苦豆子总碱及其两种单体生物碱对PC12细胞活性的抑制作用

目的：研究比较从苦豆子中提取分离的苦豆子总碱、苦参碱、槐定碱分别对肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（PC12细胞活性的影响。方法：采用噻唑蓝（MTT）比色法检测2、1、0.5、0.25、0.125、0.062 5 g·L-1苦豆子总碱、苦参碱、槐定碱分别对PC12细胞增殖的影响;酶标法检测细胞乳酸脱氢酶（LDH）渗漏率;流式细胞术检测细胞凋亡率、细胞周期、细胞内Ca2+水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA转录水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞凋亡相关蛋白胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、胱天蛋白酶-8(Caspase-8)及Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果：与空白组比较,苦豆子总碱、苦参碱、槐定碱均能抑制PC12细胞增殖,使细胞LDH渗漏率显著增加,细胞内Ca2+荧光强度显著增强,诱导细胞的凋亡,并呈现一定的浓度依赖性（P<0.05,P<0.01）,其中苦豆子总碱对PC12细胞的增殖抑制作用和诱导细胞凋亡作用最强（P<0.01）;经苦豆子总碱、苦参碱、槐...     

紫铆花素对人黑色素瘤细胞A375与人永生化角质形成细胞HaCaT共培养细胞生物学活性的影响

目的 探讨紫铆花素对人黑色素瘤细胞A375与人永生化角质形成细胞HaCaT共培养细胞生物学活性的影响。方法 建立A375细胞与HaCaT细胞的共培养细胞体系,实验分为对照组(等体积培养液),紫铆花素低、中、高剂量组(以下简称低、中、高剂量组,0.5,1.0,5.0μg/L)。采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;采用流式细胞仪检测细胞的周期分布和线粒体膜电位;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测干细胞因子(SCF)和其受体c-Kit,以及小眼畸形相关转录因子(MITF)的mRNA表达水平;采用Western blot法检测细胞酪氨酸酶相关蛋白1,2(TRP-1,TRP-2)及SCF,c-Kit,MITF的蛋白表达水平。结果 与对照组比较,中、高剂量组细胞的增殖率均显著升高(P <0.01);与对照组比较,各剂量组G₀/G₁期细胞比例均显著降低,S期和G2/M期细胞比例均显著升高(P <0.01),高线粒体膜电位细胞比例均显著升高(P <0.05或P <0.01),SCF,c-Kit,MITF的mRNA...     

苦豆子总碱对大鼠学习记忆功能和乙酰胆碱生成的影响

目的 研究苦豆子总碱的急性毒性,探讨苦豆子总碱对大鼠学习记忆功能和乙酰胆碱(Ach)生成的影响。方法 采用急性毒性试验法测定苦豆子总碱对小鼠的急性毒性。将48只SPF级♂SD大鼠随机均分为正常对照组、苦豆子总碱组(低、中、高剂量分别为4、8、16 mg·kg^-1),连续灌胃给药28 d。观察大鼠的体重和体温变化;采用避暗试验检测大鼠的学习记忆功能;采用比色法检测血清与脑组织中Ach、乙酰胆碱酯酶(AChE)及胆碱乙酰移位酶(ChAT)的含量或活性。结果 苦豆子总碱的小鼠急性经口半数致死量为0.203±0.024 g·kg^-1。与对照组比较,苦豆子总碱能明显降低大鼠的体温,延长大鼠的避暗潜伏期和减少大鼠的避暗次数,同时,降低大鼠血清和脑组织中Ach的含量和ChAT的活性及升高大鼠脑组织中AChE的活性,且降低脑组织中ChAT/AChE的比值。结论 苦豆子总碱具有明显的急性毒性反应,对大鼠学习记忆功能有损伤,这可能与苦豆子总碱不仅降低大鼠体温,而且降低ChAT的活性,提高AChE的活性,从而导致大鼠的学习记忆功能受损,ACh的含量下降。     

苦豆子总碱对大鼠神经行为和氧化损伤的影响

目的 探讨苦豆子总碱对大鼠神经行为的改变和氧化损伤的影响。方法 将48只SD大鼠随机分为对照组、苦豆子总碱组(低、中、高剂量分别为4、8、16 mg·kg^-1·d^-1),连续ig给药3周后，进行行为学指标的检测。用ELISA法检测抗氧化指标，观察苦豆子总碱对大鼠学习记忆和氧化损伤的影响。结果 在Morris水迷宫实验中，高剂量组大鼠上台潜伏期延长，穿台次数减少；在跳台实验在，高剂量组大鼠通过训练电击次数下降明显；ELISA法结果发现：苦豆子总碱高剂量组能降低血清和脑组织中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化物酶的活性，升高丙二醛和脂褐素酶活性。结论 苦豆子总碱可导致大鼠学习记忆能力的降低，其机制可能与脑组织中氧自由基清除能力降低及脑组织氧化损伤所致的神经毒性有关。