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从人肝中分离获得谷胱甘肽过氧化物酶,其最适pH为8.5,最适温度为37℃。该酶以H2O2或GSH为底物时表现Km值分别为0.27mmol/L和1.3mmol/L。酶与多分子底物作用的动力学研究表明人肝谷胱甘肽过氧化物酶的作用为乒乓机制。并观察了一些金属离子和烷化剂对该酶具有不同程度的抑制作用。 相似文献
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超氧化物歧化酶活力测定改进法 总被引:1,自引:0,他引:1
超氧化物歧化酶(EC1.15.1.1,简称SOD)是一种具有很强抗炎作用的消炎酶,其活力测定方法已有多种,但操作均较复杂且重现性较差。本文报道一种简易可行的改良法,应用牛血SOD标准品建立不同酶活力对邻苯三酚自氧化作用抑制率的标准曲线,在相 相似文献
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<正> 超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,简称SOD)(EC1.15.1.1)广泛存在于生物体内,能催化超氧阴离子自由基(O_2~·)产生歧化反应,生成O_2和H_2O_2,是生物体O_2~·的天然清除剂。其抗辐射、抗肿瘤、抗病毒及抗衰老作用已引起国内外学者高度重视,成为自由基医学领域中最活跃的研究内容之 相似文献
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大肠杆菌天门冬酰胺酶Ⅱ的基因克隆与表达 总被引:12,自引:6,他引:6
本文报道用一对与大肠杆菌编码L-天门冬酰胺酶Ⅱ(L-ASPsⅡ)的基因ansB两侧序列互补的寡核苷酸L1、L2作引物,以L-ASPsⅡ的野生型生产菌CPU210009染色体为模板,经PCR扩增得到长约1.6Kb的DNA片段。该片段通过以LP1、LP2为内引物的PCR反应,证明包含了ansB基因的编码序列。将此片段经xba I、Hind Ⅲ消化,插入质粒PUC18、PUC19上构建重组质粒PUA18、PUA19,分别转化Asl.1187,Asl.1193,HB101,9637,JM107,71/18,GPU210009等宿主菌,筛选得到L-ASPs Ⅱ酶活力明显提高的8株阳性转化子。在1L生物反应器中,LB培养基37℃下培养24h,其酶活在6.2-31.8IU/ml之间。其中CTA8表达L-ASPsⅡ水平最高,达到31.8IU/ml。各基因工程菌株较之野生型生产菌体CPU210009,其生产L-ASPsⅡ水平提高了5-26倍。而且IPTG诱导对工程菌表达L-ASPsⅡ的水平几无影响。SDS-PAGE测得工程菌表达的L-ASPsⅡ分子量约为140Kd。薄层扫描结果显示:CTA7、CTB8、CTA9所产生的L-ASPsⅡ占宿主菌可溶性蛋白总量的28.3%、35.7%、33.6%。 相似文献
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大肠杆菌L-天门冬酰胺酶Ⅱ基因的高效表达 总被引:3,自引:1,他引:2
用一对与大肠杆菌天门冬酰胺酶Ⅱ基因(AnsB)两侧序列互补的寡核苷酸E1,E2作引物,以大肠杆菌野生株CPU210009的染色体DNA为模板,通过PCR扩增得到约1.2kb的DNA片段,将此片段插入pKK233-2的tac启动子下游,转化不同的大肠杆菌宿主菌株,结果表明以CPU210009为宿主菌时,转化子的酶表达量最高,重组L-天门冬酰胺酶占菌体总蛋白48.3%,发酵液酶活力达400IU/ml;比活为48IU/mg蛋白,SDS-PAGE显示纯化后的重组L-天门冬酰胺酶分子量与天然酶相同,均为140KD。 相似文献
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应用右旋糖苷及聚蔗糖对人血SOD进行化学修饰。人血SOD分别经右旋糖苷及聚蔗糖两种修饰剂共价修饰后,仍保留其紫外、荧光吸收特性及SOD的酶活性。人血SOD修饰物的抗胃蛋白酶酶解能力、热稳定性、耐酸性均有显著提高。 相似文献
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PurificationandPropertiesofHumanLiverGlutathionePeroxidaseXuHeng(徐蘅);QiuQi(裘奇);HuMeiQing(胡梅清);WeiYong(魏涌)(DepartmentofBiochem... 相似文献
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