UPLC-QQQ-MS/MS同时测定金银花饮片中核苷类成分的含量

目的 建立超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-QQQ-MS/MS)法比较研究金银花的水提液中核苷类成分的含量。方法 采用Waters BEH C₁₈(2.1 mm×50 mm, 1.7μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)为流动相梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1,柱温30℃,进样量3μL,电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测模式(MRM)对金银花的水煎液中核苷类成分的含量进行测定。结果 金银花中共检测出尿嘧啶、鸟嘌呤、黄嘌呤、β-胸苷、尿苷、2′-脱氧腺苷、2′-脱氧鸟苷、肌苷、鸟苷、胸腺嘧啶、腺苷、环磷酸鸟苷等12种核苷类成分,其中鸟苷和尿苷的含量较高,胸腺嘧啶、腺苷、环磷酸鸟苷的含量由于过低而未展示,其余9种核苷类成分在测定质量浓度范围内线性关系良好(r≥0.999 0),方法精密度、重复性和稳定性的RSD值均小于3.0%,平均加样回收率在99.4%～102.1%,RSD在1.7%～2.7%。结论 该方法准确、可靠,适用于同时测定金银花饮片中核苷类成分的含量,可用于金银花饮片的质量控制。     

“峻补肾阳”之右归丸对骨质疏松症防治的研究进展

梳理近20年右归丸防治骨质疏松症（osteoporosis,OP）的相关文献,应用VOS viewer进行可视化分析。右归丸可改善OP患者骨代谢及临床症状,通过调节TGF-β、Wnt/β-catenin及AMPK/mTOR等多条信号转导通路改善OP模型动物骨密度及骨代谢情况,并影响骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）的增殖及分化。共现聚类和关键词密度分析显示,右归丸防治OP的侧重点及趋势主要在于肾阳虚型OP、BMSCs成骨及成脂分化、骨代谢等,并探讨了右归丸调节上述信号通路防治OP的作用机制。     

多指标结合AHP-CRITIC优化酸枣叶拌蒸酸枣仁炮制工艺

目的 采用正交设计结合层次分析法-客观赋权法（AHP-CRITIC）优化酸枣叶拌蒸酸枣仁的炮制工艺。方法 采用单因素试验优化辅料酸枣叶的加入倍量和蒸制时间,以酸枣叶的加入倍量和蒸制时间为因素,以斯皮诺素、6?-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、白桦脂酸含量为评价指标进行综合加权评分,结合AHP-CRITIC优化酸枣仁的拌蒸工艺。结果 最佳拌蒸工艺为酸枣叶加入量是酸枣仁的4倍,1层酸枣叶1层酸枣仁交替平铺,上锅蒸制3 h。结论 多指标结合AHP-CRITIC优选酸枣仁拌蒸工艺合理可行,可为酸枣叶拌蒸酸枣仁炮制工艺的生产实践提供参考。     

UPLC-QQQ-MS/MS法比较研究不同片型何首乌饮片水提液中核苷类成分的含量

摘要：目的:建立UPLC-QQQ-MS/MS法比较研究不同片型何首乌饮片水提液中尿嘧啶、尿苷、鸟苷、黄嘌呤等核苷类成分的含量。方法:采用Waters BEH C18（50 mm×2.1 mm, 1.7μm）色谱柱,以乙腈（A）-0.1%甲酸水（B）为流动相进行梯度洗脱,流速：0.4 ml·min-1,进样量：3μl,电喷雾离子源（ESI）,正离子多反应监测模式（MRM）对何首乌传统片和微型片水提液中6个核苷类成分含量进行检测分析。结果:何首乌微型片水提液中核苷类成分含量明显高于传统片水提液。何首乌中主要含有尿嘧啶、尿苷、腺嘌呤、鸟苷、肌苷、黄嘌呤等6种核苷类成分。该6种核苷成分在测定质量浓度范围内线性关系良好（r≥0.999 1）,方法精密度、重复性和稳定性的RSD均小于3.0%,平均加样回收率在98.9%～102.5%,RSD在1.9%～2.7%（n=6）。结论:何首乌切制成微型片较传统片更有利于有效成分的煎出和提取。同时,该试验检测方法准确、可靠,适用于何首乌饮片中核苷类成分的含量测定与质量控制。     

不同采收时间黄芪质量及其《中华人民共和国药典》含量测定指标修订研究

目的比较不同采收时间的黄芪质量, 并修订《中华人民共和国药典》中黄芪含量测定指标。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm, 5 μm), 以乙腈-纯水溶液为流动相, 梯度洗脱, 蒸发光散射检测器漂移管温度60 ℃, 气压30 psi, 增益800 ℃, 流速1.0 ml/min, 柱温30 ℃, 进样量20 μl检测黄芪皂苷类成分含量;以乙腈-0.2%甲酸水溶液为流动相, 梯度洗脱, 流速1.0 ml/min, 检测波长260 nm, 柱温30 ℃, 进样量10 μl, 检测黄芪黄酮类成分含量。考察黄芪皂苷Ⅰ的提取方式和提取时间, 并检测12批不同产地黄芪中黄芪皂苷Ⅰ含量, 确定其作为黄芪含量测定指标的限定范围。依据2020年版《中华人民共和国药典》四部中的烘干法、总灰分测定法、冷浸法测定黄芪水分、总灰分、水溶性浸出物。结果不同产地春、秋采收的黄芪总皂苷含量差异不明显, 总黄酮含量有明显差异。除H11外, 其余各批次黄芪中黄芪皂苷Ⅰ含量≥0.05%, 故拟定黄芪皂苷Ⅰ含量限定范围为≥0.05%。12批黄芪水分、总灰分、水溶性浸出物的结果...     

肉苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠降血糖作用

目的 探讨肉苁蓉和酒苁蓉不同提取部位对db/db小黑鼠降血糖的作用及机制。方法 富集肉苁蓉和酒苁蓉总多糖、总寡糖和总苷部分,对其含量进行了比较分析。选用db/db小黑鼠为实验动物,给药28 d 后,记录小黑鼠体重、进食量、饮水量,检测血糖,采用ELISA检测血清胰岛素(INS)、糖化血红蛋白(HbA1c),肝脏甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）,血浆和尿液中尿酸（UA）、肌酐（Cr）以及尿微量白蛋白（mAlb）水平;HE染色方法制备胰腺和肾脏组织病理切片;IHC测定肾脏type-IV collagen蛋白表达水平。结果 肉苁蓉多糖部位经过酒蒸后含量下降,肉苁蓉寡糖部位中的甜菜碱经过酒蒸后含量增加,总苷类成分酒蒸后松果菊苷的含量稍有下降,毛蕊花糖苷含量下降,异类叶升麻苷含量上升。与模型组相比,肉苁蓉和酒苁蓉不同提取部位能显著降低体重、空腹血糖（FBG）、口服葡萄糖耐量(OGTT)、HbA1c、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、胰岛β细胞分泌指数（HOMA-β）、MDA、LDL-C、UA、Cr以及mALB,INS和HDL-C有上升趋势（P<0.05,P <0.01）,且能改善胰腺和肾脏的病理损伤以及type-IV collagen的表达。结论 肉苁蓉和酒苁蓉总苷组降血糖作用较好,酒苁蓉多糖和寡糖也有一定的降血糖作用。     

肉苁蓉治疗肾阳虚有效部位筛选

目的 研究肉苁蓉不同提取部位对肾阳虚大鼠的改善作用，明确其补肾壮阳有效部位。方法 采用水提醇沉法制备肉苁蓉总多糖部位，大孔吸附树脂柱富集肉苁蓉总寡糖和总苷部位。灌胃丙基硫氧嘧啶制备肾阳虚大鼠模型，分别予肉苁蓉总多糖143 mg/kg、总寡糖110 mg/kg、总苷82 mg/kg,ELISA测定各组大鼠血清三碘甲状腺原氨酸(T₃)、甲状腺素(T₄)、促甲状腺激素(TSH)、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、皮质醇(Cor)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、睾酮(T)、雌二醇(E2)水平，计算cAMP/cGMP比值，RT-PCR测定大鼠下丘脑促甲状腺素释放激素(TRH)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)mRNA表达，HE染色观察大鼠右肾组织病理改变情况。结果 肉苁蓉总苷、总多糖和总寡糖对肾阳虚大鼠血清T3、E2、cGMP含量均表现出很好的回调作用，肉苁蓉总苷、总寡糖对肾阳虚大鼠血清T4、TSH、ACTH含量及TRH、CRH mRNA表达有显著回调作用。结论 肉苁蓉总苷、总多糖、总寡糖对大鼠肾阳虚症状有改善效果，其中总苷效果最佳。     

UPLC-MS法测定酸枣仁炮制前后的12种成分

目的 测定不同来源酸枣仁在炒制前后斯皮诺素、6-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、白桦脂酸、当药黄素、柚皮苷、异槲皮苷、芦丁、槲皮素、阿魏酸、异牡荆苷等12种成分的含量。方法 采用UPLC-MS技术，以乙腈(A)-水(B)为流动相，经Waters Acquity UPLC BEH C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.7μm)梯度洗脱，流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃,样品室温度8℃,进样量1.0μL。离子源用负离子模式进行扫描采集，用MRM模式监测。结果 12种成分在相应的进样量范围内线性关系良好，r²≥0.9990,方法精密度、重复性、稳定性的RSD值均小于2.0%,平均加样回收率为98.37%～101.34%,RSD为0.49%～2.82%。结论 所用方法快速、准确，可用于酸枣仁生品及炮制品的质量评价，为优化酸枣仁的炮制工艺提供了依据。