细胞凋亡和有效吞噬在动脉粥样硬化斑块中的作用

细胞凋亡是动脉粥样硬化斑块的重要特征,其利害作用取决于斑块内凋亡细胞的种类和斑块所处阶段。进展期斑块内细胞凋亡可加剧炎性反应,而有效吞噬可抑制斑块进展。多种有效吞噬系统可根据吞噬受体、凋亡配体及桥联分子加以区别。有效吞噬系统障碍可使凋亡细胞无法及时清除,引发继发性坏死,促进斑块坏死核心形成,继而导致斑块不稳定甚至破裂。     

miR-195-3p在同型半胱氨酸诱导的肝氧化应激损伤中的调控作用研究

目的 探讨miR-195-3p在同型半胱氨酸(Hcy)诱导的肝氧化应激损伤中的作用。方法 小鼠分为CBS^+/+组、CBS^+/-组、Lv-miR-195-3p组(CBS^+/-小鼠经尾静脉注射病毒滴度为2×10⁷ TU·mL^-1的miR-195-3p重组慢病毒)、Lv-GFP组(CBS^+/-小鼠经尾静脉注射等体积病毒滴度为1×10⁸ TU·mL^-1的绿色荧光蛋白慢病毒)和PBS组(CBS^+/-小鼠经尾静脉注射等体积磷酸盐缓冲液),每组10只。体外培养人源肝细胞(HL-7702),分为对照组(0μmol·L^-1 Hcy)、Hcy组(100μmol·L^-1 Hcy)、mimic-NC组(转染模拟物对照组)、mimic-NC+Hcy组(转染模拟物对照组+100μmol·L^-1 Hcy)、miR-195-3p-mimic组(转染miR-1...     

枸杞多糖预处理对APAP诱导L02细胞损伤的保护作用

目的 探讨枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)预处理对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导的正常人肝细胞(L02)损伤的保护作用及机制。方法 将体外培养的L02细胞分为正常对照组、模型组(APAP组)、300、600μg·mL^-1LBP+APAP组、300、600μg·mL^-1LBP组,L02细胞经不同浓度的LBP预处理12 h后,300、600μg·mL^-1LBP+APAP组和模型组给予10 mmol·L^-1APAP诱导细胞24 h。CCK-8法检测细胞存活能力,光镜下观察各组细胞形态变化,qRT-PCR检测细胞色素P450 2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1)和HNF4α的mRNA水平,Western blot检测IRE1α、eLF2α、Nrf2、Bax、Bcl-2、Caspase-12的蛋白表达。结果 与正常对照组相比,模型组细胞经APAP诱导后,出现细胞损伤改变,CYP2E1 mRNA水平升高、HNF...     

FoxO1在同型半胱氨酸诱导的肾脏足细胞损伤及凋亡中的作用研究

摘要：目的　探讨叉头状转录因子O1（FoxO1）在同型半胱氨酸（Hcy）诱导的肾脏足细胞损伤及凋亡中的作用。方法　采用高蛋氨酸饮食喂养胱硫醚β-合成酶（Cbs）基因正常Cbs+/+小鼠和单基因敲除Cbs+/-小鼠各10只。8周后处死,收集肾组织,PAS染色观察小鼠肾小球形态学变化。体外培养足细胞,分为Control组和Hcy组（用含80 μmol/L Hcy的细胞培养液干预48 h）。将携带绿色荧光蛋白（GFP）的过表达FoxO1腺病毒（Ad-FoxO1）和干扰FoxO1腺病毒（Sh-FoxO1）转染足细胞,分为对照组、Ad-GFP组、Ad-FoxO1组、Sh-NC组、Sh-FoxO1组、Ad-GFP+Hcy组、Ad-FoxO1+Hcy组、Sh-NC+Hcy组、Sh-FoxO1+Hcy组。Western blot检测小鼠肾组织和足细胞裂隙膜蛋白（Podocin和Nephrin）、FoxO1及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、半胱氨酸蛋白酶12（Caspase12）蛋白表达;qPCR检测小鼠肾组织和足细胞中FoxO1 mRNA的表达。结果　PAS染色结果显示,Cbs+/+组小鼠肾小球结构正常,基底膜清晰且分布均匀,而Cbs+/-组小鼠肾小球基底膜则呈现节段性增厚,系膜基质增多;与Cbs+/+组小鼠比较,Cbs+/-组小鼠肾组织中Podocin、Nephrin和FoxO1蛋白、FoxO1 mRNA的表达明显降低（P＜0.01）。与Control组比较,Hcy组FoxO1 mRNA和蛋白表达显著降低（P＜0.01）;过表达FoxO1后,与Ad-GFP+Hcy组相比,Ad-FoxO1+Hcy组Podocin和Nephrin蛋白表达均明显升高,Bax/Bcl-2比值、Caspase12蛋白表达均明显降低（P＜0.05）;而干扰FoxO1后,与Sh-NC+Hcy组相比,Sh-FoxO1+Hcy组Podocin和Nephrin蛋白表达均明显降低,Bax/Bcl-2比值、Caspase12蛋白表达均明显增高（P＜0.05）。结论　FoxO1可减轻Hcy诱导的小鼠肾脏足细胞损伤及凋亡。     

转录因子EB在衰老心肌细胞自噬中的作用机制研究

目的 探讨转录因子EB(TFEB)在衰老心肌细胞自噬中的作用机制。方法 动物实验：将20只老年Wistar大鼠采取随机数字表法分为假手术组（Sham组）和缺血再灌注组（I/R组）。细胞实验：（1）体外培养大鼠心肌细胞，采用8 g/L D-半乳糖孵育8 d后分为常氧（Normoxia）组和缺氧/复氧（H/R）组。（2）在衰老心肌细胞中分别转染过表达和干扰TFEB腺病毒分为过表达对照（Ad-GFP）组、过表达对照+缺氧/复氧（Ad-GFP+H/R）组、过表达TFEB(AdTFEB)组、过表达TFEB+缺氧/复氧（Ad-TFEB+H/R）组、干扰对照（sh-NC）组、干扰对照+缺氧/复氧（sh-NC+H/R）组、干扰TFEB(sh-TFEB)组、干扰TFEB+缺氧/复氧（sh-TFEB+H/R）组。（3）分别用DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的特异性抑制剂DC-05、TFD、NA处理缺氧/复氧后的衰老心肌细胞分为H/R组、DC-05组、TFD组、NA组。（4）在衰老心肌细胞中转染干扰DNMT3b腺病毒分为干扰对照（sh-NC）组、干扰对照缺氧/复氧（sh-NC+H/R）组、干扰DNMT...     

miR-491-5p对缺氧诱导的滋养细胞凋亡的促进作用及其机制

目的 探讨microRNA-491-5p(miR-491-5p)在缺氧诱导的滋养细胞凋亡中的作用及其对子痫前期的影响。方法 选取人绒毛膜滋养层细胞，分为4组：对照组、缺氧组、缺氧+miR-491-5p mimic组和缺氧+miR-491-5p inhibit组。采用细胞活力染色检测滋养细胞凋亡情况，qRT-PCR检测miR-491-5p的表达，TargetScan数据库预测miR-491-5p的靶基因，双荧光素酶报告基因实验验证miR-149-5p与B-细胞淋巴瘤因子2样蛋白2基因(BCL2L2)的靶向关系。miR-491-5pmimic和inhibitor分别转染滋养细胞后，qRT-PCR检测miR-491-5p的表达，Westernblotting检测BCL2L2蛋白的表达改变，细胞活力染色、Western blotting、流式细胞术检测滋养细胞凋亡情况。结果 与对照组比较，缺氧组滋养细胞凋亡率明显增高(P<0.001),miR-491-5p表达明显增高(2.784±0.214 vs. 1.000±0.000,P<0.01)；生物信息学预测与双荧光素酶检测报告实验显示...