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本文采用放射受体分析法和亲和标记法描述了大鼠脑内神经生长因子结合位点的分布情况。放射受体分析表明,稳定情况下,~(125)I—神经生长因子(nerve growth factor,NGF)在37℃与大鼠脑细胞膜受体的结合具有两种亚型及可饱和性,一种是高亲和力,低结合容量的受体,平衡解离常数(KdⅠ)为6pM,最大结合量(Bmax) 相似文献
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脑损伤后神经生长因子受体的变化 总被引:1,自引:0,他引:1
我们首先建立了放射受体分析法和亲和标记法测定脑组织中神经生长因子(nerve growth factor,NGF)受体。将~(125)I-NGF与脑细胞膜蛋白一起孵育,测定了脑损伤后神经生长因子受体的密度和结合性质。将大白鼠左 相似文献
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本文报道了一种测定脑内神经生长因子(NGF)受体的竞争性结合分析法,应用^125I-NGF作为放射配基,在含有过量未标记NGF条件下,^125I-NGF与不同脑组织细胞膜于37℃下孵育30min达到可逆的平衡状态的Scatchard分析,根据其与配体亲和力的不同分为高亲和力(I型)与低亲和力(Ⅱ型)结合位点两种采受体亚型,平衡解离常数(Kd)分别约为4pmol.L^-1及1.6nmol.L^-1最 相似文献
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目的:探讨低剂量力达霉素对小鼠P19胚胎癌细胞生长的影响及其可能的作用机制,为以肿瘤干细胞为靶点的肿瘤治疗提供依据。方法:体外培养P19细胞,实验分非加药组、阿霉素组和力达霉素组。MTT法检测力达霉素处理P19细胞后的剂量曲线和时间曲线。流式细胞术进一步确定力达霉素和阿霉素处理过的P19细胞的非凋亡剂量,并检测其细胞周期改变。Real-time PCR、Western blotting和免疫荧光化学技术检测力达霉素和阿霉素处理过的P19细胞中转录因子Oct4 mRNA和蛋白质的表达水平。结果:MTT法分析结果显示,力达霉素和阿霉素分别处理P19细胞后的半数有效抑制浓度(IC50)为1×10-11 mol/L和0.5×10-6 mol/L,从0.001 nmol/L-1到0.1 nmol/L-1浓度范围内的力达霉素处理细胞120 h后,仍可有效抑制小鼠P19胚胎癌细胞生长。流式细胞术分析表明,非凋亡剂量0.01 nmol/L-1力达霉素阻滞P19细胞生长发生在G1期,而0.5 μmol/L-1阿霉素阻滞P19细胞生长则发生在G2期。Real-time PCR、Western blotting和免疫荧光化学实验均揭示低剂量力达霉素下调P19细胞中的Oct4表达,而阿霉素无此作用。结论:低剂量力达霉素抑制P19细胞生长可能与其下调了胚胎干细胞基因Oct4有关。 相似文献
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目的研究和探讨力达霉素对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的癌细胞中信号转导的抑制作用。方法MTT法检测LDM和阿霉素(ADR)对3种人癌细胞系的增殖抑制作用。受体结合实验检测LDM对bFGF与其受体结合的作用。Western blotting检测bFGF受体复合物的形成,流式细胞测定细胞内Ca2+的流动,免疫印迹法测定bFGF所诱导的3种PKC亚型的活性。结果MTT法实验结果,LDM在体外对3种人癌细胞均显示出强烈的增殖抑制作用。按IC50值进行比较表明,LDM的活性比ADR强1 000倍以上。LDM抑制[125I]-bFGF对大鼠肺细胞膜受体的IC50为2.0×10-4 nmol·L-1。LDM能阻碍bFGF与其受体复合物的形成,LDM (10 nmol·L-1)预孵育2 h可阻止bFGF诱导的细胞内Ca2+效应。免疫印迹法证明,LDM可抑制bFGF诱导的癌细胞的3种PKC亚型的活性。结论力达霉素抗肿瘤作用的机制之一可能是通过阻断bFGF受体的信号转导途径。 相似文献
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目的确定低剂量力达霉素可诱导小鼠胚胎癌P19细胞分化,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养P19细胞,分别加入力达霉素和维甲酸(retinoiacid,RA),观察细胞形态,并分别行PCR和免疫荧光染色检测巢蛋白(Nestin)和微管相关蛋白2(MAP2)的表达。Western blot检测低剂量力达霉素和维甲酸处理该细胞后Oct4的表达。分别用慢病毒Oct4和si-Oct4感染P19细胞,使其过表达和下调Oct4,观察细胞形态,并行PCR和免疫荧光染色观察Nestin和MAP2的变化。结果 P19细胞经低剂量力达霉素和维甲酸处理后,形态上出现神经细胞样突起,且PCR和免疫荧光染色均示Nestin和MAP2的表达增强。应用低剂量力达霉素和维甲酸处理P19细胞后,Oct4的表达下降。过表达Oct4的P19细胞经低剂量力达霉素处理后未出现神经细胞样突起,且Nestin和MAP2的表达未增强,下调Oct4的P19细胞未经低剂量力达霉素处理,出现与其相反的结果。结论低剂量力达霉素可以诱导P19细胞分化,并且该分化可能与转录因子Oct4下调相关。 相似文献
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医学细胞生物学既是生命科学中的前沿学科,又是临床医学重要的基础学科。医学细胞生物学是讲授细胞的结构和生命活动的基本规律及其机理,医学生只有掌握正常细胞的生命活动,才能够认识疾病发生的本质。本文探讨了医学细胞生物学的教学现状和困惑,提出了提升学生的学习兴趣、采用多种教学方法以提高教学质量、将科研思想融入教学和吸引学生参与科研以培养创新人才的改革措施。 相似文献
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本文报道了一种测定脑内神经生长因子(NGF)受体的竞争性结合分析法。应用125I-NGF作为放射配基,在含有过量未标记NGF条件下,125I-NGF与不同脑组织细胞膜于37℃下孵育30min达到可逆的平衡状态的。Scatchard分析,根据其与配体亲和力的不同分为高亲和力(Ⅰ型)与低亲和力(Ⅱ型)结合位点两种受体亚型,平衡解离常数(Kd)分别约为4pmolL-1及1.6nmolL-1,最大结合能力(Bmax)约为0.5fmol/Lmg-1(蛋白)及24fmol/Lmg-1(蛋白)。脑内各分区NGF受体的结合容量依次为中隔、小脑、脑干、大脑皮质、下丘脑、嗅脑。 相似文献