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人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,Her2)是表皮生长因子受体家族成员之一,在乳腺癌等多种人类肿瘤中过表达,是肿瘤治疗的重要靶点,也是肿瘤诊断和预后检测的重要指标。此文阐述了Her2的结构特征、Her2与肿瘤发生发展的关系、抗Her2单克隆抗体在肿瘤治疗中的应用以及针对Her2靶点的其他治疗策略。 相似文献
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目的 构建胃泌素多肽G17-白喉毒素A亚单位(diphtheria toxin subunit A,DTA)嵌合蛋白,并初步研究其免疫原性。方法 用酶切法将编码G17的基因与DTA基因连接后,插入载体pET11C,并在大肠埃希菌BL21中表达。先后用阴离子交换色谱法和分子排阻色谱法对表达的目的蛋白进行纯化。用纯化的G17-DTA免疫NIH小鼠,并用ELISA检测小鼠抗G17抗体。结果 构建的G17-DTA嵌合蛋白可在大肠埃希菌中高效表达,表达量达0.5~0.6 mg/ml菌液。经2次纯化后,G17-DTA的纯度可达95%。纯化的G17-DTA在小鼠中诱生了抗G17抗体。结论 构建的G17-DTA嵌合蛋白能在大肠埃希菌中表达,而且在小鼠中具有免疫原性。 相似文献
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目的 应用液相色谱-质谱法(liquid chromatography-mass spectromety,LC/MS)和液相色谱-非数据依赖二级质谱数据采集技术(liquid chromatography-data independent acquisition mass spectromety,LC/MSE)对利妥昔单抗及其类似药进行结构表征和相似性研究.方法 用LC/MS对利妥昔单抗及其类似药的完整蛋白及轻链和重链的相对分子质量进行测定;用基于LC/MSE的肽图分析确定利妥昔单抗及其类似药的氨基酸全序列;用LC/荧光检测法分析利妥昔单抗的糖基化修饰结构及相对含量.结果 LC/MS可准确测定利妥昔单抗的相对分子质量.基于LC/MSE的肽图分析显示,利妥昔单抗的氨基酸序列覆盖率>99%.LC/荧光检测法对利妥昔单抗的糖谱分析具有较好的重复性.利妥昔单抗类似药与原研药的相对分子质量和糖型信息相符、氨基酸序列完全一致、糖谱相似.结论 LC/MS和LC/MSE可用于利妥昔单抗及其类似药的结构表征和相似性比较,这为今后其他单克隆抗体结构表征平台的建立提供了依据. 相似文献
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重组人IL-24的表达及其体外抗肿瘤细胞活性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 构建重组人白细胞介素24(recombinant human interleukin 24,rhIL-24)表达载体并在大肠杆菌中表达,体外评估rhIL-24的生物学活性.方法 用基因工程方法构建rhIL-24表达载体并在大肠杆菌巾表达rhIL-24.表达的重组蛋白经层析法纯化后,分别用噻唑蓝比色法和蛋白印迹法检测rhIL-24对肿瘤细胞生长的影响和对内源性IL-24的诱导,用实时PCR检测不同肿瘤细胞与rhIL-24共孵育后细胞内的胱天蛋白酶3(caspase 3)mRNA变化.结果 rhIL-24能在大肠杆菌中高效表达,并能明显抑制多种肿瘤细胞生长.rhIL-24能诱导正常MRC.5细胞和多种肿瘤细胞产生内源性IL-24,并能改变肿瘤细胞的胱天蛋白酶3水平.结论 rhIL-24能在大肠杆菌中高效表达,且具有生物学活性. 相似文献
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葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78 kD,GRP78),属于热休克蛋白70家族中的一员,在正常细胞中低/不表达,而在多种恶性肿瘤细胞(肺癌、乳腺癌、结直肠癌、头颈癌、肝癌等)中呈高表达,提示GRP78与肿瘤的发生和发展密切相关,这在肿瘤治疗方面存在潜在的应用价值。此文对GRP78结构、GRP78与肿瘤发生发展的关系、基于GRP78的靶向治疗等方面进行了探讨。 相似文献
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目的 观察NY-ESO-1/热休克蛋白65(heat shock protein 65,HSP65)融合蛋白(NY-H)免疫BALB/c小鼠诱导的体液和细胞免疫应答及其抗肿瘤作用。 方法 将BALB/c小鼠按简单随机方法分组,分别用 NY-H、NY-ESO-1与HSP65混合(NY+H)、NY-ESO-1、HSP65和PBS腹腔免疫4次,间隔2周。每次免疫后第14天,对小鼠尾静脉采血,检测血清抗体滴度。末次免疫后第7天,取小鼠脾细胞,检测细胞因子、淋巴细胞增殖水平、CD4+和CD8+ T细胞的百分比及对肿瘤细胞的特异性杀伤作用,采用t检验或2检验对结果进行比较。结果 NY-H组小鼠在第1次免疫后就产生了较高水平的抗体(吸光度值为0.841±0.059),与NY+H组(0.333±0.077)和NY-ESO-1组(0.275±0.183)相比差异有统计学意义(t=12.753,P<0.01;t=7.204,P<0.01)。NY-H组小鼠的IL-2和IFN-γ分泌能力均高于其他各组,并且CD4+、CD8+ T细胞数量大幅增高,细胞增殖率(38.00%±3.84%)明显高于NY+H组(12.90%±0.65%)和NY-ESO-1组(10.90%±1.44%)(x=830.1,P<0.01;x2=994.0,P<0.01)。小鼠免疫NY-H后,脾淋巴细胞能特异性杀伤表达NY-ESO-1的小鼠B16肿瘤细胞。 结论 NY-H能诱导小鼠产生较强的体液和细胞免疫应答,且具有良好的抗肿瘤作用。 相似文献
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目的 利用基因重组抗原免疫小鼠,制备抗人IgE单克隆抗体,研究其特异性和功能.方法 用表达的重组人IgE-Fc免疫BLAB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0细胞融合,以间接ELISA法筛选杂交瘤上清.用ELISA阻断分析鉴定其生物学功能;通过丙氨酸突变扫描分析确定其抗原表位.结果 利用杂交瘤技术获得了1株抗人IgE的单克隆抗体178,它具有IgE抗体特异性反应,其识别的抗原表位位于IgE与其受体结合的关键部位.经鉴定其具有体外阻断IgE与其受体结合的活性.结论 利用基因重组抗原制备了1株抗人IgE的单克隆抗体178,此单克隆抗体具有体外阻断IgE与其受体结合的生物活性. 相似文献
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人表皮生长因子受体3 (human epidermal growth factor receptor 3,HER3) 是I型跨膜酪氨酸激酶受体,在多种肿瘤中表达上调。此文就HER3的结构特征、HER3与肿瘤的关系以及抗HER3抗体的抗肿瘤作用进行简要综述。 相似文献