夫精宫腔内人工授精周期数与妊娠率的相关性分析

目的分析夫精宫腔内人工授精(IUI)治疗周期数与临床结局的相互关系。方法回顾性分析2196个IUI周期的病例资料,比较治疗周期次数与临床妊娠率的关系。结果 1625例患者行2196个IUI周期,有329例获临床妊娠,周期妊娠率为15%,夫妇累积妊娠率为20.2%。第1、第2、第3、第4周期组的临床妊娠率分别为15.2%、14.9%、12.9%、0.0%,各组间比较差异无统计学意义(P>0.05);1、2、3、4个周期组的周期临床妊娠率分别为19.7%、10.1%、8.9%、6.3%,累积妊娠率分别为19.7%、20.2%、26.7%、25.0%。两两比较分析显示1个周期组与2个周期组及3个周期组的周期临床妊娠率差异均有统计学意义(P<0.01),但其他组间比较差异无统计学意义(P>0.05);各组间累积妊娠率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IUI治疗中适当增加助孕周期数可以增加累积临床妊娠率。     

SD大白鼠骨髓多能间质干细胞QY1细胞系的生物稳定性分析

目的:探索建立Sprague-Dawley大白鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)系体外长期培养的适宜条件及其生物学特性,并分析其稳定性,为进一步研究MSCs的诱导分化和应用提供理想的细胞模型。方法:应用细胞生物学、干细胞组织工程学等方法培养并纯化骨髓MSCs,检测细胞生长的形态、换液时间、生长曲线、倍增时间、贴壁率、染色体、培养条件和反复冻存后复苏对其生物学特性的影响。结果:多次传代后的细胞呈均一的成纤维细胞样;骨髓MSCs原代培养10~12d时融合至80%~90%,不同的首次换液时间之间差异没有统计学意义(P>0.05);P1,P3,P10,P20代细胞生长曲线基本相同,细胞的倍增时间P1为34.2h;P3为33.9h;P10为31.8h;P20为30.6h。4代细胞任意两代之间的细胞数差异没有统计学意义(P>0.05);传代后细胞迅速贴壁,约89%的细胞贴壁主要发生在接种后10h内。4代细胞任意两代之间的贴壁率差异没有统计学意义(P>0.05);在浓度为20%的标准胎牛血清中,骨髓MSCs的增殖活性最高;在种植细胞密度为8×104/mL时,骨髓MSCs的增殖活性最高;吉姆萨染色显示P8代骨髓MSCs胞浆为淡紫红色,胞核为深蓝色,细胞内可见1~2个核仁;P8和P20代细胞染色体形态及数目均正常,染色体核型组成均为42,XY,符合大鼠正常二倍体细胞系特征;反复冻存后复苏骨髓MSCs,其活细胞数>85%。至今已体外培养10个多月。结论:QY1细胞系是纯的、可长期传代的细胞系,可扩增并保持未分化状态,且其生物学性能稳定。     

人卵子冷冻保存的研究进展

人卵冷冻保存技术在当前人类生殖工程方面具有重要的意义。本文综述了人卵冷冻保存的研究意义、影响因素、潜在危害及研究进展等情况 ,期望建立更完善的人卵冷冻保存方法     

1,6-二磷酸果糖对冻融移植小鼠卵巢组织的影响

目的:在冷冻液中增加能量底物1,6二磷酸果糖(Fructose-1,6-bisphosphate,FDP),观察FDP是否对冻存卵巢有保护作用.将9～12周龄小鼠的卵巢取出,在含(FDP组)或不含FDP(LN2V组)的冷冻液中平衡后快速深低温冻存,解冻后行自体双肾被膜下移植,观察动情周期、移植21 d后取移植物固定行H...     

两种胚胎冻融方法对累积妊娠率的影响

目的比较玻璃化法和程序法对人第3天卵裂期胚胎冻融移植周期累积妊娠率的影响。方法选取程序化冻融周期92例、玻璃化法冻融周期179例,比较分析这两种冻融方法在存活率、累积临床妊娠率等方面的效果。结果玻璃化法在胚胎复苏存活率(94.3%vs53.9%,P<0.01)、复苏完整胚胎形态(89.4%vs36.3%,P<0.01)、累积临床妊娠率(28.2%vs43%,0.010.05)。结论与程序化法比较,玻璃化法可以提高累积妊娠率,是一种高效胚胎冻融方法 。     

玻璃化冻融人卵裂期胚胎移植结局的影响因素分析

目的:探讨玻璃化冻融人第3天卵裂期胚胎移植结局的影响因素。方法:回顾分析977例1301个冻融胚胎移植周期,根据患者年龄、新鲜周期结局、移植胚胎质量等因素分组,比较各分组的胚胎植入率、临床妊娠率。结果:复苏3598个胚胎,存活3462个。周期临床妊娠率24.1%,出生婴儿291个。新鲜周期结局、移植胚胎质量组间胚胎着床率、临床妊娠率的差异有统计学意义(P<0.01)。子宫内膜准备方案、胚胎的复苏程度组间差异无统计学意义(P>0.05)。不同年龄组相同不孕年限亚组间的胚胎着床率、临床妊娠率的差异有统计学意义(P<0.05)。移植日子宫内膜厚度>12.0mm组与其他两组相比,胚胎着床率、临床妊娠率较高(P<0.05);不同FET次数组间,1次组的胚胎着床率、临床妊娠率明显高于其他两组(P<0.01)。非条件逐步logistic回归分析表明年龄(P<0.01,OR=0.43)、FET次数(2次组P<0.01,OR=0.30;3次组P<0.01,OR=0.19)、新鲜周期结局(P<0.01,OR=9.01)、移植胚胎质量(P<0.01,OR=3.52)与移植结局相关。结论:年龄、新鲜周期结局、移植胚胎质量等是影响冻融胚胎移植结局的重要因素。     

卵黄囊干细胞向粒-单系造血祖细胞的定向诱导分化

目的：观察卵黄囊干细胞向粒-单系造血祖细胞（CFU-GM）的定向诱导分化,稳定和优化检测卵黄囊CFU-GM的方法。方法：应用体外琼脂培养法,观察多种因素对小鼠卵黄囊干细胞形成粒-单系造血祖细胞集落形成单位的影响;应用染色压片法对所生成的集落性质作鉴定。结果：植入不同数量的E7.5~8.5 d的卵黄囊干细胞与CFU-GM生成数量之间呈高度正相关;在接种相同数量的卵黄囊细胞数的情况下,DMEM培养体系生成的CFU-GM数明显多于IMDM培养体系生成的集落数（P<0.01）;马血清（HS）组优于胎牛血清（FBS）组（P<0.01）;与GM-CSF相比,WEHI-3条件培养液（W3-CM）能明显促进卵黄囊CFU-GM的生成（P<0.01）。采用完整琼脂凝块压片法对卵黄囊细胞所形成的集落进行鉴定表明为粒-单系细胞集落。结论：卵黄囊干细胞具有向CFU-GM分化的能力;卵黄囊干细胞CFU-GM诱导体系中各组分变化均可影响CFU-GM的集落生成率;以DMEM,GM-CSF或W3-CM,HS为组分的体系可稳定地检测卵黄囊细胞CFU-GM的集落生成率。     

简便绒毛细胞培养法制备染色体

目的探讨一种简便的绒毛细胞培养方法以及绒毛和胚芽染色体核型一致性分析。方法将33例标本(包括17例胚胎停育组和16例正常对照组)分别用胰蛋白酶法、胰蛋白酶加机械研磨法制备细胞悬液,培养后制备染色体,比较这两种消化方法在培养周期、核分裂相数等方面的差异;比较16例对照组标本在培养周期、分裂指数等方面的差异;将20例标本分别行绒毛、孕囊壁、胚芽染色体核型分析,比较三者染色体核型是否一致。结果 33例标本中有1例培养失败,培养成功率97%,16例胚胎停育组中检出异常核型7例。两种消化方法在绒毛细胞培养周期上具有显著相关性,但与核分裂相的数目无相关性。16例对照组中,与其他胎龄组相比,12周胎龄绒毛组织原代培养周期最长,有显著差异;二次传代周期和平均分裂指数均明显优于与原代。20例标本中有1例绒毛和胚芽染色体核型不一致。结论应用胰酶消化加机械研磨法制备绒毛细胞悬液,培养后制备染色体,方法简单高效;第二次传代培养有助于提高培养成功率并节约核型分析时间;对于同一标本,绒毛和胚芽染色体核型可能不完全一致。     

宫腔内供精人工授精结局影响因素分析

目的探讨多种因素对宫腔内供精人工授精(AID-IUI)治疗结局的影响。方法回顾性分析在本中心实施的345个AID-IUI治疗周期,对AID-IUI成功率与女方年龄、治疗周期数等因素的关系进行χ2检验及非条件逐步Logistic回归分析。结果 345个AID-IUI周期,周期临床妊娠率为24.1%。χ2检验显示年龄、不孕年限等因素对AID-IUI结局的影响无统计学意义(P>0.05);Logistic回归分析显示助孕周期次数是影响AID-IUI周期临床妊娠率的危险因素(P<0.01),2次组和≥3次组的OR值分别为6.78[95%CI(2.75～16.71)]及2.87[95%CI(1.12～7.36)]。结论助孕周期次数是影响AID-IUI周期临床妊娠率的重要因素。