和假手术组于术后18 d时,骨癌痛组于术后6、12、18 d时各处死10只大鼠,取L4-6脊髓组织,采用免疫组化法测定CX3CR1阳性细胞计数,采用Western blot法测定CX3CR1表达.结果 与对照组和假手术组比较,骨癌痛组术后各时点机械痛阈降低,双后肢负重差,CX3CR1阳性细胞计数升高,CX3CR1表达上调(P<0.01).结论 脊髓CX3CR1可能参与了大鼠骨癌痛的发生和维持.     

鞘内注射LY294002缓解大鼠骨癌痛

目的观察鞘内注射(intrathecal injection,i.t.)磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂LY294002对骨癌痛大鼠疼痛行为学、脊髓背角磷酸化Akt(p-Akt)表达的影响。方法♀SD大鼠40只,体质量180~200 g,随机分为5组(n=8):假手术组(Ⅰ组)、假手术+LY294002组(Ⅱ组)、骨癌痛组(Ⅲ组)、骨癌痛+二甲基亚砜(DMSO)组(IV组)、骨癌痛+LY294002(V组),于大鼠左侧胫骨干骺端骨髓腔内注射Walker256乳腺癌细胞构建胫骨癌痛模型。术后d 7~9鞘内连续注射浓度为2.5 g·L-1的LY294002 10μL或10μL的5%DMSO。观测术前及术后d 7给药后每小时机械痛阈(至8 h)。术后d 9处死大鼠,取各组大鼠的L4~6脊髓组织进行免疫组化染色,检测脊髓背角PI3K活化标志p-Akt的表达。结果骨癌痛组大鼠(Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组)机械痛阈(MWT)明显低于假手术组(Ⅰ组)(P<0.01),V组在给药后2~4h痛阈明显升高(P<0.05),3 h达到峰值(P<0.01)。与Ⅰ组比较,Ⅲ、Ⅳ组脊髓背角p-Akt阳性细胞数明显增加,p-Akt表达增多(P<0.01)。与Ⅲ、Ⅳ组比较,Ⅴ组鞘内注射LY294002后能明显降低脊髓背角p-Akt的表达(P<0.05)。结论 PI3K/Akt通路可能参与大鼠骨癌痛的发生。