家族性急性髓系白血病差异表达基因的筛选

目的 建立简便可靠的非同位紊杂交筛选方法,筛选家族性急性髓系白血病cDNA消减文库中的差异表达基因.方法 用地高辛(DIG)标记消减文库cDNA作为探针,通过差异筛选技术进行差异表达片段的筛选,杂交阳性结果经RT-PCR再度验证.结果 DIG标记探针浓度为250～500 pg/μL,效率为48%～96%,并且杂交信号清晰,重现性好.应用DIG标记探针改良的差异筛选技术所得到的阳性结果经RT-PCR验证符合率达到86%.结论 采用DIG标记探针具有高度的灵敏度和良好的特异性,可避免放射性污染,简化实验操作,可作为替代同位素32P-dCTP标记探针的方法.     

儿童糖尿病酮症酸中毒15例临床分析

目的 分析总结儿童糖尿病酮症酸中毒临床特点及治疗措施,为其防治提供临床经验.方法 采用回顾性分析的方法对2004年1月至2011年12月福建省妇幼保健院PICU收治的15例糖尿病酮症酸中毒患儿的临床症状、实验室检查及治疗方案进行分析.结果 男9例,女6例,年龄＜2岁10例(66.7％),～5岁2例(13.3％),～10岁3例(20.0％).起病始发症状以多尿、多饮、多食伴消瘦的典型病例仅3例,呼吸道感染6例,腹泻6例.15例患儿均有脱水体征,14例出现呼吸深大或不规则,呕吐6例,抽搐7例,脑水肿6例.辅助检查有白细胞计数异常(14例升高,1例减低),尿酮体阳性,pH减低,血糖升高,血钠减低(11例).脑水肿6例,心电图改变4例,脑电图异常9例,肺炎支原体感染2例,甲型H1N1流感感染l例.15例全部收入PICU,给予液体复苏,普通胰岛素持续静脉滴注,7例给予碳酸氢钠,6例给予甘露醇.15例患儿全部好转或痊愈出院,尿酮体转阴时间18～96 h,平均51h.结论 儿童糖尿病酮症酸中毒进展迅速,病死率高,早期给予适度液体复苏、合理胰岛素、合理补碱等综合治疗是提高救治成功率的关键.     

前清蛋白在重症肺炎支原体肺炎患儿中的临床意义

目的分析重症肺炎支原体肺炎(MPP)患儿血浆前清蛋白与临床指标的关系,探讨检测血浆前清蛋白在重症MPP中的临床意义。方法选取2015年1月至2018年3月福建省妇幼保健院儿科重症监护病房收治符合重症MPP诊断标准的患儿,收集患儿一般资料和实验室检查指标,进行统计学分析。结果1.最终符合标准185例患儿,根据三代儿童死亡评分分为低危组(0~<5分)138例,高危组(≥5分)47例。Logistic回归分析显示,机械通气(OR=5.397,95%CI:2.139~13.622,P=0.000)、前清蛋白水平(OR=0.928,95%CI:-0.869~0.990,P=0.023)与三代儿童死亡评分有关。2.受试者工作特征曲线(ROC)确定前清蛋白的临界点为14.16 g/L。根据前清蛋白的临界点进行分组比较,结果发现前清蛋白越低,住院时间>10 d(62.5%比44.6%)、机械通气(31.3%比12.4%)、小儿危重症评分<80分的比例(21.9%比9.92%)和三代儿童死亡评分预估病死率[8.02%(0.48%~88.12%)比1.81%(0.41%~31.69%)]越高,差异均有统计学意义(P=0.030、0.003、0.043,P<0.001)。结论血浆前清蛋白水平可反映重症MPP的严重程度,提示血浆前清蛋白水平有可能成为预警重症MPP进展的客观指标之一。     

Citrin缺陷导致新生儿胆汁淤积症15例分析

目的探讨Citrin缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症（NICCD）患儿的临床表现和实验室检查特点,为早期诊断提供依据。方法采用回顾性研究方法,对15例确诊为NICCD患儿的临床表现及常规实验室检查、血串联质谱、尿气相色谱质谱的结果进行分析。结果 NICCD患儿具有黄疸、肝大、和（或）排淡黄色大便等胆汁淤积临床表现。实验室改变包括γ-谷氨酰转移酶、碱性磷酸酶等胆道系统酶、胆汁酸以及甲胎蛋白明显升高;谷丙转氨酶及谷草转氨酶等肝酶可正常或仅轻度升高;血胆红素升高（以直接或间接胆红素升高为主,但差异不明显）,伴有低蛋白血症、低血糖和凝血酶原时间延长。血串联质谱分析多数患儿甲硫氨酸、瓜氨酸、苏氨酸和酪氨酸明显升高,以及C14、C16和C18∶2肉碱升高。尿气相色谱质谱有机酸分析多数有尿4-羟基苯丙酮酸、4-羟基苯乙酸和4-羟基苯乳酸升高。结论对不明原因黄疸患儿,可以部分异常实验指标为线索,并结合血串联质谱及尿气相色谱质谱分析对NICCD做出早期诊断。     

信息动态

目的 探讨非疫区儿童布氏菌病临床特点及诊治经验,以提高认识,更好预防和治疗该病.方法 报道非疫区儿童布氏菌病1例,并结合国内近20年来已报道的168例进行临床分析.结果 169例患儿大多数系患儿通过接触病畜(羊),进食未经充分烹饪羊肉(涮、烤)及饮用生乳而被感染发病,6例无明确羊、牛等接触史,1例系饮用污染的母乳.最常见的症状为发热162例(95.6％),关节疼痛55例(32.5％),多汗91例(53.8％),呼吸道症状41例(24.3％),消化道症状40例(23.7％),肝脾肿大72例(42.6％).实验室检查发现贫血34例(20.1％),白细胞减少11例(6.5％),血小板减少7例(4.1％);38例患儿存在肝功能损害(22.5％),4例血培养阳性(2.4％),1例关节液培养阳性(0.6％),脑脊液检查:2例神经系统并发症(1.2％).影像学检查:2例出现肺炎(1.2％),12例出现支气管炎(7.1％),1例发现胸腔积液(0.6％),1例发现腹腔积液(0.6％).169例中,经治疗除4例外,其他均好转或痊愈.结论 儿童布氏菌病累及多系统,症状多样,临床少见.最优化的治疗目前仍不明确,联合、足疗程的抗生素治疗儿童布氏菌病是有效的.对于长期发热、关节痛、肝脾肿大的非疫区儿童患者,要警惕布氏菌病.     

儿童肺炎支原体感染并心力衰竭的高危因素北大核心CSCD

目的探讨儿童肺炎支原体感染并心力衰竭的高危因素。方法选取2014年1月至2017年10月福建省妇幼保健院儿科重症监护病房收治的肺炎支原体感染并心力衰竭患儿33例（病例组）,男15例,女18例;年龄3个月-8岁。选取福建省妇幼保健院同时期普通病房临床资料完整符合肺炎支原体感染的66例患儿作为对照组,男32例,女34例;年龄1个月-8岁。比较2组患儿一般资料及实验室检查指标,采用多因素Logistic回归分析方法分析儿童肺炎支原体感染并心力衰竭的高危因素。结果1．2组间热程、白细胞计数、血小板计数和咳嗽、肺部啰音、发热、异常心电图及肺部大片影比例间比较差异均无统计学意义（均P〉0.05）。2.与对照组比较,病例组发热到用大环内酯类药物时间（天数）更长（5.27 d比4.09 d）,血红蛋白、前清蛋白水平更低,C反应蛋白、乳酸脱氢酶、肌酸激酶同工酶（CK-MB）水平更高,差异均有统计学意义（均P〈0.05）;病例组与对照组合并2种及以上病原菌感染的比例比较差异有统计学意义（45.5%比18.1%,χ^2=8.250,P=0.004）。3.多因素分析显示,血红蛋白（OR=0.875,95%CI：0.793-0.965,Wald χ^2=7.167,P〈0.01）、前清蛋白（OR=0.567,95%CI：0.372-0.863,Wald χ^2=6.998,P〈0.01）、乳酸脱氢酶（OR=1.030,95%CI：1.010-1.051,Wald χ^2=8.651,P〈0.01）水平与儿童肺炎支原体感染合并心力衰竭有关。结论血红蛋白、前清蛋白、乳酸脱氢酶变化是肺炎支原体感染并心力衰竭的高危因素之一。     

一条家族性急性髓系白血病相关新基因ELF2C的生物信息学分析

目的利用生物信息学技术对新克隆的家族性急性髓系白血病相关新基因ELF2C和其蛋白序列进行分析,初步探讨其功能。方法以人类基因组数据库为基础,利用生物信息学程序预测ELF2C的基因结构、染色体定位、编码蛋白质的理化性质、亚细胞定位、蛋白质功能域等。结果ELF2C基因定位于4q31．1,全长2257bp,含有432bp的开放阅读框,可编码143氨基酸的蛋白质,且编码蛋白定位于核内,具有多个修饰位点和功能基序,是一个功能活跃的蛋白质。结论ELF2C基因可能是在家族性急性髓系白血病发生发展中具有生物功能的一条全长新基因。     

重症肺炎支原体肺炎患儿临床特征与儿童危重病例评分的相关性分析

目的探讨重症肺炎支原体肺炎(MPP)患儿临床特征与儿童危重病例评分(PICS)的相关性。方法纳入2014年1月至2015年12月福建省妇幼保健院PICU住院的重症MPP患儿,根据PICS分为极危重组(70分)、危重组(~80分)和非危重组(80分),从病史中截取年龄、性别、发热时间,入院48 h内实验室检查指标,ECG和胸部X线和CT描述。对上述指标行3组间的单因素分析,对有统计学意义的指标进一步行多因素Logistic回归分析,分析其临床特征与PICS的相关性。结果 114例重症MPP患儿进入本文分析,男61例,女53例。合并心血管系统损害29例,消化系统损害23例,神经系统损害18例,血液系统损害27例。非危重组77例,危重组30例,极危重组7例,3组年龄、性别构成差异无统计学意义。3组异常ECG比例、合并2个及以上系统损害比例、合并2种及以上病原感染、病程12 d比例、前白蛋白、D-二聚体水平差异均有统计学意义。多因素分析显示,合并2种及以上病原感染比例(OR=7.147,95%CI:1.435~35.59)、D-二聚体水平(OR=1.507,95%CI:1.054~2.156)与PICS呈正相关,前白蛋白水平与PICS呈负相关(OR=0.914,95%CI:0.845~0.990)。结论儿童重症MPP合并2种及以上病原感染、D-二聚体、前白蛋白水平和PICS相关。     

cDNA末端快速扩增技术及其在血液疾病上的应用

克隆新基因及获得其cDNA全长是现代生命科学中研究基因功能的重要前提。以PCR为基础的cDNA末端快速扩增(RACE)技术是一种简单、敏感且有效扩增cDNA全长的方法。该文主要概述RACE技术的原理、进展及其在血液疾病基因克隆方面的应用。     

家族性急性髓系白血病相关新基因FAMLF cDNA全长的克隆及其生物功能分析

目的 克隆家族性急性髓系白血病(AML)相关新基因cDNA全长,在分子水平上探讨急性白血病发生发展的机制.方法 以构建的家族性AML抑制性消减文库中1个有差异表达的新基因EST序列zywb87(GenBank注册号CV973101)为基础,应用cDNA末端快速扩增法(RACE)克隆其全长cDNA,应用生物信息学对其功能进行初步分析,应用一步法半定量RT-PCR检测其在AML患者及正常人中的表达.结果 获得了家族性AML相关新基因FAMLF的cDNA全长,该基因定位于染色体lq31.3,cDNA全长2313 bp,开放读码框(ORF)为249 bp,编码82个氨基酸的蛋白质,含有信号肽,富含亮氨酸重复单位(LRR_SD22),内在固有无序结构域等功能区.Blast检索为功能未知的新基因,已被GenBank收录,并命名为FAMLF,核酸注册号为EF413001,蛋白质注册号为ABN58747.新基因FAMLF在AML患者中的表达明显高于正常人,差异有统计学意义(2.61±0.66 vs 0.97±0.51,P<0.01).结论 成功获得一个家族性AML相关新基因FAMLF cDNA全长,FAMLF基因在AML中高表达,可能是具有一定生物功能的新基因.