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目的:建立超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)法测定氘代氯化琥珀胆碱(2H-Suc)在大鼠主要脏器分布。方法:大鼠皮下注射2H-Suc 4 h后,用UPLC-MS/MS法测定血清和相关脏器中2H-Suc含量;色谱柱:Luna NH2色谱柱(2 mm×100 mm,3μm),流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈等度洗脱,流速为0.2 mL/min;正离子扫描模式,多反应监测模式下,电喷雾离子化源进行检测;考察该方法的线性关系与检测限、准确度和精密度、回收率、基质效应和稳定性。结果:血清和肾组织中2H-Suc的检测限分别是0.04 ng/mL和0.05 ng/mL,线性范围分别是0.3~100 ng/mL和0.5~100 ng/mL,日内、日间精密度和准确度均小于15%,回收率在85.30%~96.76%之间,经过处理后的样品不存在明显的基质效应。大鼠皮下注射2H-Suc,在血清及心、肝、肾等主要脏器中均检测到2H-Suc,其中肾脏中含量最高。结论:UPLC-MS/MS法是测定大鼠体内2H-Suc含量的一个有效方法,2H-Suc在大鼠血清及心、肝、肾等中均有分布,肾脏中含量最高。 相似文献
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目的研究 3-巯基丙酮酸硫转移酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,3?MST)产生的硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)在大鼠脑血管张力和血管内皮细胞缺氧损伤中的作用。方法将大鼠脑基底动脉血管按随机数字表法分为 Krebs Henseleit缓冲液对照组、 3MP组、 ASP组、 SIN?1组、 ASP+SIN?1组、 3MP+SIN?1组。通过微血管张力仪来测量大鼠脑基底动脉血管的张力,收集张力仪浴槽中的灌注液并测定灌注液中硫化氢含量。原代培养大鼠脑血管内皮细胞,将细胞按随机数字表法分为对照组、模型组、 3MP组、 ASP组、 SIN?1组、 3MP+SIN?1组。除对照组外,其他 5组建造急性缺氧 4h模型,用药组分别给予相应的药物预处理。然后测定缺氧损伤后内皮细胞活力,上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量,以及活性氧的含量。结果 3?MST底物硫基丙酮酸二水合物(3?mercaptopyruvate,3MP)和 3?MST激动剂 5?氨基 ?3?(4?吗啉基)?1,2,3?恶二唑鎓盐酸盐(3?morpholino sydnonimine hydrochloride,SIN?1)能够舒张血栓素 A2受体激动剂 U46619预收缩的大鼠脑基底动脉,最大收缩率为(94.67± 3.99)%;与单独使用 SIN?1相比, 3?MST抑制剂天门冬氨酸(L?aspartic acid,ASP)能够减弱 SIN?1舒张血管的作用,而 3MP能增强 SIN?1的血管舒张作用。同时, 3MP和 SIN?1可以增加血管灌注液中的硫化氢的含量(90.09±5.36)μmol,而 ASP可以减少 SIN?1增加的硫化氢。与急性缺氧组相比, 3?MST抑制剂 ASP能够进一步降低细胞活力,升高 LDH活性;而 3?MST激动剂 SIN?1和底物 3MP能够改善细胞损伤,提高细胞活力,降低 LDH活性(112.63±8.08)U/L,降低活性氧。结论 3?MST产生的硫化氢可介导脑血管舒张,保护脑血管内皮细胞。 相似文献
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