排序方式: 共有6条查询结果,搜索用时 2 毫秒
1
1.
2.
目的 建立能分泌人转铁蛋白受体(TfR)特异性抗体的杂交瘤细胞株,并对其分泌的抗体进行初步鉴定. 方法 将人肝癌细胞株HepG2分离纯化的TfR蛋白,采用常规法免疫BALB/C小鼠;采用间接ELISA法测定免疫血清抗体效价;采用常规聚乙二醇(PEG)介导法,将免疫小鼠脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞株SP2/0融合,用含HAT培养基筛选杂交瘤细胞;采用间接ELISA和Cell-ELISA法筛选TfR抗体阳性的杂交瘤细胞;采用有限稀释法进行克隆和多次亚克隆以建立稳定分泌TfR抗体的杂交瘤细胞株;将杂交瘤细胞注射经石蜡油致敏的小鼠腹腔以产腹水抗体,采用硫酸-辛酸法纯化腹水抗体;采用秋水仙素处理,计数细胞染色体数以进行杂交瘤细胞鉴定;采用免疫荧光染色法和Western blot法初步鉴定抗体与细胞表面或细胞总蛋白中TfR的结合. 结果 提取纯化的人TfR蛋白免疫小鼠获得成功,其1∶5 000稀释的血清抗体光吸收值(A490)是对照小鼠血清(1∶200稀释)的16倍以上;细胞融合率为42.22%,其中TfR抗体阳性孔20个,抗体阳性率为13.16%;抗体阳性孔B6和孔E8中杂交瘤细胞经克隆和亚克隆后建立起稳定分泌抗体的细胞株;B6杂交瘤细胞染色体数量位于56~60条之间,应为B细胞和SP2/0细胞融合而来;腹水抗体染色使HepG2细胞表面出现明亮荧光,并且能使HepG2细胞提取的总蛋白电泳图谱在95 000处出现清晰条带,表明该杂交瘤细胞分泌的抗体能特异性结合TfR蛋白.结论 分泌抗人TfR抗体的小鼠杂交瘤细胞株已被筛选和建立;其分泌的抗体能与HepG2细胞的TfR特异性结合. 相似文献
3.
4.
5.
1材料和方法1.1标本来源从2002年1月31日~2004年6月30日,以我院临床确诊病例的脑脊液(CSF)为检测标本,计90份,其中结核性脑膜炎(结脑)64份,非结核性中枢神经系统疾病(非结脑)26份(作对照组)。1.2材料普通离心机和FMU-5型脑脊液细胞离心沉淀器系第四军医大学产品。1.3方法对90份脑脊液均采用直接涂片法和玻片离心法两种方法制片。将送检的脑脊液分成两份,其中一份用普通离心机以1500~2000 r/m in离心10m in,弃去上清液,取沉淀物直接涂片;另一份置于FMU-5型脑脊液细胞离心沉淀器上,以1500 r/m in离心10m in,将液体全部甩干,将脑脊液内的全… 相似文献
6.
1993年潘理明等[1]报道用鬼臼乙叉甙(VP16)偶联血小板治疗3例难治性特发性血小板减少性紫癜(RITP)有效,我院自1994~1999年应用该法对RITP患者进行了治疗,结果如下。1 材料和方法11 一般资料 28例RITP患者均为住院病人,男11例,女17例。年龄11~64岁。平均275岁,平均病程45年(1~8年)。均曾用泼尼松、长春新碱、环磷酰胺、达那唑、中药等药物治疗。诊断及疗效按全国统一标准[2]。12 供体选择 选ABO血型符合者,再采用SPISA间接法[3]选出与患者… 相似文献
1