经冠状动脉自体骨髓单个核细胞移植对阿霉素心肌病兔心功能的影响

目的建立经冠状动脉输注自体骨髓单个核细胞(BMNNCs)治疗阿霉素诱导的扩张型心肌病(DCM)新西兰兔的移植模型,评价BMMNCs移植对心肌间质重塑的影响,初步探讨移植后心肌间质重塑与心功能改善的内在联系。方法经耳缘静脉注射盐酸阿霉素建立新西兰兔DCM模型,将存活的DCM模型兔随机分为冠状动脉移植亚组(10只,经冠状动脉输注自体BMNNCs)和对照亚组(10只,假手术)。半定量分析左心室心肌胶原容积分数(CVF)、基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-3,以评价心肌间质重塑;测定血流动力学指标和血清脑钠素(BNP),以评价心功能的改变。结果BMMNCs移植术4周后,冠状动脉移植亚组的心肌组织MMP-2和MMP-3表达呈下降趋势(P值均<0.01);左心室CVF的增幅为(0.97±1.94)%,显著低于对照亚组的(11.58±2.82)%(P<0.05)。冠状动脉移植亚组移植后8周的血清BNP为(172.16±15.28)μg/L,显著高于移植后14周的(128.46±10.02)μg/L(P<0.01)。结论经冠状动脉的自体BMMNCs移植,可能通过抑制MMPs的应激性改变而延缓心肌间质重塑中胶原代谢进程,有助于改善新西兰兔DCM模型的心功能。     

用液相色谱-串联质谱法测定人血浆中血小板活化因子

目的：建立一种人血浆中血小板活化因子（PAF）的液相色谱－串联质谱测定方法（LC-MS／MS），从而反映临床冠心病独立风险预测因子脂蛋白相关磷脂酶A2（LP－PLA2）活性。方法：血浆添加底物PAF后，37℃孵育10min，加入甲醇沉淀蛋白质，离心取上清进样。血浆PAF经HPLC法分离，串联质谱法定量检测。以PAF的单位时间减少量来衡量LP—PLAa的活性。结果：在1～50μg／mL添加浓度范围内线性关系良好，线性方程y=0．284c＋0．214，r=0．9991（n=6）。低、中、高浓度（3、20、40μg／mL）质控品的批内、批间精密度分别为2．08％～4．75％（n=6）和5．47％～5．86％（n=18），准确度为93．50％～97．66％，PAF和内标非布索坦的回收率为97．36％～100．8％（n=6）。稳定性研究结果表明，PAF在样品预处理后12h和冻融3次后的准确度为99．96此～107．1％（，产6），说明稳定性良好。应用本方法测定10例冠心病患者和健康对照组的PAF反应量，测定结果分别为（22．77±1．26）mg／mL和（19．62±3．94）mg／mL，说明冠心病患者LP—PLA2活性明显高于健康对照组（P＜0．05）。结论：本方法专一灵敏、准确可靠、重复性好、检测通量高，可作为心血管疾病诊断指标之一，用于临床冠心病与缺血性卒中风险预测的研究。     

钾通道开放剂尼可地尔和钾通道阻断剂氯化铯对缺氧引起离体大鼠肺动脉收缩反应的影响

目的　观察钾通道开放剂尼可地尔和钾通道阻断剂氯化铯对缺氧引起离体大鼠肺动脉环收缩反应的影响。方法　以０．９５Ｎ２＋０．０５ＣＯ２造成肺动脉环的缺氧性收缩反应;机械法去除肺动脉血管内皮细胞。结果　急性缺氧１ｈ后,含内皮与去内皮肺动脉环的ＫＣｌ诱导的最大收缩百分率（ＴＫｍａｘ％）分别为１６％±４％、１８％±５％（Ｐ＞０．０５）。有氧时,钾通道阻滞剂氯化铯（１０、２０ｍｍｏｌ·Ｌ－１）可略微提高肺动脉环的收缩张力,氯化铯４０ｍｍｏｌ·Ｌ－１引起的明显收缩,依赖细胞外Ｃａ２＋内流。缺氧可增强氯化铯的上述作用,氯化铯（１０、２０、４０ｍｍｏｌ·Ｌ－１）诱导肺动脉环产生的ＴＫｍａｘ％分别增加７５０％、３５４％、１７％。钾通道开放剂尼可地尔（３、１０、３０μｍｏｌ·Ｌ－１）可浓度依赖性地抑制缺氧及氯化铯诱导的肺动脉环收缩反应。含内皮与去内皮肺动脉环在上述反应中有相似性的表现。结论　急性缺氧造成非内皮依赖性肺动脉收缩反应,与平滑肌钾通道阻滞有关。氯化铯可增强此反应。尼可地尔对缺氧性肺动脉收缩反应的抑制作用,提示此类药物在临床治疗中的前景。     

经冠状动脉自体骨髓单个核细胞移植对扩张型心肌病兔心肌间质重塑的影响

背景：骨髓单个核细胞为一组多潜能干细胞的混合体，在原发性扩张型心肌病领域的应用尚处于起步阶段。 目的：评价经冠状动脉移植自体骨髓单个核细胞对阿霉素诱导的扩张型心肌病模型兔心肌间质重塑的影响。 设计、时间及地点：细胞学体外观察，于2006-10/2007-06在复旦大学附属华山医院心血管研究室完成。 材料：普通级3月龄雄性新西兰兔30只，由上海中医药大学实验动物中心提供。阿霉素为深圳万乐药业股份有限公司产品，批号0602E1。 方法：30只兔均经耳缘静脉注射盐酸阿霉素建立扩张型心肌病模型，造模后存活兔取10只用于模型观察，剩余20只随机分为移植组、对照组，10只/组。移植组兔抽取髂骨骨髓，采用密度梯度离心法分离自体骨髓单个核细胞，于造模2周后经塑性的4F造影导管模拟临床冠状动脉内输注骨髓单个核细胞悬液2 mL。对照组兔同样接受骨髓液采集以平衡手术操作创伤对实验结果的影响，完成选择性左冠状动脉造影后，经造影导管注射2 mL生理盐水。 主要观察指标：通过RT-PCR半定量检测心肌胶原容积分数、基质金属蛋白酶1，3 mRNA的表达评价心肌间质重塑，通过血流动力学指标和血清脑钠素浓度评价心功能的变化。 结果：移植组脱落2只，对照组脱落1只。细胞移植4周后与对照组比较，移植组胶原纤维增生进程延缓，心肌胶原容积分数显著降低（P < 0.01），基质金属蛋白酶1，3 mRNA的表达呈下降趋势（t=4.45，P < 0.01），左心室收缩压、压力变化速率最大值均显著升高，左心室舒张末压显著下降（t=9.12，P < 0.01），血清脑钠素浓度明显降低（t=6.05，P < 0.05）。 结论：经冠状动脉移植自体骨髓单个核细胞，可能通过抑制基质金属蛋白酶的应激性改变而延缓心肌间质重塑中胶原代谢进程，有助于改善扩张型心肌病模型兔的心功能。     

经冠状动脉自体骨髓单个核细胞移植对扩张型心肌病兔心肌组织病理学的影响

目的:骨髓干细胞在扩张型心肌病动物模型中具有向心肌样细胞和血管内皮细胞分化的潜能。评价经冠脉自体骨髓单个核细胞移植治疗对扩张型心肌病兔心肌组织病理学影响及心功能的变化。方法:实验于2006-09/2007-03在复旦大学附属华山医院心血管研究室完成。①实验材料:3月龄雄性新西兰兔25只,随机数字表法分为正常组5只、模型组10只、冠脉移植组10只。②实验方法:冠脉移植组、模型组兔经耳缘静脉注射盐酸阿霉素建立扩张型心肌病模型。冠脉移植组10只兔麻醉后以髂骨为穿刺点,共采集15mL混有肝素生理盐水的骨髓液,密度梯度离心得到自体骨髓单个核细胞悬液2mL,其中5只兔的骨髓单个核细胞悬液行DAPI标记,经塑性的4F造影导管,模拟临床冠脉内输注细胞悬液。③实验评估:术后4周通过检测血流动力学指标评价心功能的改变;苏木精-伊红、天狼猩红染色观察心肌组织形态学特点,透射电镜观察心肌组织超微结构的改变;TnT间接免疫荧光检测心肌组织DAPI标记情况,以评价骨髓单个核细胞的分化和转归。结果:①血流动力学指标的测定:与基础值比较,细胞移植4周后模型组兔血流动力学指标无明显改变(P>0.05),而冠脉移植组心功能显著改善(P<0.05)。②心肌组织形态学观察:扩张型心肌病兔心肌纤维排列紊乱,坏死区大量淋巴细胞浸润,细胞间隙增宽,心肌间质面积增大。③心肌组织超微结构的变化:造模结束后,模型组心肌细胞线粒体肿胀,肌丝断裂,心肌细胞核呈锯齿状,心肌间质中淋巴细胞浸润,胶原纤维增多。细胞移植4周后,冠脉移植组出现线粒体堆积现象,亦存在巨噬细胞浸润和胶原纤维轻度增生,未发现心肌组织中存在植入的特殊类型细胞。④心肌组织TnT间接免疫荧光检测:DAPI标记的骨髓单个核细胞在心肌组织中富集,血管腔内不存在。结论:①经冠脉自体骨髓单个核细胞移植治疗阿霉素扩张型心肌病兔,利于植入细胞在心肌组织中富集,改善心功能。②透射电镜尚无法证实心肌组织中存在外来的移植细胞。     

脂蛋白相关磷脂酶A2抑制剂Darapladib的药效学研究进展

 脂蛋白相关磷脂酶A2 (lipoprotein- associated Phospholipase A2,Lp- PLA2)是磷脂水解酶超家族中的一员,能水解低密度脂蛋白中的氧化修饰磷脂,产生溶血卵磷脂和氧化性游离脂肪酸两种促炎介质。最近研究发现Lp- PLA2能够介导炎症反应以及促进动脉粥样硬化(atherosclerosis , AS)的形成,现已成为一个新炎性反应标志物和心血管事件的独立风险预示因子。针对这一动脉粥样硬化过程中的关键酶设计的抑制剂很多。其中Darapladib是目前最接近上市的一种Lp- PLA2特异性抑制剂,目前其Ⅲ期临床试验已完成。Darapladib作为一种新兴的抗AS分子靶点药物,受到人们广泛的关注。已有多项研究表明它能降低Lp- PLA2的活性,减轻炎症反应,从而控制AS的发展与恶化。本文综述了Lp- PLA2及其抑制剂Darapladib在AS中的作用机制以及近年来 Darapladib的药效学研究进展。     

丹参多酚酸盐对大鼠慢性肾衰时肾功能及内源性内皮素释放的影响

采用腺嘌呤致大鼠慢性肾衰 (CRF)的模型 ,研究丹参多酚酸盐对CRF大鼠肾功能及内源性内皮素释放的影响 .结果表明 ,在CRF模型中 ,大鼠血清尿素氮 ,肌肝水平 ,血浆内皮素水平及肾皮质钙含量均明显升高 ;丹参多酚酸盐 5,10 ,15mg·kg- 1,ip连续给药 14d ,则使CRF大鼠的血清尿素氮 ,肌肝水平降低 ,丹参多酚酸盐 10mg·kg- 1组的血清尿素氮已与正常对照组无显著差异 (P >0 .0 5) .另外 ,与CRF大鼠相比 ,丹参多酚酸盐 5,10 ,15mg·kg- 1组血浆内皮素水平及肾皮质钙含量均明显降低 ,10mg·kg- 1组与 15mg·kg- 1组无显著差异 ,10mg·kg- 1组内皮素水平及肾皮质钙含量较模型组分别降低了59 % ,51% .形态及定量检测肾小管平均截面积 ,肾小球平均体积的结果表明 ,丹参多酚酸盐 10mg·kg- 1组能减少肾组织结晶沉淀物 ,减轻肾小管 ,肾小球损伤程度 ,延缓肾小球基底膜增厚 .结果提示 ,丹参多酚酸盐能明显改善肾功能 ,其机理可能与其抑制内皮素的释放有关     

脓毒症患者DIC预警系统构建与临床研究

目的:构建脓毒症患者弥散性血管内凝血(DIC)自动筛查预警系统,并对脓毒症患者进行筛查;将由预警系统筛查出的DIC的患者与由中国弥散性血管内凝血诊断积分系统(CDSS)诊断出的DIC患者进行比较,探讨DIC预警系统与CDSS诊断标准对脓毒症患者病死率预测的价值.方法:依托ISTH DIC及SIC DIC诊断标准在重症医...     

三七组分(Rx)对心脏功能及血流动力学的作用

本文研究了三七组分 Rx对麻醉正常大鼠心功能及血流动力学的作用。结果表明 :Rx 10 0 mg/kg、15 0mg/kg能明显降低 L VP、± d P/dtmax、BP、HR,使 CO增加 ,对 L VEDP则无明显影响。上述结果显示 ,Rx在抑制心肌收缩性 ,降低血压的情况下使 CO增加 ,其效应可能与其扩张外周血管 ,降低外周阻力作用有关     

兔经冠状动脉自体骨髓干细胞移植模型

目的： 建立扩张型心肌病（DCM）兔经冠状动脉途径自体骨髓单个核细胞（BMNNCs）移植模型，并初步探讨其可行性。方法: 雄性新西兰兔经耳缘静脉注射盐酸阿霉素建立DCM模型，将存活兔随机分为冠脉移植组（n=10）和对照组（n=10），移植前测定对照组血流动力学指标作为基线资料，分离自体BMNNCs，［99mTc］-MIBI标记，分别通过冠状动脉（冠脉移植组）和耳缘静脉（对照组）输注，心肌灌注显像间接评价BMNNCs在心肌组织中的生物学分布；术后4周测定血流动力学指标，评价心功能的改变。结果: ［99mTc］-MIBI心肌灌注显像提示冠脉移植组BMNNCs更容易在心肌组织中富集，对照组植入细胞主要分布在肝组织内；与耳缘静脉输注比较，冠脉移植组心功能改善更为显著(P＜0.01)。结论: DCM兔经冠脉途径自体BMNNCs移植利于植入细胞在心肌组织中富集，提高移植效率，为干细胞的基础研究提供理想的移植模型。