新藤黄酸诱导HepG2细胞凋亡与Bax及Bcl-2的关系

<正>中药藤黄(gamboge)系藤黄科植物藤黄树(Garcinia hanburyi Hook.F.G)所分泌的干燥树脂,近年来,藤黄的抗肿瘤作用受到高度关注。已有研究证实,新藤黄酸(neo-gambogic acid,NGA)为藤黄抗肿瘤作用的主要有效成分之一[1-3]。肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上最常见的恶性肿瘤之一[4],同时也是第三大引起患者死亡的肿瘤[5]。     

新藤黄酸对S180细胞株的体内外抗肿瘤作用

目的:评价新藤黄酸对S180肿瘤细胞株的体内外抗肿瘤作用.方法:将不同浓度的新藤黄酸分别作用于体外培养的S180细胞48 h,用CCK-8法检测药物对S180细胞的增殖抑制作用;以8.0,4.0,2.0 mg·kg-1剂量ip给予S180腹水瘤小鼠,每天1次,连续7d,观察45 d对存活时间的影响;以16.0,8.0,4.0 mg·kg-1剂量ig给予荷S180实体瘤小鼠,每天1次,连续12d,评价新藤黄酸的体内抗肿瘤作用;测单次ip给药对小鼠的LD50.结果:新藤黄酸对体外培养S180细胞的增殖有明显的抑制作用,药物作用48 h其IC50为(1.54±0.12) mg·L-1;4.0 mg· kg-1新藤黄酸ip给药可使S180腹水瘤小鼠存活时间较荷瘤对照组延长141.6％,新藤黄酸对S180实体瘤的抑制作用随着剂量的增大而升高,并呈一定剂量依赖性,体内抗肿瘤显著(P＜0.05);单次ip给药对小鼠的LD50为36.66 mg·kg-1.结论:新藤黄酸对S180细胞株具有明显的体内外抗肿瘤作用.     

新藤黄酸在家兔体内的药代动力学研究

目的建立家兔血浆中新藤黄酸的HPLC测定法,并研究其药代动力学。方法家兔静脉注射新藤黄酸后于不同时间点取血,经HCl酸化,乙酸乙酯提取处理,采用Phenomenex Luna C18色谱柱,以乙腈-0.1 mol·L-1醋酸铵-醋酸(80 ∶ 20 ∶ 0.1)为流动相;柱温:30 ℃,流速:1.0 mL·min-1,检测波长:355 nm;测定血浆中的新藤黄酸的浓度,并用非房室模型估算药代动力学参数。结果新藤黄酸在0.518～266 mg·L-1线性关系良好(r=0.9995),回收率大于90 %,日内、日间精密度(RSD)均小于15 %,其消除半衰期(t1 / 2)为23.38 min,分布容积(V)为0.13 L·kg-1,药-时曲线下面积(AUC0-∞)为1107.00 mg·min·L-1。结论该法可用于新藤黄酸的药代动力学研究,新藤黄酸在家兔体内消除迅速,滞留时间短。     

华南忍冬藤HPLC指纹图谱研究

目的: 建立华南忍冬藤的HPLC指纹图谱,为华南忍冬藤质量评价提供理论依据。 方法: 采用RP-HPLC。Kromasil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),乙腈-0.3%甲酸溶液梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,柱温30 ℃,检测波长238 nm。图谱用国家药典委员会"相似度评价软件(2004A)"处理分析。 结果: 确立了12个共有峰的共有模式,10批红腺忍冬藤样品指纹图谱相似度高。 结论: 方法简便、准确、重复性好,为评价华南忍冬藤药材的质量提供了依据。     

新藤黄酸对HepG2裸小鼠移植瘤的抗肿瘤作用与MAPK信号转导通路的关系

目的:研究新藤黄酸(neo-gambogic acid,NGA)对Hep G2裸小鼠移植瘤的体内抗肿瘤作用及其机制.方法:采用Hep G2裸小鼠移植瘤模型,造模7d后将模型动物随机分为5组,即荷瘤对照组,阳性对照组(5-FU 10.0 mg·kg-1),NGA高、中、低剂量组(分别为8.0,4.0,2.0 mg·kg-1),隔天ip给药1次,给药7次后处死动物,分离肿瘤,测量肿瘤体积,称瘤重,计算相对肿瘤体积和抑瘤率,并将肿瘤组织切片,采用免疫组化法,检测实体瘤组织的Bax,Bcl-2,p-ERK1/2,p-MEK1/2蛋白的表达情况.结果:NGA高、中、低剂量组的平均瘤重[分别为(0.21±0.07),(0.41±0.17),(1.00±0.28)g]均明显低于荷瘤对照组(1.29±0.24)g,NGA高剂量组的抑瘤率为83.75％,高于阳性对照药5-FU的抑瘤率46.54％(P＜0.05);Bax表达量呈剂量依赖性升高,Bcl-2表达量呈剂量依赖性降低;NGA给药组p-ERK1/2和p-MEKl/2的表达量均明显低于荷瘤对照组(P＜0.05).结论:NGA对Hep G2裸小鼠移植瘤具有确切的体内抗肿瘤作用,其作用机制与上调Bax/Bcl-2比值而诱导实体瘤细胞凋亡及下调丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号转导通路的磷酸化水平密切相关.