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目的:制备低免疫原性异种脱细胞神经基质并评估其理化性能。方法:以α-1,3-半乳糖苷转移酶基因敲除(GTKO)猪坐骨神经为实验原料对基因敲除猪坐骨神经进行脱细胞处理制备低免疫原性异种脱细胞神经基质,通过HE、DAPI染色及DNA残留量检测评价神经组织的脱细胞效果;I型胶原、层黏连蛋白、纤连蛋白免疫组织化学及天狼猩红染色评价脱细胞神经细胞外基质组分保留情况;α-1,3-半乳糖基(a-gal)免疫荧光检测异种抗原a-gal的残留;扫描电镜(SEM)分析脱细胞神经三维组织结构及孔隙率。结果:组织染色显示脱细胞神经基质内膜、外膜、束膜中的细胞均去除干净,DNA定量结果显示DNA含量下降了95%。天狼猩红染色及免疫组织化学结果显示脱细胞神经组织较好地保留了胶原纤维与细胞外基质主要蛋白。SEM结果显示脱细胞神经较好地保留了其三维组织结构,细胞毒性检测表明脱细胞神经基质无细胞毒性。结论:本研究自主设计的四联脱细胞方案能彻底去除神经组织中的细胞成分与异种抗原,并且较完整地保留了神经组织结构,与天然神经具有高度相似性。 相似文献
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目的建立简便、快捷、经济的模式小鼠总DNA提取方法,以快速鉴定大批量模式小鼠基因型。方法采用苯酚抽提法、异丙醇沉淀法、鼠耳煮沸法提取同种模式小鼠总DNA,对比DNA纯度、得率、耗费时间,并比较基因型鉴定结果。结果苯酚抽提法得率最高,异丙醇沉淀法最低;而纯度则按照苯酚抽提法、异丙醇沉淀法、鼠耳煮沸法顺序递减;在耗时上鼠耳煮沸法最短。三种方法提取的DNA均可做模版用于基因型鉴定。结论鼠耳煮沸法操作简单、成本最低,快速、基因型鉴定结果可靠,可用于规模化的基因型鉴定实验中。 相似文献
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目的:探讨LINC00460在人ccRCC中表达的临床意义。方法:通过TCGA数据库下载611例人 ccRCC的转录组数据以及相应的患者的临床信息,然后提取LINC00460在人ccRCC中的表达谱数据。分析 LINC00460在人ccRCC以及癌旁组织中的表达,并进一步分析其与患者的临床病理学参数及预后的相关性。 结果:ccRCC组织中LINC00460表达水平均较癌旁组织明显升高,差异有统计学意义( P <0.05)。结合患 者临床病理学相关参数分析显示,LINC00460高表达与更高的病理学分期(I/II期vs.III/IV期, OR =2.82, 95% CI =1.96~4.07, P <0.001)、T分期(T1/2vs.T3/4, OR =2.65,95% CI =1.84~3.84, P <0.001)、N分期 (N0vs.N1, OR =7.80,95% CI =2.12~50.40, P =0.007)、M分期(M0vs.M1, OR =3.22,95% CI =1.91~5.61,P <0.001)和组织学分级(G1/2vs.G3/4, OR =2.08,95% CI =1.46~2.95, P <0.001)相关。Cox回归分析 显示,LINC00460是影响患者总生存预后的独立因素( HR =1.05,95% CI =1.01~1.10, P =0.010)。结论:人 ccRCC组织中LINC00460的表达水平较癌旁组织明显升高,其高表达与患者的总生存预后更差相关,因此, LINC00460可能是预测肾癌患者预后的生物标志物。 相似文献
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目的:探讨支气管镜下腔内高频电刀治疗中央气道良、恶性肿瘤的临床应用价值.方法:对24例气道良性肿瘤,84例失去手术机会的气道恶性肿瘤,行支气管镜下腔内高频电刀治疗,观察疗效及并发症.结果:108例患者中,106例(98.1%)解除了气道阻塞,呼吸困难明显减轻,阻塞性炎症减轻.108例患者气道腔径治疗前为(3.42±2.27)mm,治疗后为(10.54±4.50)mm,差异有统计学意义(P<0.05);气促评分治疗前为(2.95±0.96)级,治疗后为(1.24±0.99)级,差异有统计学意义(P<0.05).良性肿瘤24例,均成功去除腔内病灶.恶性肿瘤84例,呈显效者58例(69.0%),有效24例(28.6%),无效2例(2.4%),中位生存期3.5个月,1年生存率21.7%.结论:支气管镜下腔内高频电刀治疗中央气道良、恶性肿瘤,可有效切除腔内肿瘤,恢复气道通畅,疗效好、并发症少. 相似文献
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视网膜变性是导致眼睛永久失明的主要原因之一,其特征是视网膜感光细胞的丧失,而感光细胞的丧失主要通过凋亡途径。近年来,虽然感光细胞的凋亡机制研究已经引起了重视,但目前仍缺乏有效的方式来抑制感光细胞凋亡。因此,本文将从凋亡的进程、凋亡发生过程中的关键分子、凋亡通路以及凋亡和自噬的联系等方面对其进行综述,旨在进一步阐明感光细胞凋亡的分子机制。 相似文献
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目的 为了考察不同品系的小鼠囊胚对C57BL/6胚胎干细胞种系嵌合效率的影响,进而提高通过在C57BL/6胚胎干细胞中同源重组制作基因打靶小鼠的效率。 方法 本研究除了选取近交系B6(Cg)-Tyrc-2J和BALB/c品系,还选了封闭群ICR作为囊胚供体鼠,通过在TLX3、Ai3K和SL三个不同基因修饰ES细胞的种系嵌合实验中,平行比较三者的囊胚利用率、嵌合鼠获得效率以及种系遗传效率等三个方面,并进一步针对囊胚来源这一因素对效率的影响进行统计学分析。 结果 本研究中三种ES细胞均未能通过B6(Cg)-Tyrc-2J品系囊胚的注射获得种系遗传。而BALB/c品系与ICR品系相比,囊胚利用率明显低于ICR品系(P< 0.05);嵌合鼠获得效率方面,BALB/c与ICR相当(P= 0.115);而种系遗传效率方面,BALB/c品系显著高于其他品系(P< 0.01)。 结论 BALB/c品系在C57BL/6胚胎干细胞种系嵌合效率方面确实具有优势,然而,由于BALB/c囊胚较难获得,并且存在发育延迟和透明带脆性高等问题,而ICR品系在囊胚获得和利用方面的效率明显高于BABL/c,并且也可以支持C57BL/6胚胎干细胞的种系遗传,因此也是C57BL/6胚胎干细胞囊胚注射中较好的选择。 相似文献
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背景与目的胃癌是常见的胃肠道肿瘤之一,其预后较差。大量研究表明自噬失调影响胃癌的发生与发展,本研究构建了胃癌自噬相关长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)预后风险模型,并分析了胃癌自噬相关lncRNA潜在的临床预后价值。方法从癌症基因图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库下载443例胃癌患者的年龄、性别、生存时间、生存状态、肿瘤分期以及分级等临床相关资料,及其中375例胃癌患者的肿瘤组织和32例癌旁组织对照样本的转录组数据(mRNA和lncRNA)。从人类自噬数据库(Human Autophagy Database,HADb)下载自噬相关基因,采用Pearson相关性分析筛选出胃癌中与自噬基因相关的LncRNA。通过Kaplan-Meier法、单因素和多因素Cox回归分析筛选出具有独立临床预后价值的胃癌自噬相关LncRNA,并构建预后模型。然后,通过多因素Cox回归系数计算风险评分,将胃癌患者分为低风险组和高风险组,分析风险评分与胃癌患者的临床特征和总生存率的相关性。结果共筛选和鉴定出26个具有临床预后价值的胃癌自噬相关... 相似文献
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