层析法提纯A、C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜多糖工艺的建立

目的 建立A、C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜多糖层析纯化工艺。方法 采用陶瓷羟基磷灰石和DEAE Sepharose FF层析柱，在PBS体系中纯化A群多糖。以0.5%脱氧胆酸钠预处理C群多糖，用陶瓷羟基磷灰石层析柱在PBS体系中纯化C群多糖。以含有脱氧胆酸钠的平衡缓冲液溶解Y和W135群多糖，再用Capto Adhere和Capto DEAE层析柱串联纯化。纯化的多糖经Sephadex G-25 Medium层析柱脱盐后冻干，按中国药典2015年版三部的要求进行检定。结果  经过层析纯化，A、C、Y、W135群多糖的蛋白质含量分别降至3.7、4.2、5.4和5.3 mg/g，核酸含量分别降至1.2、3.0、1.1和0.8 mg/g，均符合药典要求。此外，磷、唾液酸和O-乙酰基含量等指标亦均符合药典标准。结论 建立了A、C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜多糖的层析纯化工艺。     

疫苗制品氢氧化铝佐剂质量控制及国家标准建立

目的：建立国内疫苗用氢氧化铝佐剂的质量标准。方法：分别以不同厂家制备工艺获得的氢氧化铝佐剂作为研究对象,参照欧洲药典的铝佐剂质量标准进行氢氧化铝佐剂的检定项目确认、分析方法建立及限度确认,并依据检定结果及产品特性建立国家标准。 结果与结论：建立氢氧化铝佐剂的16项质量控制项目,包括外观、溶解性能、鉴别试验、无菌检查等,并确立了国家标准。目前已建立疫苗用氢氧化铝佐剂的质量标准接近国际标准,可实现对铝佐剂严格的质量控制,进一步提高我国铝佐剂疫苗的安全性和有效性。     

人用疫苗氢氧化铝佐剂吸附力的质量控制初探

目的 建立氢氧化铝佐剂吸附力的相关质控方法.方法 对3批国产氢氧化铝佐剂与丹麦铝佐剂（Alhydrogel）同时进行粒径、比表面积、零电荷点的测定,并比较两种佐剂对不同浓度牛血清白蛋白（bovine serum albumin,BSA）及百日咳丝状血凝素（filamentous hemagglutinin,FHA）的吸附力.结果 测定显示,3批国产铝佐剂50％体积百分比（DV50）的粒径分布分别为4.49、5.83和6.28 μm;比表面积分别为1 602、1 093和1 014 m^2/kg;零电荷点分别为10.2、10.3和10.2.丹麦铝佐剂DV50的粒径为4.58 μm,比表面积为2 230 m^2/kg,零电荷点为8.5.3批国产和1批丹麦铝佐剂（5 g/L）对2 g/L BSA的吸附率分别为98.69％、99.41％、99.72％和98.04％,均符合欧洲药典的吸附力合格标准.国产和丹麦铝佐剂（1.3 g/L）对50～1 000 mg/L FHA的吸附率均在97％以上.结论 根据对国产氢氧化铝佐剂相关质量指标的研究,初步建立了氢氧化铝佐剂吸附力的质控标准.     

检测脑膜炎球菌多糖疫苗Y群多糖含量和分子大小的双抗体夹心ELISA法的建立和初步应用

目的建立测定A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖疫苗（groupsA，C，Y，W135meningococ—calpolysaccharidevaccine，MPV4）Y群多糖含量的双抗体夹心ELISA法。方法采用杂交瘤技术制备抗Y群多糖单克隆抗体，并通过过碘酸钠法用辣根过氧化物酶标记单克隆抗体。分别以抗Y群多糖不同位点的单克隆抗体作为包被抗体和酶标二抗，通过优化反应条件来建立双抗体夹心ELISA法，同时进行方法学验证。结果建立的双抗体夹心ELISA法特异性良好，未检出与A、C、W135群多糖的交叉反应。Y群多糖在2．5～20．0ng／ml范围的剂量反应曲线呈现最佳线性关系，相关系数〉0．99。该法的试验内和试验间准确度较好，精密度较佳，定量限度为4ng／ml。采用该法测定3批MPV4Y群多糖显示，Y群多糖的含量、多糖分子大小‰值和回收率的结果均与先前的检定结果一致，符合暂行质量标准。结论建立的双抗体夹心ELISA法可用于MPV4Y群多糖的关键质量指标测定。     

多糖蛋白结合疫苗

用细菌荚膜多糖（CPS）制备的多糖疫苗免疫1针,即可诱导保护水平的抗体（1）。但多糖疫苗再次免疫不能使降低的抗体恢复到初次免疫后的水平,没有免疫增强效应,也不能促进同类抗体型别之间的转换;在二岁以下婴幼儿中免疫原性差,不能诱导有效的免疫保护（2,3）。将CPS与具有强免疫原性的蛋白抗原通过化学方法制备成结合物,可以增强CPS的免疫原性,再次免疫可诱导保护水平的抗体（4,5）。这种用细菌的多糖（PS）抗原与蛋白载体通过化学方法制备的疫苗,称之为结合疫苗（Conjugatevaccine）。本文就结合疫苗的研制现状进行综述,以期…     

百日咳抗体在婴儿体内的变化过程及菌苗应答效果

本文作者对母婴传递抗体及用百日咳菌体菌苗和百日咳无细胞菌苗给婴儿免疫后凝集素、白细胞增多促进因子(LPF)和丝状血凝素(FHA)抗体变化规律进行了研究。试验共分3组,34名母亲及其新生儿的配对血清为第1组,从测定脐带血及母体血清抗体结果表明,新生儿脐带血的LPF抗体平均滴度为14.0EU(ELISA单位),为母亲抗体的2.9倍(P=0.057);FHA抗体平均为26.8EU,其母亲为41.4EU,无显著差     

检测百日咳毒素的双抗体夹心ELISA法的建立

目的  建立白喉-破伤风-无细胞百日咳疫苗生产中百日咳毒素（pertussis toxin, PT）含量的测定方法。方法  免疫家兔制备高效价抗PT血清,纯化抗PT多克隆抗体并进行酶标记,建立双抗体夹心ELISA法并对其进行验证。结果  建立的方法在0~20 ng/ml PT测量区间呈现最佳线性,相关系数＞0.99,且重复性好。检测百日咳丝状血凝素和黏着素,结果均为阴性,说明该法特异性良好。试验内10次、不同试验间3次测定16.0、8.0、4.0、3.0 ng/ml PT,变异系数为2.8%~9.7%,回收率为95.7%~106.0%,精密度和准确度验证均符合常规质量控制要求,定量限度为3.0 ng/ml。结论  该方法能有效检测百日咳杆菌大罐发酵过程中分泌的PT,为PT质量控制奠定了重要基础。     

A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖疫苗多糖含量测定方法的建立

目的  建立测定A、C、Y、W135群脑膜炎球菌（meningococcus,Men）多糖疫苗（groups A,C,Y,W135 menignococcal polysaccharide vaccine,MPV4）多糖含量的火箭免疫电泳（rocket immunoelectrophoresis,RIE)法。方法  分别用A、C、Y、W135群Men菌液、A、C、Y、W135群Men菌液加佐剂、A、C、Y、W135群Men多糖-牛白蛋白结合物免疫家兔,制备特异性抗血清。将制备的抗血清以一定的比例加入琼脂糖凝胶制成平板,并将纯化的多糖作为定量参考品加入抗原孔进行RIE。以多糖含量和对应的RIE峰高作标准曲线并建立直线回归方程。采用优化的RIE法测定MPV4多糖含量和分子大小。结果  菌液加佐剂制备的抗血清效价较理想。在确定的电泳条件下,建立的RIE法制备的标准曲线呈现良好的线性关系,相关系数值均大于0.98。该法特异性较好,未检出各多糖间的交叉反应。采用该法测定3批MPV4多糖含量、分子大小及回收率的结果均与先前的检定结果相符,均符合质控标准。结论  建立的RIE法可作为MPV4多糖抗原含量的测定方法。     

家庭接触者百日咳抗体、保护作用和菌苗效果

作者对在瑞典家庭接触对象的效力试验进行了研究,目的在于除用临床症状外,还需对家庭接触后出现多种定义的临床病例中,用培养阳性结果来评价菌苗的效果;并探索抗培养阳性的典型百日咳病的保护作用及抗百日咳菌定居作用与血清学的关系。注射第2针后的16个月间,对经培养证实的原发性病例的家庭进行菌苗效果的主动