莽草酸及其代谢产物在医药工业中的应用

莽草酸代谢途径是芳香族氨基酸合成过程中的一段共同代谢途径,广泛存在于植物和微生物中。莽草酸途径的代谢产物莽草酸、奎尼酸和没食子酸均含有多功能的六碳环状结构以及3个不对称的碳原子手性中心,可以在化学修饰下形成一系列具有潜在药理学活性的衍生物,广泛应用于医药工业。文章着重介绍莽草酸代谢途径的相关产物及其衍生物在抗病毒、抗肿瘤、抗菌、抗炎及抗血栓等方面的应用。     

利用天然乙内酰脲酶启动子在大肠杆菌中诱导N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶的可溶性表达

将来源于放射土壤杆菌(A.radiobacter)TH572的编码N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶的基因克隆至质粒pET30a上,并转化大肠杆菌BL21(DE3),结果蛋白质大部分以包涵体形式表达。本试验采用天然的乙内酰脲酶启动子(P_(Hase),长度为     

肿瘤靶向抗体偶联物的研究进展

肿瘤靶向制剂已成为当今肿瘤治疗研究的热点,针对特定的靶点(抗原)可以制备相应的单抗。特异性单抗和蛋白毒素、放射性同位素、化疗药物偶联制备成相应的靶向抗体药物,这种抗体偶联物能增强药物的有效性,减少对正常组织的毒害。本文就三类肿瘤靶向抗体偶联物的特点、作用机制、上市药物以及发展趋势进行综述。     

核酸外切酶降解单链DNA以阻止慢性关卡激活及自身免疫性疾病的发生Yang Y-G等

Trex1是哺乳动物细胞中主要的3＇DNA核酸外切酶，人TREX1基因的突变会导致Aicardi—Goutieres综合征的发生。然而，Trex1缺陷相关的疾病机理尚不明确。本研究在用γ照射或羟基脲处理细胞后，发现位于内质网上的Trex1重新定位于S期的细胞核中。即使没有外源压力，由于S期持续不断产生单链DNA分子并在内质网上积累，Trex1缺陷细胞无法正常完成G1／S期的转换，并造成慢性的ATM依赖的检测点活化。     

利用改进的基因组步行技术克隆新型水解酶全基因

利用同源-简并的混合寡核苷酸引物（consensus-degeneratehybrid oligonucleotide primers，CODEHOP）介导新微粒酶的PCR筛选，得到这些酶所有的基因片段，并用改进的基因组步行技术得到所鉴定基因的全序列。本研究基于盒式一连接改进了基因组步行方法，主要在于可用任意的限制性内切酶消化基因组DNA，用Taq DNA聚合酶对消化的DNA进行末端平滑化，并加上一个腺嘌呤（A）避免自身环化，随后腺嘌呤3’端连接于同样未磷酸化的寡核苷酸盒完成TA连接。     

固定化乙酰化酶催化制备头孢菌素

来源于大肠杆菌的青霉素G乙酰化酶（PGA）在催化头孢尼西的合成过程中，通过145位的精氨酸和底物β-内酰胺中的磺酸根离子之间的相互作用，有效提高了PGA活性位点吸附头孢菌素母核（7-SACA）的效率。将PGA固定化于乙醛酰基活化的琼脂糖上，通过对不同的β-内酰胺类抗生素进行动力学控制N-酰化，显示其良好的催化效率。较环氧氯丙烷法活化的疏水载体大大提高了合成率与分解率之比。     

天蓝淡红链霉菌SIPI-1482中dnrX基因的敲除及多柔比星产生菌的构建

柔红霉素是合成重要抗肿瘤抗生素多柔比星的前体,由微生物发酵产生。通过PCR从国内柔红霉素生产菌种天蓝淡红链霉菌SIPI-1482基因组DNA中扩增出约1080bp的dnrX部分序列,将PCR扩增片段中985bp的片段亚克隆至大肠埃希菌质粒pYG813构建了同源重组突变质粒pYG963,转化SIPI-1482原生质体并成功地敲除了dnrX基因,得到一株稳定的突变株。该突变株的发酵试验表明dnrX基因所编码的酶的功能已经被有效地阻断,对酸敏感的副产物减少,柔红霉素的产量增加了近3倍,将原野生菌改造成为多柔比星产生菌,发酵效价与原野生菌株柔红霉素的发酵效价相当,为直接发酵法生产多柔比星打下了基础。     

基于哺乳动物细胞培养的流感疫苗生产

传统的流感疫苗生产多采用鸡胚培养,但该生产过程易受微生物污染、内毒素残余量高、对流感大流行应急能力差,因此基于哺乳动物细胞培养的病毒疫苗工业的发展变得尤为重要.本文综述国内外采用哺乳动物细胞培养,重点是MDCK细胞,生产流感疫苗的研究以及临床应用现状.     

1-脱氧-D-木酮糖醇-5-磷酸还原异构酶（DXR）作为新的药物靶点的研究进展

植物、藻类和细菌等可利用2C-甲基-D-赤藓糖醇．4．磷酸（MEP）途径生物合成类异戊二烯前体异戊酰焦磷酸（IPP）及其异构体二甲烯丙基焦磷酸（DMAPP）等生长所必须的前体,因此MEP途径作为除草剂、抗菌药物和抗疟疾药物的药物靶点可用于新药开发。其中MEP途径中的第二个酶1-脱氧-D-木酮糖醇-5-磷酸还原异构酶（DXR）是研究最为广泛的靶点,膦胺霉索即为该酶的抑制剂。本综述主要介绍MEP途径、DXR及其抑制剂的研究进展。     

基因组特定基因座相关蛋白的纯化

真核生物的DNA在染色质中被多种蛋白复合体结合及调控，本文介绍了一种叫做离体染色质片段蛋白组学（proteomics of isolated chromatin segments，PICh）的方法来解析调控特定基因座的蛋白。PICh利用一种特殊的核酸探针来分离鉴定结合基因组DNA的蛋白。利用PICh法从人端粒染色质上纯化鉴定出了大多数已知的端粒因子，并发现了大量新的调控蛋白。