基于网络药理学和实验验证探讨肉苁蓉防治癌因性疲劳的作用机制研究北大核心CSCD

网络药理学结合体内外实验探究肉苁蓉治疗癌因性疲劳(cancer-related fatigue,CRF)的作用机制,为临床用药提供理论依据。采用中药系统药理学数据库(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)平台检索肉苁蓉中的化学成分和中药靶点,利用GeneCards数据库和NCBI数据库筛选CRF疾病的作用靶点,取中药与疾病的共同靶点,构建蛋白互作(PPI)网络,进行基因本体论(Gene Ontology,GO)功能富集分析及京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析,构建可视化的中药-疾病靶点相关的信号通路;建立紫杉醇(paclitaxel,PTX)诱导的CRF小鼠模型,分为对照组,PTX组,肉苁蓉提取物250、500 mg·kg^(-1)组,旷场、悬尾实验及力竭游泳时间评价小鼠抗CRF作用,苏木素-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色评价小鼠骨骼肌的病理形态;构建用C26共培养诱导的C2C12肌肉细胞癌性恶病质模型,分为对照组、条件培养液模型组及肉苁蓉提取物62.5、125、250μg·mL^(-1)组,流式细胞仪检测各组细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量,透射电镜评价各组细胞内线粒体状态,Western blot法检测各组细胞中低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、BNIP3L及Beclin-1蛋白的表达水平。结果从肉苁蓉中筛选出6个有效成分,肉苁蓉治疗CRF的核心基因有AKT1、IL-6、VEGFA、CASP3、JUN、EGFR、MYC、EGF、MAPK1、PTGS2、MMP9、IL-1B、FOS以及IL-10等;与肉苁蓉治疗CRF相关的通路有AGE-RAGE、HIF-1等信号通路;通过GO富集分析发现主要涉及的生物功能有脂质过氧化、营养缺乏、化学应激、氧化应激以及氧气含量等生物过程;体内实验结果表明,肉苁蓉提取物可以显著改善小鼠骨骼肌萎缩,缓解CRF;体外实验结果表明,肉苁蓉提取物可以显著降低胞内ROS的含量、线粒体碎裂百分率及Beclin-1蛋白表达水平,增加自噬小体数目、HIF-1α和BNIP3L蛋白表达。肉苁蓉显示出良好的抗CRF作用,其机制可能与HIF-1α信号通路关键靶蛋白相关。     

HPLC法测定西红花康复液中丹皮酚的含量

目的 :建立西红花康复液中丹皮酚的高效液相色谱分析方法。方法 :以KomasilODS 1(4 .6mm× 2 0 0mm ,5 μm)为色谱柱 ,流动相为甲醇∶水 (5 0∶5 0 ) ,流速为 1ml·min-1,柱温 4 0℃ ,检测波长 2 74nm。结果 :线性范围为 0 .0 6 3～ 0 .378μg(r =0 .9998) ,平均加样回收率为 97.2 4 % ,RSD为 2 6 .3% (n =9)。结论 :本方法快速、简便 ,适用于本制剂的质量控制。     

基于网络药理学和分子对接探讨肉苁蓉苯乙醇总苷对肝细胞癌的潜在分子机制

目的：通过网络药理学及分子对接技术,探讨肉苁蓉苯乙醇总苷(CPhGs)治疗肝细胞癌(HCC)的潜在分子机制。方法：应用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)等数据库及文献收集肉苁蓉苯乙醇总苷的活性成分及潜在作用靶点。通过TTD,GeneCards等数据库获得与HCC相关的疾病基因,得到药物靶点与疾病靶点的交集为肉苁蓉苯乙醇总苷治疗HCC的潜在作用靶点,将交集靶点导入蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,筛选关键靶点。将关键靶点导入DAVID数据库,进行基因本体(GO)富集分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。最终,利用Autodock vina软件对筛选出的蛋白与肉苁蓉苯乙醇总苷活性成分进行分子对接。结果：肉苁蓉苯乙醇总苷中有29种活性成分及410个靶基因,涉及PI3K-AKT信号通路、癌症信号通路、癌症蛋白聚糖通路、VEGF信号通路等以发挥治疗HCC的作用。分子对接结果显示,筛选的靶点受体蛋白与活性成分具有较好的结合活性。结论：肉苁蓉苯乙醇总苷可能通过多组分、多靶点和多途径的方式调节癌细胞、血管生成等相关靶标和途径,从而对HCC产生治疗作用。     

基于网络药理学的芹菜子活性成分抗肝纤维化作用机制研究

目的 构建芹菜子活性成分-作用靶点网络和蛋白相互作用网络,对靶点涉及的功能和通路进行分析,初步探讨芹菜子抗肝纤维化的作用机制。方法 通过中药系统药理学分析平台（TCMSP）、文献挖掘和笔者所在实验室已有研究获取芹菜子主要活性成分,SwissTargetPrediction平台和BATMAN-TCM数据库获取成分靶点,利用GeneCards和OMIM数据库预测和筛选肝纤维化相关的作用靶点。采用Cytoscape软件构建活性成分-作用靶点网络,String数据库和Cytoscape软件绘制蛋白相互作用网络。采用生物学信息注释数据库（DAVID）对靶点进行基因本体（GO）分类富集分析及京都基因与基因组百科全书（KEGG）代谢通路富集分析,结合相关文献分析芹菜子抗肝纤维化的作用机制。结果 筛选得到芹菜子17个活性成分,涉及69个作用靶点。网络分析结果表明,芹菜子主要涉及胶原蛋白分解代谢、炎症反应和胆固醇合成等生物过程,通过调节TGF-β1、NF-κB和PI3K/AKT等信号通路来发挥抗肝纤维化作用。结论 本研究体现了芹菜子多成分-多靶点-多途径的作用特点,其所作用的多条信号通路均存在直接或间接关联性,为进一步研究提供了新思路和新方法。     

肉苁蓉属植物中六种苯乙醇苷类化合物抗氧化活性的构效关系研究

目的:研究肉苁蓉属植物中苯乙醇苷类化合物抗氧化活性的构效关系.方法:采用DPPH·自由基分析法,对肉苁蓉属植物中的6种苯乙醇苷单体成分进行抗氧化活性的测试,根据其结构特征和活性测定结果,初步推断苯乙醇苷类化合物抗氧化活性的构效关系.结果:不同化学结构的苯乙醇苷化合物清除自由基的能力存在一定差异,其抗氧化能力的顺序为2′-乙酰基毛蕊花糖苷﹥毛蕊花糖苷≥管花苷B≥异毛蕊花糖苷＞松果菊苷＞肉苁蓉苷A,它们清除自由基的能力与浓度呈明显量效关系.结论:肉苁蓉属植物中苯乙醇苷类的抗氧化活性与苷元及苯丙烯酰基上的酚羟基数目、酚羟基连接位置、化合物空间位阻的大小、中心葡萄糖2位上乙酰基的取代均存在一定关系,与苯乙烯酰基上的α,β不饱和酮结构片断可能也有一定关联.     

维药没食子对酪氨酸酶抑制作用的研究

目的研究维药没食子对酪氨酸酶活性的影响。方法以L-酪氨酸作为底物,测定来源于没食子药材中的没食子酸、1,2,3,6-四-O-没食酰基-β-D-葡萄糖苷及没食子总鞣质提取物干预前、后酪氨酸酶的活性的变化,计算酪氨酸酶抑制率。结果没食子酸、1,2,3,6-四-O-没食酰基-β-D-葡萄糖苷及没食子总鞣质提取物对酪氨酸酶的活性均具有明显下调作用,其中1,2,3,6-四-O-没食酰基-β-D-葡萄糖苷对酪氨酸酶的抑制作用最强。结论该研究为深入开发利用没食子药材中的美白成分提供了依据。     

临床药学专业的课程教育模式探讨

临床药学是我国新增的高等药学教育专业方向,是一个医药学交叉融合的专业,在课程设置中涵盖了药学、临床医学、基础医学等的相关学科,其目的是培养具有扎实的药学、医学专业知识及相关社会科学知识,具有较强的药学、医学实践和人际交流能力,具有良好的职业道德和人文素养,具有创新、创业精神,能够从事临床药学日常工作、合理用药、正确使用及评价药物治疗、临床药理研究、临床药品管理、     

反相高效液相色谱法测定新疆贯叶连翘中芸香苷的含量

贯叶连翘 (H ypericum perf oratum L .)是藤黄科金丝桃属植物 ,含有多种具有生物活性的化学成分 [1 ] ,具有清热解毒、收敛、利湿等功效。西方医学主要用于抗抑郁症的治疗。梁巧丽等 [2 ]报道本药材还具有显著的抗病毒、抗细菌和抗真菌活性。新疆是我国贯叶连翘的主产地之一 ,在维吾尔医学中有悠久的用药历史。芸香苷作为贯叶连翘的主要活性成分 ,具有显著的抗病毒、抗炎作用。本文以反相高效液相色谱 (RP- HPL C)法测定新疆贯叶连翘中芸香苷的含量 ,方法准确可靠 ,快速简便 ,现报道如下。1　仪器与试药1.1　仪器　所用仪器包括 Waters…     

高效液相色谱法测定岩舒注射液中苦参碱的含量

目的：建立岩舒注射液中苦参碱的反相高效液相色谱法。方法：采用C18柱，流动相为甲醇－水－氨水（195：60：2．25），检测波长为220nm。结果：苦参碱在0．052－1．04μg范围内线性关系良好（r=0.9985)，日内和日间精密度RSD均小于2．0％，方法的平均回收率为99．5％。结论：本法简便、快捷，结果准确。     

HPLC测定新疆贯叶金丝桃中金丝桃素的含量

目的　建立测定新疆贯叶金丝桃中金丝桃素含量的测定方法。方法　采用HPLC法 ,KromasilODS - 1色谱柱 (4 .6mm× 2 0 0mm ,5 μm) ,流动相为甲醇 -pH 6 .5磷酸盐缓冲液 (90∶10 ) ,流速 1ml·min- 1 ,柱温 4 0℃ ,检测波长 5 88nm。结果　金丝桃素和其他组分可达基线分离 ,线性范围为 0 .0 16 5～ 0 .0 82 5 μg(r=0 .9999) ,平均回收率为 10 1.1% ,RSD =3.7% (n =9)。 结论　本法操作简便快速 ,灵敏准确。新疆贯叶金丝桃药材中金丝桃素的含量略高于美国药典的要求。