甲醛和苯联合染毒对小鼠胚胎发育的影响

目的研究妊娠期甲醛和苯联合染毒对小鼠胚胎发育的影响。方法将妊娠0天的昆明小鼠随机分为对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,并分别于妊娠第6天开始进行吸入式染毒,连续15 d,甲醛和苯的剂量为国家室内空气标准的0倍、1倍、50倍和100倍。仔鼠出生后,记录正常生产孕鼠数、产仔数、流产孕鼠数及出生24 h后存活的仔鼠数。仔鼠称重后分离肝及脑组织并进行RT-PCR,检测部分脑、肝发育相关基因在组织内的表达情况。取仔鼠肝组织,固定后免疫组化检测IGF-1的表达情况。结果高剂量组的流产孕鼠数高于对照组、低剂量组及中剂量组(P<0.05);高剂量组的产仔数、存活数低于其余各组(P<0.05);中剂量组、高剂量组仔鼠体重低于对照组和低剂量组(P<0.05);高剂量组发育相关基因Peg3和IGF-1的表达强度低于对照组、低剂量组及中剂量组(P<0.05)。免疫组化结果显示仔鼠肝组织中IGF-1表达降低。结论妊娠期接触甲醛与苯混合气体可导致孕鼠流产率上升、产仔数、仔鼠存活数、仔鼠体重下降,同时也会导致胚胎发育过程中重要基因IGF-1和Peg3表达下调。     

BMP-4在卵巢早衰小鼠卵巢中的变化

目的分析BMP-4在化疗后卵巢早衰(POF)小鼠卵巢中的表达,探索BMP-4与卵巢早衰卵巢中卵泡发育的关系,为卵巢早衰的发病机制及临床治疗的研究提供参考依据。方法选用48只4~5周龄具有正常动情周期的雌性昆明小鼠随机分为3组:POF组,腹腔注射环磷酰胺,皮下注射白消安建立卵巢早衰模型;对照组,腹腔注射0.9%的生理盐水;正常组。观察并记录小鼠的一般情况,应用HE染色、免疫组织化学技术和Western blot技术,观察卵巢形态学变化、各级卵泡数的变化及BMP-4的分布情况。结果 1POF组小鼠体重下降,卵巢体积缩小,HE染色显示卵泡数目减少,原始卵泡数目(15.44±2.16)与正常组(55.25±16.09)和对照组(53.37±18.11)相比明显减少(P0.05)。2免疫组化结果显示BMP-4在正常组卵巢和对照组卵巢中的表达比在POF组卵巢中的表达高。3免疫组化结果显示BMP-4在POF卵巢中的表达明显减少,其中原始卵泡(39.83±6.50)减少最为明显,与正常组(68.61±5.25)和对照组(66.72±6.26)相比差异有统计学意义(P0.05)。4Western blot结果显示POF卵巢中的BMP-4表达最低,约为正常组的0.6倍(P0.05)。结论 POF组的BMP-4表达降低明显,在原始卵泡中降低最为明显,推测其对原始卵泡的存活和发育及调控卵泡闭锁有促进作用。     

胰岛素样生长因子1拮抗高糖对植入前期鼠胚印迹基因H19/Igf-2的影响

背景:课题前期研究已证实100μg/L胰岛素样生长因子1能拮抗体外30mmol/L高糖毒性引起的凋亡,可改善高糖环境对孕母/胎儿的危害。但这一改善胚胎早期发育的营养环境的发生机制和分子机制却不甚清楚。目的:结合前期工作基础,从表观遗传学角度入手,观察胰岛素样生长因子1拮抗早期高糖环境对小鼠胚胎印迹基因H19/Igf-2甲基化水平和表达的影响。方法:通过建立孕娠糖尿病小鼠模型,取小鼠2细胞胚胎等分为实验组和对照组;对照组置于含30mmol/L葡萄糖的KSOM培养基内进行体外高糖逆境培养,实验组额外添加100μg/L胰岛素样生长因子1处理。体外发育至囊胚期,检测胚胎印迹基因H19,Igf-2的表达和印迹控制区DNA甲基化水平。结果与结论:实时定量PCR分析表明,实验组桑椹胚H19,Igf-2的表达分别是对照组的5.9和5.2倍(P<0.01);实验组囊胚H19,Igf-2的表达分别是对照组的2.4和1.8倍(P<0.01)。BSP测序法分析H19,Igf-2印迹控制区的甲基化水平发现,实验组桑椹胚、囊胚的甲基化率分别比对照组下降27.9%和20.9%(P<0.01)。结果可见在高糖环境下胰岛素样生长因子1可部分降低H19/Igf-2印迹控制区DNA甲基化水平,使Igf-2和H19基因表达增高,能拮抗高糖环境对小鼠早期胚胎发育的损伤。     

FGFR3、MI及Ki67联合检测在T1期膀胱尿路上皮癌病理分级中的价值研究

目的 T1期膀胱尿路上皮癌(urothelial bladder cancer,T1 UBC)的病理肿瘤分级对于患者的预后及治疗决策有重要意义,但病理两级分级系统的诊断可重复性有限,该研究旨在寻找客观且易于检测的标志物用于T1 UBC的病理分级.方法 收集经尿道膀胱肿瘤电切术、病理诊断为膀胱尿路上皮病变共139例,其中...     

NO对大鼠卵巢Bcl-2／Bax表达的影响

目的探讨一氧化氮参与卵泡发育和凋亡的机制。方法采用免疫组化的方法检测NO供体硝普纳（SNP）对成熟大鼠卵巢中凋亡调控蛋白Bcl-2、Bax表达的影响。结果实验（SNP）组Bcl-2蛋白在窦前卵泡、窦状卵泡中表达下调,Bax蛋白在始基卵泡、窦前卵泡、窦状卵泡中的表达明显上调,与对照组比较差异有显著性（P〈O．05）。结论高浓度NO可上调大鼠卵泡中Bax蛋白的表达,下调Bcl-2的表达。推测NO可能通过Bcl-2／Bax途径来诱导卵泡中的细胞凋亡及卵泡闭锁。     

Gas7在大鼠前额叶皮质发育过程中的表达

目的探讨生长休止特定蛋白7(Gas7)在大鼠大脑前额叶皮质发育过程中的表达及机制。方法采用免疫组织化学方法和免疫印迹(Western blot)方法检测Gas7在SD大鼠胚胎第18天(E18)、出生后P1(第1)、P7、P14、P21和P60各时期大脑前额叶皮质中的表达。同胞鼠1/2用于免疫组化实验,1/2用于Western blot检测。结果免疫组织化学方法显示,前额叶皮质在E18时即出现Gas7免疫阳性产物,Gas7免疫阳性神经元出现于P1-P60,P7时Gas7免疫阳性神经元轮廓已比较清晰,至P14时Gas7阳性反应最强,细胞突起也较长;之后,P21至P60时Gas7阳性反应逐渐减弱,均弱于P14(P0.05)。Western blot检测显示,在E18时Gas7表达较弱,P1至P14Gas7表达逐渐增强,至P14时达到高峰,之后又逐渐减弱,差异有统计学意义(P0.05)。结论 Gas7在大脑前额叶皮质的表达具有时间和空间上的差异性,提示Gas7可能在前额叶皮质结构形成和功能成熟方面起着重要的调控作用。     

Bcl-2/Bax蛋白在生后大鼠卵巢不同发育时期的表达

目的 探讨Bcl-2/Bax与卵泡发育和凋亡的关系. 方法 用免疫组织化学技术和图像分析系统,对95只大鼠生后不同发育时期卵巢中凋亡相关因子Bcl-2/Bax的表达情况进行研究. 结果 0～360 d卵巢各级卵泡中的卵母细胞均呈Bcl-2/Bax阳性染色.正常卵细胞中Bcl-2反应强于Bax,退化卵细胞中Bax的反应强于Bcl-2.Bcl-2/Bax在卵泡细胞中的表达模式有所不同,21d前 Bcl-2为阳性,21～150d之间为Bcl-2阴性;180d以后正常卵泡为阴性,闭锁卵泡为阳性;Bax的表达,180d前全为阴性,180d后的表达同Bcl-2.膜细胞中Bcl-2/Bax的表达与卵泡细胞存在相似之处.Bcl-2/Bax在黄体中的表达只见于180d后. 结论 Bcl-2/Bax对卵细胞的生长、发育、存活和凋亡可能有重要的调节作用,其对卵泡细胞、膜细胞及黄体细胞的存活和凋亡的调节作用不明显.     

对比研究不同种抗生素对小鼠生精细胞的影响

目的为了对比研究不同种抗生素对小鼠生精细胞数量、活性和凋亡率的影响。方法用林可霉素(4.989 m L/kg)、阿莫西林(62.5 mg/kg)、头孢克肟(4740.8 mg/kg)、氧氟沙星(1175.55 mg/kg)4种不同种抗生素,作用于60日龄小鼠,取睾丸做石蜡切片、HE染色;用血球计数板细胞计数法进行精子数量计算,用TUNEL法检测细胞凋亡的变化,并进行统计学分析。结果阿莫西林、头孢曲松、氧氟沙星这3种抗生素对小鼠生精细胞数量、活性和凋亡率影响较对照组而言差异无显著性,而林可霉素对小鼠生精细胞数量减少、活性减低和凋亡率增加的影响较对照组差异有统计学意义(P0.05)。结论发现4种抗生素中林可霉素对小鼠生精细胞数量、活性和凋亡率有影响。     

甲状腺乳头状癌中SKA3蛋白的表达及其与预后、免疫细胞浸润的关系

目的探讨SKA3在甲状腺乳头状癌中的表达及其与预后、免疫细胞浸润的关系。方法采用免疫组化SP法检测SKA3蛋白在21例甲状腺乳头状癌组织和16例正常组织中的表达。应用癌症基因组图谱和基因芯片公共数据库分析SKA3 mRNA在565例癌组织和111例正常组织中的表达及与临床病理特征的关系。生物信息学分析SKA3的生物学功能及与免疫细胞浸润的关系。结果SKA3蛋白和mRNA在癌组织中均表达上调。SKA3与甲状腺乳头状癌病理N分期、无瘤生存期和无进展生存期等有关。SKA3与B细胞、CD8+T细胞、CD4+T细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和树突状细胞的浸润水平呈正相关。结论SKA3在甲状腺乳头状癌组织中表达上调,与患者预后和肿瘤的免疫细胞浸润相关。     

SKA3在食管鳞状细胞癌中表达及其与临床病理参数的关系

目的 探讨纺锤体与着丝粒相关蛋白3(SKA3)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达意义及其与临床病理参数的相关性。方法 采用免疫组织化学染色法检测SKA3蛋白在75例食管鳞状细胞癌组织和20例正常食管组织中的表达,并分析其与临床病理特征的关系。应用癌症基因组图谱和基因芯片公共数据库分析SKA3 mRNA在203例食管鳞状细胞癌和102例正常对照中的表达。GEPIA在线工具分析SKA3与细胞周期调控基因的关系。Linkedomics及DAVID在线网站数据评价SKA3基因的共表达基因及其富集通路。结果 在食管鳞状细胞癌组织中,SKA3 mRNA和蛋白的表达水平均高于正常食管上皮组织(P<0.05)。SKA3高表达与食管鳞状细胞癌患者肿瘤分化程度、临床分期及肿瘤神经侵犯密切相关(P<0.05)。SKA3与细胞周期调控基因CCND1、CDK1及CDK4的表达水平呈正相关(P<0.001)。结论 在mRNA和蛋白水平上,SKA3在食管鳞状细胞癌中均高表达。SKA3高表达可能与食管鳞状细胞癌发生发展密切相关,其可能通过调控细胞周期进程而促进食管鳞状细胞癌的进展。