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1.
从包涵体中纯化重组人幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位 总被引:3,自引:1,他引:2
目的:建立一种有效从包涵体中纯化重组人幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位HspA的方法。方法:重组基因工程大肠杆菌发酵后,表达的Hp r HspA包涵体经洗涤,变性,复性,采用Q Sepharose High Performance阴离子交换层析和Superdex75凝胶过滤层析分离纯化,使用SDS-PAGE和HPLC检测纯度,选用ELISA和动物实验对纯化蛋白的免疫学活性和生物学活性进行鉴定。结果:Hp的HspA包涵经洗涤和溶解后,Hp的HspA的纯度>60%,包涵体溶解液经阴离子交换层析和凝胶过滤层析后纯度超过95%,Hp的HspA纯品经检测具有良好的免疫学活性和生物学活性。结论:本研究建立的分离纯化方法可从包涵体中获得高纯度的重组HspA蛋白,为进一步的动物实验研究奠定了基础。 相似文献
2.
本文通过半巢式PCR对 82例慢性胃炎和十二指肠溃疡患者的牙菌斑、唾液及胃黏膜中的幽门螺杆菌 (Hp)进行了检测。 82例患者中活动期十二指肠溃疡患者 2 4例 ,慢性浅表性胃炎 2 7例 ,慢性萎缩性胃炎 31例 ,其中男性 4 2例 ,女性 4 0例 ,平均年龄 4 2 .3岁。半巢式PCR首先以 1对引物扩增出磷酸葡萄糖胺变位酶基因 (phosphogluco saminemu tasegene ,glmM) 75 6bp的片段作为模板 ,再以半巢式引物扩增出 4 96bp的最终产物。引物 0 :5′ CGCGAGCCACAACCCTTTTGAAG 3′ ;引物 1:5′ CGCGCTCACTTGCAAAGCGCACAC 3′;引物 2 :5′… 相似文献
3.
肾综合征出血热 (hemorrhagicfeverwithrenalsyndrome,HFRS)是由汉坦病毒引起的自然疫源性传染病 ,以急性起病、发热、出血、低血压和肾脏损害为特征[1] ,是临床较常见的传染病之一 ,也是战时更易于流行传播的疾病 ,所以对其病理指标的研究 ,不但对临床诊治有一定帮助 ,而且在军事医学上也有一定意义。关于肾综合征出血热患者的各病期血液学分析已有报道 ,而对HFRS患者血中异型淋巴细胞 (异淋 )、血小板、肾功能的相关性分析未见报道。本文对 4 0例HFRS患者血中的异淋与肾功能、血小板的相关性进行了分析 ,现报告如下。1 材料与方法1 … 相似文献
4.
目的分析门诊多药耐药大肠埃希菌(MDR E.coli)泌尿系统感染(USI)现状及危险因素,为门诊USI患者合理用药提供依据。方法回顾分析2012年分离自门诊USI患者尿标本的208株大肠埃希菌的耐药性,筛选MDR E.coli阳性株,以MDR E.coli阴性株为对照,分析MDR E.coli感染的危险因素。结果 208株大肠埃希菌中MDR E.coli共检出118株,检出率为56.73%。208株大肠埃希菌仅对亚胺培南、呋喃妥因、阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦4种抗生素的敏感率>85%。MDR E.coli感染危险因素的单因素分析结果显示,MDR E.coli感染与既往抗生素应用、头孢菌素类使用、曾用药种类(≥2种)、以及USI病程(>6个月)有关(P<0.05);MDR E.coli感染危险因素的多因素Logistic回归分析显示,曾用药种类(≥2种)和USI病程(>6个月)是MDR E.coli感染的独立危险因素。结论门诊USI患者MDR E.coli感染检出率较高与多种因素有关,需加强门诊USI患者抗生素应用管理。 相似文献
5.
6.
人J链基因的克隆及原核表达研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 用基因工程技术在大肠埃希菌中表达人J链基因重组蛋白,为研究其功能及开发检测J链抗原的试剂盒奠定基础.方法 提取人脾细胞总RNA,以此为模板,通过RT-PCR的方法获得J链基因.将该基因克隆到表达载体pET-22b(+)中,构建J链表达载体,测序证实正确后转化至E coli BL21(DE3),IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE,表达产物经免疫印迹法(western blot,WB)鉴定其免疫反应性.结果 测序结果证实笔者成功地获得了J链基因,其序列与GenBank中报道完全一致.SDS-PAGE分析表明,重组蛋白在Ecoli BL21中获得表达,其相对分子量约为15KD左右,表达的蛋白量约占菌体蛋白的15%.结论 成功克隆了人免疫球蛋白J链基因,并在大肠杆菌中获得表达. 相似文献
7.
目的:对北京倍肯公司研发的野战(应急)快速检验系统生化分析模块(SP4430)基本性能进行综合评价。方法:对野战(应急)快速检验系统生化分析模块分别在室内环境与模拟野战环境下进行精密度评价,并对其在两种不同环境下的检测结果进行对比;对野战(应急)快速检验系统生化分析模块与日本OLYMPUS AU5421全自动生化分析仪所测定结果进行比较,分析二者之间有无差异。结果:生化分析模块GLU、UA、ALB、REA、ALT、TBIL、LDH、AMS在室内的CV(%)分别为2.08、2.89、1.56、2.38、4.10、2.36、3.19、6.33;在模拟野战环境下的CV(%)分别为2.31、3.12、2.11、2.32、4.80、2.57、4.51、7.14;GLU(mmol/L)、UA(umol/L)、ALB(g/L)、CREA(umol/L)、ALT(U/L)、TBIL(umol/L)、LDH(U/L)、AMS(U/L)在室内结果分别为5.91±177;2.03、269.50±177;111.50、35.89±177;7.55、94.08±177;22.150、42.71±177;27.62、10.30±177;5.75、173.60±177;59.99、67.45±177;25.06,在模拟野战环境下的结果分别为6.33±177;2.31、273.38±177;120.56、34.90±177;6.99、94.85±177;23.15、37.73±177;24.64、10.18±177;5.71、170.43±177;61.74、68.02±177;25.14;所有项目室内与模拟野战环境的检测结果采用配对t检验比较,P值均>0.05;结果表明生化分析模块与OLYMPUS AU5421所测GLU、UA、ALB结果差异无统计学意义(P>0.05),而CREA、ALT、TBIL、LDH、AMS所测结果差异有统计学意义(P<0.01)。两种仪器所有检测结果的相关系数均>0.90。结论:在室内、模拟野战环境下,野战(应急)快速检验系统生化分析模块精密度良好,结果比较无显著差异;生化分析模块与实验室常规生化分析仪检测结果相关性良好,由于检测方法不同,部分结果差异较大,但仍然具有可比性。 相似文献
9.
血浆凝血酶原时间测定的方法比较 总被引:2,自引:0,他引:2
血浆凝血酶原时间测定的方法比较王缚鲲田惠芬吴玉暖候正燕(白求恩国际和平医院检验科,石家庄050082)关键词血浆凝血酶原时间手工法仪器法血浆凝血酶原时间(PT)测定是临床常做项目之一。我科自1995年第一季度首次参加全国PT测定质控已连续四次,为了提... 相似文献
10.
目的:对倍肯野战(应急)快速检验系统A型中的电解质、生化分析模块的结果与常规生化分析仪所测定结果进行比较,分析两者之间的差异。方法:利用倍肯野战(应急)快速检验系统A型的电解质分析模块(IMARA)、生化分析模块(SP4430)与日本OLYMPUSAU5421全自动生化分析仪、BH5500S微量元素原子吸收光谱检测仪对200例标本K+、Na+、iCa2+、GLU、CREA、UA、ALT、ALB、TBIL、LDH、AMS进行平行测定,并对检测结果分别进行比较分析。结果:分析表明不同仪器所测K+、Na+、iCa2+、GLU、UA、ALB的结果差异无统计学意义,而CREA、ALT、TBIL、LDH和AMS所测结果其差异有统计学意义(t=114.247,t=64.229,t=37.568,t=27.708,t=66.841;P〈0.01)。所有11项检测结果的相关性系数均〉0.90。结论:倍肯野战(应急)快速检验系统A型中的电解质、生化分析模块与常规实验室生化分析仪检测结果相关性良好,由于检测方法不同,部分结果差异较大,但仍然具有可比性。 相似文献