膝骨关节炎脂肪垫对关节软骨细胞的影响

目的:观察人膝骨关节炎(OA)脂肪垫对正常及OA关节软骨细胞的影响。方法:24例人膝脂肪垫和膝关节软骨均由骨科手术室提供,12例为膝关节急性外伤手术患者,12例为膝OA患者行关节置换术后。切取正常及OA膝脂肪垫行苏木精-伊红染色(HE)及瘦素免疫组织化学染色;用OA膝脂肪垫制作脂肪垫培养液(FCM);于急性膝外伤手术标本的表面完整处提取正常软骨细胞,于膝OA关节置换术标本提取OA软骨细胞,分别进行体外培养并鉴定,随机分成正常组、OA组、正常+FCM组及OA+FCM组,其中正常组和OA组均加入完全高糖培养基,正常+FCM组和OA+FCM组均加入FCM,对各组细胞进行形态学观察,于第14天将各组软骨细胞予Ⅱ型胶原(COL2)免疫组化染色及油红O染色,同时应用Western blot技术检测各组软骨细胞中COL2、聚蛋白多糖(Acan)和基质金属蛋白酶(MMP-13)的表达情况。结果:(1)COL2免疫组化染色:OA组软骨细胞内的COL2免疫组化染色平均吸光度比正常组显著降低(P0.05)。与OA组相比,正常+FCM组软骨细胞内的COL2免疫组化染色平均吸光度无明显差异,而OA+FCM组显著降低(P0.05)。与正常+FCM组相比,OA+FCM组软骨细胞内的COL2免疫组化染色平均吸光度显著降低(P0.05)。(2)油红O染色:OA组软骨细胞内的油红O染色平均吸光度与正常组相比差异无统计学意义。与OA组相比,正常+FCM组和OA+FCM组软骨细胞内的油红O染色平均吸光度均有增高(P0.05),但OA+FCM组增高更为显著(P0.05)。(3)Western blot结果:OA组COL2、Acan的表达水平低于正常组(P0.05),而MMP-13的表达高于正常组(P0.05)。与OA组相比,正常+FCM组COL2、Acan和MMP-13的表达水平无明显差异;相较于正常组及正常+FCM组,OA+FCM组COL2、Acan的表达水平降低(P0.05),而MMP-13的表达水平增高(P0.05)。结论:OA膝FCM能使正常及OA软骨细胞形态上发生脂肪样变,并通过代谢途径提高软骨细胞MMP-13的表达,加速软骨细胞COL2、Acan的降解,且对OA软骨细胞的破坏更为显著。     

肌内效贴扎对早期脑卒中患者手功能的影响

目的 观察肌内效贴对早期脑卒中患者手功能的临床疗效。方法 选取60例符合入选标准的早期脑卒中患者,随机分为肌内效贴组(肌内效贴+康复,n=20,脱落2例)、白贴组(白贴+康复,n=20,脱落1例)和空白组(康复,n=20,脱落1例)。分别于治疗前、治疗3周及治疗6周后采用改良Ashworth(MAS)量表、手肿胀程度（手体积）、Fugl Meyer运动功能(FMA)评分上肢部分、简易上肢机能检查(STEF)进行评定。结果 治疗3周及6周后,3组MAS评分差异无统计学意义(P>0.05),肌内效贴组FMA评分、STEF评分及手体积差值均优于白贴组和空白组(P<0.05);肌内效组MAS评分较治疗前有明显改善（P<0.05）。结论 应用肌内效贴扎可改善早期脑卒中患者的患手痉挛、肿胀,从而改善手功能。     

低强度脉冲超声经整合素-FAK-p38 MAPK通路对膝关节脂肪垫共培养下软骨细胞的影响

目的观察低强度脉冲超声(LIPUS)通过整合素-黏着斑激酶(FAK)-p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路对膝关节脂肪垫共培养下软骨细胞的影响。 方法24例女性膝脂肪垫及膝关节软骨均由骨科手术室提供,年龄25～35岁,均为膝关节急性外伤手术患者,排除其他膝关节病史。切取脂肪垫行苏木精-伊红染色(HE);制作脂肪垫培养液(FCM);于表面完好部分提取正常软骨细胞进行体外培养,按随机数字表法分成对照组、模型组（正常软骨细胞+FCM）、治疗组（正常软骨细胞＋FCM＋LIPUS干预）和抑制剂组（正常软骨细胞＋FCM＋LIPUS＋整合素抑制剂GRGDSP干预）。采用Ⅱ型胶原(COL2)免疫细胞化学染色法比较并鉴定对照组与模型组的软骨细胞。治疗组和抑制剂组接受LIPUS辐射,LIPUS辐射强度为40mW/cm2,每次辐射20min,每日1次,每周6d;其余各组接受LIPUS假辐射。第6天收集各组细胞,应用免疫印迹(Western blot)技术检测软骨细胞中Ⅱ型胶原、蛋白多糖(Acan)、基质金属蛋白酶(MMP)-13、整合素β1、磷酸化FAK(p-FAK)、磷酸化p38(p-p38)的蛋白含量。 结果免疫细胞化学染色显示,模型组软骨细胞表达的COL2免疫反应物显著少于对照组。Western blot检测显示,模型组COL2、Acan蛋白含量［(0.16±0.04)、(0.12±0.02)］较对照组［(0.55±0.03)、(0.62±0.03)］降低,MMP-13、整合素β1、p-FAK和p-p38蛋白含量［(0.49±0.04)、(0.34±0.04)、(0.33±0.05)和(0.51±0.04)］较对照组［(0.07±0.02)、(0.13±0.03)、(0.16±0.04)和(0.10±0.03)］增高,且组间差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,治疗组COL2、Acan、整合素β1和p-FAK蛋白含量［(0.42±0.07)、(0.50±0.07)、(0.74±0.06)和(0.64±0.07)］增高,而MMP-13、p-p38蛋白含量［(0.37±0.06)、(0.37±0.08)］下降,差异有统计学意义(P<0.05);而抑制剂组COL2、Acan、MMP-13、整合素β1、p-FAK和p-p38蛋白含量［(0.19±0.04)、(0.09±0.03)、(0.51±0.03)、(0.33±0.02)、(0.30±0.05)和(0.53±0.04)］无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05),但与对照组和治疗组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论LIPUS可通过整合素β1-FAK-p38 MAPK通路抑制脂肪因子诱导的软骨细胞MMP-13增高,减少COL2、Acan降解,从而对膝关节脂肪垫共培养下的软骨细胞起一定的保护作用。     

骨性关节炎的免疫炎性发病机制研究进展

正骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)是一种以关节软骨的损伤、退变以及软骨下骨的硬化、增生、囊变,继而导致关节间隙狭窄为特征的慢性退行性疾病~([1])。近年来越来越多的研究显示免疫学机制参与了OA的发病过程~([2]),OA已不再被视为简单的"磨损和撕裂",而是由蛋白酶介导的慢性炎症反应~([3])。在OA的病理进程中,炎症可促进形成滑膜炎及破坏骨和软骨~([4])。本文将就近年来OA发病过程中的免疫机制研究进展作一综述。     

低强度脉冲超声对兔膝骨性关节炎骨软骨连接血管形成与侵袭的影响

目的观察低强度脉冲超声(LIPUS)对早期兔膝骨性关节炎骨软骨连接血管形成与侵袭的影响。 方法18只新西兰大白兔按随机数字表法分为对照组、模型组和治疗组,每组6只,模型组和治疗组接受前交叉韧带切断法手术,4周后建立早期骨性关节炎疾病模型,而对照组仅接受假手术处理。治疗组接受LIPUS辐射治疗4周,模型组和对照组仅接受LIPUS假辐射。采用番红O 固绿染色比较各组膝关节骨软骨连接血管形成与侵袭情况;采用免疫印迹(Western blot)技术检测各组的整合素β1、磷酸化黏着斑激酶(p FAK)、磷酸化p38、磷酸化c Jun氨基末端激酶(p JNK)、血管内皮生长因子(VEGF)及软骨调节素(CHM) 1蛋白表达水平。 结果模型组和治疗组与对照组比较,骨软骨连接血管形成明显增多,潮线出现漂移、重复,结构紊乱,甚至消失,部分血管突破潮线,侵入非钙化软骨层,而治疗组较模型组病理改变明显减轻。模型组的整合素β1、p FAK和VEGF表达水平［（0.92±0.07）、（0.83±0.09）和（1.02±0.10）］较对照组［（0.45±0.04）、（0.18±0.03）和（0.35±0.02）］明显增高,且组间差异有统计学意义(P<0.05);模型组的p38和JNK磷酸化水平［（0.99±0.11）和（1.86±0.06）］亦较对照组［（0.31±0.04）和（0.38±0.03）］明显增高(P<0.05);而模型组的ChM 1表达（0.61±0.04）较对照组（1.91±0.08）下降,且差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组与模型组比较,治疗组的整合素β1和p FAK表达［（1.10±0.09）和（1.09±0.08）］亦较模型组明显增高,组间差异有统计学意义(P<0.05);但治疗组的VEGF表达（0.58±0.06）较模型组明显降低(P<0.05),治疗组的p38和JNK磷酸化水平［（0.54±0.09）和（1.29±0.08）］亦较模型组降低,且差异有统计学意义(P<0.05);但治疗组的ChM 1表达（1.09±0.12）较模型组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论LIPUS可以抑制骨性关节炎骨软骨连接血管形成与侵袭,其作用机制可能与LIPUS通过整合素β1 FAK p38/JNK VEGF/ChM 1通路调控血管形成相关因子VEGF和ChM 1的表达有关。     

破伤风患者气管切开的临床观察及护理

急性心肌梗死是心脏疾病的危急症之一.基层医院由于缺乏大型介入设备,对急性心肌梗死的治疗仍以药物治疗为主.因此在治疗过程中,护士配合医生做好药物的观察与护理尤显重要.笔者结合我院2006年1月至2009年6月期间的急性心肌梗死67份病历的临床资料,并根据多年在心内科的临床经验,对急性心肌梗死患者住院过程中的用药观察与护理进行了总结,以期提高同级医院对急性心肌梗死的护理水平.