清肝解郁法对Alzheimer病大鼠海马神经元及前脑ChAT活性的影响

目的:观察清肝解郁法对Alzheimer病(AD)大鼠海马神经元及前脑胆碱能神经的影响.方法:在大鼠AD疾病模型给药(清肝解郁中药)30d后,断头处死大鼠,取全脑;用4％多聚甲醛固定,常规HE染色,观察脑组织结构、细胞的形态和海马CA2、CA3区神经元数量,免疫组化计数大鼠前脑ChAT阳性神经元.结果:中药治疗组大鼠海马CA2、CA3区神经元数量较模型组显著增多,大鼠前脑ChAT阳性神经元也较模型组显著增多.结论:清肝解郁法能促进NSC的分化诱导,能较好地诱导神经系统细胞向胆碱能神经元转化.     

大鼠血管性痴呆模型的制作

目的制作存活时间长且有明显临床症状的大鼠血管性痴呆(Vasculardementia,VD)模型。方法夹闭双侧的颈总动脉5 min后,复灌1 h,连续3次,末次再灌注1 h后永久性结扎双侧的颈总动脉。结果缺血再灌注后结扎双侧颈总动脉方法制作VD模型动物存活率高,海马神经元损伤明显,行为学异常。结论缺血再灌注后结扎方法制作大鼠VD模型成功。     

和血益智方对VD大鼠学习记忆和海马的影响

目的观察和血益智方对VD大鼠行为学和形态学的影响。方法动物随机分为假手术组和模型组。VD模型制作成功后随机分为和血益智方小剂量组和大剂量组、思尔明组、生理盐水(NS)组。用穿梭箱和水迷宫检测大鼠行为学并作海马HE常规染色,光镜观察。结果和血益智方、思尔明均能缩短VD大鼠穿梭箱实验主动逃避时间和遭受电击时间,减少遭受电击次数;能缩短VD大鼠水迷宫实验时定位航行潜伏期、游泳的路径,增加大鼠空间探索实验中穿越原目标的次数。NS组海马细胞体积变大、核变小、有核仁消失和核固缩;除假手术组正常外,其余各组海马细胞层次有减少,但细胞排列比较密集、细胞形态尚可。结论和血益智方可改善VD大鼠的学习记忆能力。     

促进学习正迁移，提高药理学多媒体教学质量

多媒体教学可提高教学效率和效果,已成为当前药理学教学的主要手段,但多媒体的运用不恰当,教学效果将大打折扣。认识学习的迁移规律及重要性,增强教师责任感、激发学生的兴趣,结合传统教学法,运用灵活多样的教学方法,重视学生对基本知识、基本原理的学习,加强学生分析和概括能力的培养,促进学习正迁移,对提高药理多媒体教学质量至关重要。     

板党多糖对溃疡性结肠炎大鼠的防治作用及其分子机制研究

目的:观察板党多糖对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导大鼠溃疡性结肠炎的防治作用并研究其机制。方法:SD大鼠60只,分为6组,每组10只,分别为正常组,模型组,板党多糖低、中、高(0.25,0.50,1.00 g·kg~(-1))剂量组,固肠止泻丸组(1.08 g·kg~(-1))。各组按各剂量ig给药5 d后,以TNBS 60 mg·kg~(-1)灌肠造模,再继续ig给药3周,每天1次。造模后第1,2,3及21天进行疾病活动指数(DAI)评价,末次给药30 min后乙醚麻醉,断头处死大鼠。取大鼠的结肠组织先进行黏膜损伤指数评价(CMDI),然后一半组织进行组织病理学检查及评分,另一半采用实时荧光定量-聚合酶链式反应(q PCR)检测Toll样受体4(TLR4),白细胞介素-6(IL-6),核因子-κB(NF-κB),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-10(IL~(-1)0)的mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠结肠充血水肿,溃疡症状明显,组织病理学检查结果显示炎性细胞浸润较严重,CMDI评价及病理学组织评分明显升高,TLR4,IL-6,NF-κB,TNF-αmRNA表达明显升高,IL~(-1)0 mRNA表达明显降低(P0.01);与模型组比较,板党多糖组大鼠结肠充血水肿,溃疡症状得到改善,组织病理学检查结果显示炎性细胞浸润情况明显改善,CMDI评价及病理学组织评分明显降低,对TLR4,IL-6,NF-κB,TNF-αmRNA表达具有下调作用,对IL~(-1)0 mRNA表达具有上调作用(P0.05,P0.01)。结论:板党多糖对TNBS诱导的大鼠溃疡性结肠炎呈现出良好的预防性治疗作用,其机制可能与调节TLR4,IL-6,NF-κB,TNF-α及IL~(-1)0水平有关。     

基于网络药理学和实验验证探讨石榴皮对非酒精性脂肪性肝炎的作用机制

目的 基于网络药理学和细胞实验验证的方法探讨石榴皮改善非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)作用机制。方法 利用中药系统药理学数据库(TCMSP)进行条件检索,获取石榴皮的活性成分及其对应的作用靶点。利用人类基因数据库(GeneCards)等5个数据库获取NASH相关的靶点。将获得的石榴皮和NASH靶点进行筛选,通过韦恩图得到共同靶点。使用蛋白相互作用数据库(STRING)构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,并用Cytoscape 3.7.1建立“石榴皮-成分-靶点-NASH”网络。利用Metascape软件进行基因本体(gene ontology,GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路分析。最后借助人肝癌细胞HepG2观察石榴皮中主要活性成分对NASH的影响。结果 石榴皮活性成分有7个,获得靶点基因191个,NASH靶点1 818个,两者交集靶点98个,拓扑学分析显示,石榴皮治疗NASH的核心成分为槲皮素、山奈酚和木犀草素,核心靶点为蛋白激酶B (protein kinase B,Akt1)、白细胞介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)等。KEGG通路分析结果显示石榴皮治疗NASH主要涉及磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/Akt、核因子κB (nuclear factor kappa-B,NF-κB)等信号通路。体外细胞试验结果显示,与对照组相比,模型组磷酸化蛋白激酶B (phosphorylated-Akt^Thr308,p-Akt^Thr308)、IL-6等蛋白表达水平升高(P<0.05);与模型组相比,石榴皮活性成分可显著降低p-Akt^Thr308、IL-6等蛋白的表达水平(P<0.05),也能够降低IL-6、TNF-α基因的mRNA表达水平(P<0.05)。结论 石榴皮可通过多成分、多靶点、多通路发挥抗NASH的作用,其机制可能与石榴皮中活性成分槲皮素、山奈酚和木犀草素影响Akt1等核心靶点及调控PI3K/Akt、NF-κB等信号通路,进而抑制相关炎症因子表达有关。     

霉茶蛋白对自发性高血压大鼠(SHR)血压和血管的作用

目的:研究霉茶蛋白连续给药后对自发性高血压大鼠(SHR)血压和血管的作用及机制。方法:将40只雄性SHR随机分为模型组(等容量蒸馏水),复方罗布麻片阳性药组(50 mg·kg~(-1)),霉茶蛋白低、高剂量(70,140 mg·kg~(-1))组。ig容量均为10 m L·kg~(-1)体重,各组每天上午和下午各ig给药1次,连续给药7周。测定给药前大鼠尾动脉血压,并在给药后每周测1次大鼠尾动脉血压。末次给药后取血并取其胸主动脉,检测血清一氧化氮(NO)和内皮素~(-1)(ET~(-1))的含量,实时荧光聚合酸链式反应(Real-time PCR)测定血管内皮型一氧化氮合酶(e NOS),血管紧张素转换酶(ACE),血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),原癌基因(c-Myc),p27,B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)mRNA的表达。结果:与模型组比较,霉茶蛋白低、高剂量组从第2周开始可显著降低SHR的血压值,能够升高血清中NO的含量,降低ET~(-1)的含量,抑制基因c-Myc,Bcl-2,ACE mRNA的表达,促进e NOS mRNA的表达(P0.05,P0.01),但对p27 mRNA无影响。结论:霉茶蛋白对SHR有显著降压作用,对血管有保护作用,其机制可能与改变其血清中NO和ET~(-1)水平,以及与血管基因c-Myc,Bcl-2,ACE,AngⅡ和e NOS的表达有关。     

固相萃取-液相色谱-串联质谱法测定人血浆中莫沙必利的浓度

目的建立液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定人血浆样本中莫沙必利的浓度。方法血浆样本经固相小柱萃取处理后,以甲醇-0.5%甲酸溶液(70:30)为流动相,采用Agilent TC-C18(4.6 mm×150mm,5μm)色谱柱进行分离,流速为0.5 m L·min-1,柱温25℃;采用ESI正离子模式检测,离子监测方式为MRM,用于定量分析的离子反应分别为m/z 422.1→m/z 198(莫沙必利)和m/z 466.1→m/z 184(西沙必利)。结果莫沙必利在0.512~125μg·L-1与峰面积线性关系良好(r2=0.999 3),定量下限为0.512μg·L-1,日内及日间RSD均<10%,莫沙必利的提取回收率和基质效应分别在95.8%~101.6%和101.6%~113.0%。结论本方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,样本检测时间为3 min,适用于血浆样本中莫沙必利的浓度测定及其药物代谢动力学研究。     

清肝解郁法对老年性痴呆模型神经元RNA和Nissl体定量研究

目的:观察清肝解郁法对老年性痴呆模型学习记忆功能及神经元内RNA和Nissl体的影响。方法:从21月龄昆明种小鼠筛选出老年性痴呆模型(记忆障碍)鼠,随机分为4组:空白对照组、西药对照组、清肝解郁方小剂量组、清肝解郁方大剂量组,另设老年学习记忆正常组(简称正常对照组,下同)。西药对照组给以Hydergine 0.6 mg/Kg,清肝解郁方小、大剂量组分别予清肝解郁方6.80 g/Kg及20.41 g/Kg,连续60 d,正常对照和空白对照组均灌以等量蒸馏水(DW);用跳台实验(step-down test)检测学习记忆成绩;脑组织冰冻切片,细胞化学方法显示大脑皮质和海马神经元内RNA和Nissl体,全自动显微图象分析系统定量检测相关脑区RNA和Nissl体含量。结果:清肝解郁法能显著改善老年性痴呆模型小鼠的学习记忆障碍,并明显增高大脑皮质和海马锥体细胞的RNA和Nissl体含量,而且其作用呈现出一定的量效关系。结论:清肝解郁法可明显改善老年性痴呆模型的学习记忆障碍,并促进调节其大脑皮质和海马的RNA代谢,明显改善学习记忆关键脑区的神经元结构,从而发挥神经元营养和保护作用。     

轻度认知障碍国内外研究概况与进展述评

笔者从概念演变、发病机理、临床特点、流行病学、疾病诊断与鉴别及中西医干预防治等诸方面,对老年人轻度认知障碍(mild cognitive impairment,MCI)于1996年被美国学者Petersen正式命名10余年来基础与临床研究的概况与进展进行了较全面、系统的介绍和述评,并就存在的问题与发展方向进行了分析与探讨.