HNF4α真核表达载体的构建及其在人脐带间充质干细胞中的表达

目的:构建pcDNA3.1/HNF4α重组质粒,转染人脐带间充质干细胞 (human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUMSCs),并检测其在HUMSCs中的表达?方法:采用基因重组技术构建载体pcDNA3.1/HNF4α,经酶切和DNA测序鉴定,通过脂质体法转染HUMSCs后,进行RT-PCR和Western blot分析,免疫荧光检测转染后1周肝特异性生化指标?结果:成功构建真核表达质粒pcDNA3.1/HNF4α,转染人脐带间充质干细胞后,RT-PCR示转染后HNF4α mRNA表达,Western blot分析见HNF4α蛋白表达,免疫荧光示转染1周后HNF4α促进了HUMSCs向肝细胞方向分化?结论:成功构建真核表达载体,并在HUMSCs中正确表达,为进一步研究HNF4α在干细胞向肝细胞分化中作用提供了实验基础?     

体外定向诱导人脐带间充质干细胞分化为胰岛样细胞

背景：人脐带间充质干细胞具有获取容易、免疫原性低等优点,目前尚缺乏体外诱导其分化为胰岛样细胞的成熟方案。 目的：探讨人脐带间充质干细胞在体外一定条件下分化为胰岛样细胞的可能性。 方法：无菌条件下分离培养人脐带间充质干细胞,细胞传3代后,采用两步法诱导其向胰岛样细胞分化：第1步,加入含100 μg/L β-神经生长因子,4 nmol/L ActivinA,10 mmol/L 尼克酰胺,25 μg/L表皮生长因子,体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中培养7 d;第2步,将诱导液换为含10 mmol/L尼克酰胺,10 μg/L碱性成纤维细胞生长因子,1%胰岛素-转铁蛋白-硒的DMEM/F12培养基,诱导时间为14 d。对照组单纯加入DMEM/F12培养基进行培养。 结果与结论：诱导2周后脐带间充质干细胞开始聚集成团,诱导3周后,葡萄糖刺激试验阳性、PDX-1和Insulin基因表达。而对照组细胞无胰岛素分泌,胰岛细胞相关基因表达阴性。实验成功地将脐带间充质干细胞诱导成了胰岛样细胞。     

机器人与腹腔镜胰十二指肠切除术近期疗效的荟萃分析

目的:通过荟萃分析系统评价机器人胰十二指肠切除(RPD)与腹腔镜胰十二指肠切除(LPD)治疗壶腹部及其周围肿瘤的近期疗效。方法:分别在Pubmed、Embase、Cochrane Library及Sinomed英文数据库中进行检索,检索词为"pancreaticoduodenectomy"、"duodenopanrea...     

体外定向诱导人脐带间充质干细胞分化为胰岛样细胞

背景：人脐带间充质干细胞具有获取容易、免疫原性低等优点,目前尚缺乏体外诱导其分化为胰岛样细胞的成熟方案。目的：探讨人脐带间充质干细胞在体外一定条件下分化为胰岛样细胞的可能性。方法：无菌条件下分离培养人脐带间充质干细胞,细胞传3代后,采用两步法诱导其向胰岛样细胞分化：第1步,加入含100pg／L13-神经生长因子,4nmol／LActivinA,10mmol/L尼克酰胺,25pg／L表皮生长因子,体积分数为10％胎牛血清的DMEM／F12培养基中培养7d;第2步,将诱导液换为含10mmoI／L尼克酰胺,10pg／L碱性成纤维细胞生长因子,1％胰岛素一转铁蛋白一硒的DMEM／F12培养基,诱导时间为14d。对照组单纯加入DMEM／F12培养基进行培养。结果与结论：诱导2周后脐带间充质干细胞开始聚集成团,诱导3周后,葡萄糖刺激试验阳性、PDX-1和Insulin基因表达。而对照组细胞无胰岛素分泌,胰岛细胞相关基因表达阴性。实验成功地将脐带间充质干细胞诱导成了胰岛样细胞。     

腹腔镜下不保留胆囊管的胆囊切除联合胆管 微切开取石一期缝合术

目的:探讨腹腔镜下不保留胆囊管的胆囊切除联合胆管微切开胆道镜取石胆管一期缝合术的临床应用价值。方法:回顾分析2015年4月至2017年9月为32例因胆囊结石合并胆总管结石患者行腹腔镜下不保留胆囊管的胆囊切除联合胆管微切开胆道镜取石一期缝合术的临床资料。术前均行彩超、MRI/MRCP检查,证实同时存在胆总管结石、胆囊结石。观察手术时间、术中出血量、术后住院时间、术后并发症等指标。结果:32例均成功完成腹腔镜手术。手术时间70～135 min,平均(85.4±13.7)min;术中出血量50～130 mL,平均(80.2±23.1)mL。术后住院2～6 d,平均(3.5±1.3)d;术后无出血、胆漏、黄疸、发热、胆道狭窄、胆管结石复发、胆囊切除术后综合征等并发症发生。结论:选择合适的胆总管结石病例,采用腹腔镜下不保留胆囊管的胆囊切除联合胆管微切开胆道镜探查取石胆管一期缝合术安全可靠,值得推广。     

机器人与腹腔镜肝切除术近期疗效的Meta分析

目的:通过Meta分析系统评价机器人肝切除术(RH)与腹腔镜肝切除术(LH)治疗肝脏良恶性病变的近期疗效。方法:系统性检索万方数据库、维普、中国知网、PubMed、Embase、Cochrane Library中相关文献。检索时间为建库至2022年7月。中文检索词为“机器人”“腹腔镜”“肝切除术”,英文检索词为“robotic”“laparoscope”“hepatectomy”“liver resection”。比较RH组与LH组手术时间、中转开腹率、术中出血量、输血率、R0切除率、最大肿瘤长径、住院时间、术后并发症等指标。采用Review Manager 5.3软件进行Meta分析。结果:最终纳入34篇文献、5 299例患者，其中RH组1 806例，LH组3 493例。结果显示，与LH组相比，RH组手术时间较长(MD=33.22,95%CI:19.70～46.74,P<0.001),最大肿瘤长径(MD=0.34,95%CI:0.16～0.52,P<0.001)较大，而中转开腹率(OR=0.42,95%CI:0.33～0.55,P<0.001)、总并发症发生率(OR...     

加速康复外科理念在腹腔镜巨脾切除联合贲门周围血管离断术围手术期的应用

目的 探讨加速康复外科理念（enhanced recovery after surgery,ERAS）在肝硬化门静脉高压症患者行腹腔镜巨脾切除联合贲门周围血管离断术围手术期应用的效果和意义。方法 回顾性分析2016年1月至2019年1月南京医科大学附属淮安第一医院收治的肝硬化门静脉高压症行腹腔镜巨脾切除联合贲门周围血管离断术患者共60例的临床资料。病例分为两组：ERAS组（n=32）,采用加速康复外科理念进行围手术期相关处理;对照组（n=28）,采用传统围手术期处理办法。比较两组患者术中情况、术后并发症发生率及住院时间、住院费用等指标。结果 与对照组相比,ERAS组在术中出血、手术时间、中转开腹比例、住院费用以及术后并发症发生率上差异无统计学意义（P＞0.05）,但是ERAS组患者术后疼痛评分更低、术后住院时间更短（P＜0.001）。结论 腹腔镜巨脾切除联合贲门周围血管离断术的围手术期采用加速康复理念安全有效,能够提高患者舒适性,缩短住院时间,降低住院费用,值得应用推广。     

加速康复外科理念在老年患者行脾切除联合贲门周围血管离断术中的应用

目的 探讨加速康复外科(ERAS)在老年门静脉高压患者行脾切除联合贲门周围血管离断术围手术期应用的效果和意义。方法 回顾性分析2015年8月至2019年8月在南京医科大学附属淮安第一医院因肝硬化门静脉高压行脾切除联合贲门周围血管离断术患者的临床资料,挑选出年龄>65岁的老年患者共62例。其中有32例患者采用加速康复理念进行围手术期相关处理,作为加速康复组;另30例患者采用传统围手术期处理,作为传统组。比较两组患者术中情况、术后并发症发生率、住院时间、住院费用等指标。结果 加速康复组与传统组相比,术中出血量、手术时间、心血管事件、感染、出血、肝功能不全、门静脉血栓的发生率、术后死亡率及30 d再入院率比较差异无统计学意义(P>0.05)。ERAS组患者电解质紊乱发生率、住院费用、术后住院时间以及术后疼痛评分优于传统组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 加速康复理念应用于脾切除联合贲门周围血管离断的老年门静脉高压患者的围手术期能够降低手术风险,缩短住院时间,减少住院费用。     

间充质干细胞体外分化为胰岛β细胞的影响因素的研究进展

间充质干细胞(MSC)来源于发育早期的中胚层和外胚层。MSC与胚胎干细胞相比,具有免疫调节优势,并且没有伦理学和免疫排斥问题,也不会导致肿瘤产生。MSC在体外特定的条件下可以分化为脂肪、骨、软骨、肌肉、神经、肝脏、心肌等多种组织,同样它也可以成为胰岛β细胞理想的来源。MSC体外分化为胰岛β细胞受到多种因素的影响,包括细胞间接触、葡萄糖浓度、pH、细胞因子、基因等。