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目的探讨辣椒素受体(vanilloid receptor subtype1,VR1)在慢性疼痛发生机制中的作用,构建携带VR1siRNA的慢病毒载体并检测其对大鼠DRG神经元VR1基因的干扰作用。方法设计靶向大鼠VR1基因的发夹状siRNA,合成两对互补的寡核苷酸序列,退火后克隆到酶切的pRNAT-U6.2/Lenti siRNA载体,通过PCR和DNA测序鉴定重组质粒。空载体及重组质粒分别与慢病毒包装质粒共转染293T细胞生成慢病毒载体。通过蛛网膜下腔将慢病毒载体注射到大鼠体内,采用RT-PCR方法检测L4-L6DRG神经元内VR1的沉默效果。结果测序鉴定证实目的寡核苷酸片段被克隆到pRNAT-U6.2/Lenti载体中;经蛛网膜下腔注射后,pRNAT-U6.2/Lenti-siVR1可下调正常大鼠L4-L6DRG神经元内VR1mRNA的表达。结论成功构建了靶向VR1基因的siRNA载体,可有效抑制VR1mRNA的表达,为深入研究和治疗慢性痛提供了有力的工具。 相似文献
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目的：观察选择性COX-2抑制剂替泊沙林对冰醋酸所致小鼠扭体的镇痛作用。方法：雄性昆明种小鼠，体重18-22g，随机分为5组，每组10。对照组灌服0．5％羧甲基纤维素钠（20ml／kg），试药组分别灌服0．56、1．12、2．24及4．48mg／kg的替泊沙林。灌服1小时后，腹腔注射0．6％冰醋酸（生理盐水配制）10ml／kg，观察注射后小鼠首次出现扭体反应的时间（以“扭体反应潜伏期”表示），并记录注射冰醋酸后1小时内小鼠的扭体次数。结果：替泊沙林可明显抑制小鼠因腹腔注射冰醋酸而出现的扭体反应。灌服给药后，该化合物显著延缓小鼠首次出现扭体反应的时间及减少1小时内的扭体次数。CMC对照组和替泊沙林0．56、1．12、2．24及4．48mg／kg四试药组的扭体反应潜伏期分别为3．7、6．1、11．8、12．6及15．1min；与上述组别相对应的1小时内小鼠的扭体次数分别为139、113．6、73．4、46．8及31．4次。方差分析结果表明：替泊沙林给药组和CMC对照组间扭体反应潜伏期及1小时内小鼠的扭体次数均有显著性的差异（P〈0．05），且替泊沙林可剂量依赖性地延长注射冰醋酸后的扭体反应潜伏期并减少1小时内小鼠的扭体次数。结论：替泊沙林对小鼠因冰醋酸刺激所致疼痛具有显著的镇痛效果。 相似文献
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