放射性配体受体结合实验方法介绍

放射性配体受体结合(Radioligand receptor bindingassays,RRA)实验广泛用于测定受体的密度和亲和力,但是对初学者来说,要在本实验室建立RRA系统时,由于没有关于实验实际操作方面详细的介绍而倍感苦恼,现根据我们实验室多年的经验,将部分内容方法操作步骤报道如下,以供同行参考     

乐果亚慢性染毒对大鼠谷氨酸递质系统和学习记忆的影响

目的探讨有机磷农药乐果亚慢性染毒对大鼠学习记忆功能的影响及对中枢兴奋性氨基酸神经递质系统的可能作用。方法48只成年雄性SD大鼠随机分成4组，每组12只。对3个实验组以乐果经口灌胃（5、10和20mg／kg），每周5d，每天1次，共13周；对照组给予等体积的生理盐水。染毒结束，每组随机取6只大鼠在Morris水迷宫中检测动物学习记忆功能的改变情况；其余大鼠断头处死进行生化测定。使用硫代乙酰胆碱一二硫代双硝基甲酸（Asch．DTNB）法测定海马中乙酰胆碱酯酶（AChE）活力；用反相高效液相色谱荧光法测定海马中谷氨酸含量；用配体受体结合实验测定N-甲基-D-天门冬氨酸（NMDA）受体的Bmax和Kd值。结果大鼠定位航行实验中，随着训练期的增加，各组动物逃避潜伏期明显缩短；中、高剂量乐果染毒组的潜伏期比对照组长，差异有统计学意义（P〈0．05）。空间探索实验中，高剂量组与对照组相比，穿越平台位置的次数明显减少，差异有统计学意义（P〈0．05）。动物染毒后，低、中、高染毒组大鼠海马AChE活力分别为对照组的77．9％、62．8％和42．1％，差异有统计学意义，存在剂量一效应关系（P〈0．01）。中、高剂量组大鼠海马分区谷氨酸含量与对照组相比增加134．5％、132．9％．差异有统计学意义（P〈0．05）；中、高剂量组NMDA受体Bmax值与对照组相比降低21．2％、23．2％，差异有统计学意义（P〈0．05）；各剂量组受体Kd值增加22．2％-33．1％，且高剂量组与对照组比较，差异均有统计学意义（P〈O．05）。大鼠的空间记忆能力下降与海马中NMDA受体的亲和力下降在统计学上有相关关系（P〈O．05）。结论乐果亚慢性染毒可引起大鼠中枢兴奋性氨基酸神经递质含量及NMDA受体密度和亲和力的改变，并在降低大鼠的学习记忆功能中可能发挥一定的作用。     

毒死蜱致癌性及其内分泌干扰作用研究

毒死蜱广泛应用于农业及非农业领域,过去一直认为其不具有"三致"作用,但新近的流行病学调查发现毒死蜱与肺癌的发生可能存在某些联系.此外,某些研究也发现它可能具有内分泌干扰作用.该文将对这些毒理学研究的新进展进行综述.     

乐果90 d染毒对大鼠大脑皮质GABA系统的影响

[目的]研究乐果[O,O-二甲基-S-(N-甲基氨基甲酰甲基)二硫化磷酸酯]90d染毒对大鼠大脑皮质γ-氨基丁酸(GABA)系统的影响。[方法]48只健康雄性SD大鼠分成4组,剂量分别为O(生理盐水)、5、10、20mg/kg,灌胃给药,每周染毒5d(次),实验周期90d,每天称重1次,每3天记录动物饲料消耗量,定期测定全血乙酰胆碱酯酶(AChE)活性,实验结束时全部动物断头处死,测定延髓AChE活性,反相高效液相色谱荧光法测定大脑皮质GABA含量,放射性配体受体结合法测定大脑皮质GABA_A受体的活性。[结果]实验期间,各染毒组动物全血AChE活性明显抑制,实验后期有所恢复。实验结束时,低、中、高染毒组延髓AChE活性分别约为对照组的78%、63%、42%。与对照组相比,中、高剂量组大脑皮质GABA含量明显降低(P<0.01);GABA_A受体的最大结合容量(maximum binding capacity,Bmax)低剂量组升高(P<0.05),中剂量组降低(P<0.05);各剂量组GABA_A受体的平衡解离常数(equilibrium dissociation constant,Kd)比对照组均有降低,但仅低、中剂量组差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]乐果90d染毒过程中大脑皮质GABA含量、GABA_A受体功能都有所改变,可能参与了乐果慢性中毒过程中的非胆碱能机制。     

上海市静安区部分医用X射线机房防护状况调查

医用X射线应用广泛,但人体接受过多照射剂量,会带来诸如白细胞减少、放射性皮肤病等不良损害。为了掌握静安区医用X射线放射防护现状,保障放射工作人员和公众的健康安全,静安区卫生局卫生监督所于2007年、2008年5-9月,对辖区内部分医院的放射科、CT室、数字减影血管造影（DSA）机房、钼钯机房、口腔机房等周围环境X射线放射防护情况进行监督检查,     

加油站职业卫生现状及监督管理建议

该文综述了国内外有关加油站职业卫生调查状况以及加油站员工健康研究现状，阐述了加油站汽油污染的特点，加油站员工出现的各种健康效应及目前国内外加油站职业卫生监管存在的问题，并提出了相应的建议。     

不同粒径纳米Fe2O3的细胞毒性及氧化作用

目的 从细胞半数抑制浓度ICso和氧化作用的角度探讨不同粒径Fe2O3纳米粒子细胞毒性的差异。方法 将8，13和37nm3个不同尺寸的Fe2O3纳米粒子以不同剂量、时间作用于中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)，用活细胞计数法求得不同尺寸粒子的IC50并绘制细胞生长抑制曲线。硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量，黄嘌呤氧化酶法测定超氧化歧化酶(SOD)活性。结果 (1)3种尺寸的纳米粒子在一定浓度范围内，剂量与细胞抑制率呈现剂量-反应关系，而超过这一范围后，量效关系消失。(2)在量效相关的浓度范围内，3种尺寸纳米粒子的IC50分别为IC50(8nm)=279．585μg／ml，IC50(13nm)=254．739μg/ml，IC50(37nm)=561．237μg/ml。(3)Fe2O3纳米粒子可引起CHL细胞的氧化应激反应，且与作用时间有关。但MDA、SOD值变化与纳米粒子尺才、作用剂量之间无明显的量效关系。结论 不同粒径的Fe2O3纳米粒子在细胞毒性上表现出一定的差异，Fe2O3纳米粒子可引起CHL细胞的氧化应激反应，从时效性分析推论其细胞毒性与氧化性存在一定的关联。     

亚慢性乐果染毒对大鼠脑组织及血清中单胺类神经递质的影响

[目的]探讨有机磷农药乐果90d染毒对大鼠脑组织及血清中单胺类神经递质的影响。[方法]48只健康雄性SD大鼠随机分成4组，分别使用生理盐水，5、10、20mg／kg的乐果灌胃给药，每周染毒5d，每天1次，实验周期90d。染毒结束后断头处死大鼠，分离血清及脑组织皮层、海马，高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）联用电化学检测器（electrochemical detector，ECD）测定大鼠脑组织及血清中单胺类神经递质去甲肾上腺素（noradrenalinebitartrate，NE）、肾上腺素（epinephrine，E）、多巴胺（dopamine，DA）、5-羟色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）含量。[结果]低、中、高剂量组大脑皮层的NE含量明显低于对照组，分别约为对照组水平的48．7％（P〈0．01）、56．8％（P〈0．01）和76．5％（P〈0．05），与对照组相比差异均有统计学意义，大脑皮层的5-HT含量也明显低于对照组，分别约为对照组水平的65．4％、32．8％（P〈0．01）、40．1％（P〈0．05），中、高剂量组与对照组的差异有统计学意义。除中剂量组大脑皮层E含量明显低于对照组（P〈0．05）外，低、中、高剂量组和对照组大脑皮层E和DA水平无明显差异。大鼠海马各单胺类递质水平有随染毒剂量的升高而降低的趋势，呈现一定的剂量-效应关系；低、中、高剂量组的NE水平分别约为对照组水平的96．9％、85．6％、76．9％（P〈0．05）：E水平分别约为对照组水平的87．3％、85．5％、76．2％（P〈0．05）；DA水平分别约为对照组水平的81.4％、69．1％、42．0％（P〈0．05）；5-HT水平约为对照组水平的81.4％（P〈0．01）、33．9％（P〈0．01）、32．9％（P〈0．01），且与对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．01）。乐果染毒组与对照组血清NE和DA水平无明显差异（P〉0．05）；低、中、高剂量组血清中E和5-HT含量明显     

上海某区医疗机构处方质量调查

<正>处方是医师和药师对患者共同负责的重要医疗文书,处方书写是否规范,是合理安全用药的前提,直接关系到患者的治疗效果与生命安全。依据《处方管理办法》(办法)和《医院管理评价指南(2008版)》的规定,按照     

PDTC对百草枯致肺损伤大鼠TGF-β1及MMP-2和TIMP-1表达的影响

目的 探讨四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯(pyrrolidine Dithiocarbamate,PDTC)对百草枯(paraquat,PQ)致肺损伤大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP-1)表达的影响.方法 54只SD大鼠随机分为对照组(生理盐水组)、单纯染毒组(4个组)和干预组(4个组).除对照组外,各组均一次性灌胃PQ40mg/kg染毒,PDTC干预组在PQ染毒后立即一次性腹腔注射PDTC 120 mg/kg.在染毒后3、7、14、21 d各取1组动物,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法及荧光定量PCR法检测肺组织中TGF-β1、MMP-2和TIMP-1基因的表达,并观察肺组织病理改变.结果 与对照组相比.染毒组大鼠血浆TGF-β1蛋白、肺组织TGF-β1、MMP-2mRNA表达随时问延长呈现先升高后降低趋势,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),TIMP-1表达持续增高,差异有统计学意义(P<0.01).PDTC干预组3、14 d TGF-β1mRNA表达分别为0.54±0.08、0.72±0.04,7、14 dMMP-2 mRNA表达分别为1.62±0.50、1.97±0.34,7、21 d TIMP.1 mRNA表达分别为1.79±0.21、2.00±0.34,与单纯染毒组相比,均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 PDTC对肺损伤大鼠不同时期肺组织中TGF-β1、MMP-2及TIMP-1的mRNA表达均有一定的下调作用,可能是通过减轻中毒早期炎症的损伤、调整MMPs/TIMPs间的平衡,从而延缓肺纤维化的进程.