假单胞菌胆固醇酯酶的生产Ⅰ.菌种筛选和发酵条件的研究

通过平板初筛和摇瓶复筛,从371株菌中筛得一株有工业生产价值的胆固醇酯酶产生菌,并对它进行了发酵条件的研究。用所获得的胆固醇酯酶配制的三酶试剂具有良好的稳定性,适用于临床检测。     

β-果糖基转移酶的性质研究

目的研究低聚果糖产生菌黑曲霉 (Aspergillusniger)SIPI 6 0 2来源的 β 果糖基转移酶 (β FT)的性质。 方法经典的酶学研究方法。结果 β FT催化蔗糖转化成蔗果三糖的Km和Vmax分别为 2 6 8.37g L和 2 .37g (min·L) ;将蔗果三糖转化成蔗果四糖的Km和Vmax分别为 173.0 8g L和 0 .10g (min·L)。葡萄糖是 β FT的竞争性抑制剂 ,其Ki=2 4 5 .2 3g L。β FT反应的最适pH为 4 .5～ 6 .0 ,最适温度为 5 5℃。β FT在中性条件、5 0℃以下稳定性良好。β FT转化蔗糖生成低聚果糖的反应进程实验表明 ,高浓度的底物有利于提高反应速度和转化率 ,并且产物中果糖浓度较低浓度底物中低。结论黑曲霉SIPI 6 0 2来源的 β FT适合用于工业化生产低聚果糖     

固定化黑曲霉细胞与固定化葡萄糖异构酶生产高含量低聚果糖

目的 :研究固定化黑曲霉细胞与葡萄糖异构酶协同反应生产高含量低聚果糖的优化条件。方法 :以磷酸化的PVA 海藻酸钙为载体包埋黑曲霉细胞 ,与固定化的葡萄糖异构酶协同反应 ,以蔗糖为原料转化生产低聚果糖。结果 :7.5 %PVA ,1.0 %海藻酸钠包埋 10 %黑曲霉细胞 ,在 pH 6 .7的饱和硼酸 0 .75 %BaCl2 中成型 ,于 0 .7mol/LNaH2 PO4 中强化 1h。与固定化的葡萄糖异构酶一同在 5 0℃ ,pH 7.0条件下与 40 %蔗糖溶液反应 3.5h。重复反应 5批 ,平均转化率为 5 7%。结论 :用优化条件制得的固定化细胞与葡萄糖异构酶协同转化生产低聚果糖 ,重复利用性好 ,且转化率高于单独使用黑曲霉     

磷酸喹哌对大鼠实验性矽肺治疗效果的研究

1973年初,我们在药物广筛中发现一种长效抗疟药磷酸喹哌(代号抗矽—14)对大鼠实验性矽肺具有治疗效果。继后,我们又对磷酸喹哌的给药途径、用药剂量、预防和早期给药、病后早、晚期治疗、停药观察,以及若干生化     

微生物超氧化物歧化酶的分离纯化及其理化性质研究

本文报道了微生物酵母ＳＩＰＩ－２１５ｙ所产生的超氧化物歧化酶的分离纯化及其理性质的研究，酵母ＳＩＰＩ－２１５ｙ经破壁，提取，透析，超滤及ＤＥＡＥ－５２柱分离纯化所得ＳＯＤ为铜／锌－ＳＯＤ，分子量４６０００ｄ，由两个相同亚基组成，微生物ＳＯＤ对热及ＰＨ相当稳定，在６０～６５℃以下及ｐＨ５～１０的范围内，可保持大部分酶活力，与牛血ＳＯＤ及其它铜，锌－ＳＯＤ的性质相同，可作为食品及化妆品添加剂应用。     

β-果糖基转移酶和β-呋喃果糖苷酶的分离纯化

用球磨机Dyno-Mill破碎低聚果糖产生菌黑曲霉（Aspergillus niger)SIPI-602的菌丝体，其离心上清液经硫酸铵分级沉淀，Octyl-Sepharose CL-4B疏水层析，Q－Sepharose Fast Flow阴离子交换层析，Sephacryl S-30凝胶过滤等步骤得到了在SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳上均呈单带的两种酶：β－果糖基转移酶与β－呋喃果糖苷酶。前者可将蔗糖转化低聚果糖，而后者则催化蔗糖和低聚果糖的水解反应。用SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳测得两者的分子量分别为98.86kD和84.92kD。     

β-呋喃果糖苷酶的性质研究

研究了低聚果糖产生菌黑曲霉 (Aspergillus niger) SIPI-60 2的β-呋喃果糖苷酶 (1)的性质。 1水解蔗糖的 Km和 Vm ax分别为 0 .0 2 5 mol/ L和 1.3 9mmol· L-1 · min-1 。果糖是 1的竞争性抑制剂 ,Ki=10 .0 5 mmol/ L。通过对菌丝体、β-果糖基转移酶 (2 )与 1的混合物及纯的 2转化蔗糖的反应进程的比较 ,考察了 1对 2反应进程的影响。结果表明 ,1对低聚果糖生成速率和最终产率均有影响。结果还提示在用菌丝体转化蔗糖过程中低聚果糖可能会诱导出更多的 1     

假单胞菌胆固醇酯酶的生产工艺Ⅱ 提取、纯化和酶学性质的研究

用疏水离子层析技术从假单胞菌菌株的细胞提取液中分离胆固醇酯酶,提纯效果好,可革除脱盐工序。与国外报道的同菌属来源的胆固醇酯酶的酶学性质进行了比较。