女性膀胱颈梗阻12例临床分析

目的探讨女性膀胱颈梗阻的临床诊断与治疗。方法对12例女性膀胱颈梗阻的临床资料进行回顾性分析。结果2例定期行尿道扩张术，10例行经尿道膀胱颈电切术（TUR）。临床效果满意。结论膀胱尿道镜是诊断该病的主要手段。病理检查是诊断的主要依据，TUR是其有效的治疗方法。     

抗人卵巢癌×抗人CD3×抗CD28VH单链三特异抗体的胞内可溶表达、纯化及体外活性测定

目的　研究抗人卵巢癌 (ovariancarcinoma ,oc)×抗人CD3×抗CD2 8VH 单链三特异抗体(singlechaintrispecificantibody,scTsAb)在大肠杆菌中的可溶表达与纯化及纯化后产物的活性测定 ,从而为其应用于卵巢癌治疗的临床研究打下基础。方法　将已构建的scTsAb表达载体转化大肠杆菌BL2 1(DE3)Star菌株 ,采用低温 (30℃ )、低剂量IPTG(0 .2mmol L)诱导 ,进行胞内可溶表达。根据抗卵巢癌三特异抗体 (ocTsAb)等电点较高 (pI9.0 ) ,而菌体蛋白大多为酸性蛋白的特点 ,利用DEAE弱阴离子交换层析(pH8.0 )进行一步纯化 ,并利用ELISA及FACS的方法检测纯化后抗卵巢癌三特异抗体的活性。结果　(1)SDS PAGE鉴定低温诱导时可溶比例达到 5 6 %。 (2 )绝大多数菌体蛋白被DEAE层析柱吸附 ,而抗卵巢癌三特异抗体在穿透液中流出 ,SDS PAGE检测纯度达到 90 %。 (3)ELISA结果显示纯化后的抗卵巢癌三特异抗体与重组CD2 8纯抗原 ,Jurkat(CD3 )细胞膜提取抗原 ,SKOV3细胞膜提取抗原均有特异性结合。 (4 )FACS结果证明纯化后的抗卵巢癌三特异抗体与Jurkat(CD3 )活细胞、SKOV3活细胞有特异性结合。结论　低温诱导胞内可溶表达的抗人卵巢癌×抗人CD3×抗CD2 8VH 单链三特异抗体经弱阴离子交换层析一步纯化后仍保持原有免疫学活性 ,这     

全合成人源单骨架抗体库的构建及初步筛选

全套抗体库为制备抗任意抗原的人源抗体提供了来源,且具有重要的基础研究和应用价值。因此,构建高质量的抗体库一直是抗体工程研究的热点。全合成抗体库技术以其可控性、可操作性强,组成成分明确,设计灵活并能满足高通量筛选的要求等特点,得以迅速发展和广泛应用[1]。随着对抗体结构和功能认识的深入,人们越来越多地利用蛋白质工程手段进行优化设计,来提高抗体库中抗体分子的表达能力和稳定性,通过提高抗体库中功能性抗体的比例,从而有效地提高抗体库的质量。选用经过优化并具有某些特殊性质(如高稳定性、高表达性质)的抗体序列作为骨架,构…     

抗人喉癌单克隆抗体轻链可变区基因的克隆

目的 分离抗人喉癌单克隆抗体LC9-G5轻链可变区（liht chain variable region,VL）基因,并测定分析其核苷酸序列.方法 使用PCR方法体外扩增抗人喉癌单克隆抗体LC9-G5 VL基因,将其克隆入PMD18-T载体,重组子测序,将其序列使用数据库NCBI和Kabat进行分析.结果 这段序列与小鼠卵巢癌抗体VL基因的同源性为99%,基因全长336 bp,属于小鼠免疫球蛋白轻链第Ⅱ亚类,该VL基因序列已被Gene Bank收录,收录号为U60463.结论 该基因为抗人喉癌单克隆抗体LC9-G5轻链可变区基因.     

中和抗体在新型冠状病毒肺炎治疗中的重要意义:进展与展望

SARS-CoV-2感染是对全世界人类生命和健康的一大严重威胁,新型冠状病毒肺炎是由SARS-CoV-2感染引起的全球流行病.SARS-CoV-2病毒具有高度的传染性、诡异性和多变性.因此,新型冠状病毒肺炎的治疗是紧迫且有针对性的.然而,疫苗和目前使用的药物一般不具有上述特点.虽然新型冠状病毒肺炎的恢复期血浆在危重患者...     

核糖体展示技术的原理与应用

通过构建分子文库 (ｃＤＮＡ文库、随机肽库、抗体库及其它蛋白文库 ) ,采用合适的筛选技术可以非常方便、有效、快速地筛选生物活性物质。目前分子文库技术已经广泛应用于抗原表位分析、功能小肽分子 (如肽类拮抗剂和激动剂 )或功能蛋白分子 (如抗体 )的筛选和改造等领域。筛选技术主要有两类 :1.体内筛选技术 ,如噬菌体展示技术〔1〕 、选择性感染噬菌体技术〔2〕 等。 2 .体外筛选技术 ,如核糖体展示技术〔3〕。噬菌体展示技术是应用最为广泛的一种筛选技术 ,但其自身无法克服的缺点给具体应用造成了许多障碍。以噬菌体抗体库为例 ,由于…     

什么时候的精子质量高

生活实例 陶先生（丈夫）： 以前一直忙于事业。没有时间考虑要孩子的事。现在我已经30多岁了，事业上终于比较稳定，也想生个健康聪明的孩子，这样将来也比较省心。我想请教专家：什么情况下射出的精子质量高呢。     

基于UPLC-Q-TOF-MS和网络药理学探讨黄精糕干预2型糖尿病的作用机制

目的 运用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱（ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole timeof-flight mass spectrometry, UPLC-Q-TOF-MS）和网络药理学,并采用动物实验验证,探讨黄精糕干预2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus, T2DM）的作用机制,为产品开发提供依据。方法 采用UPLC-Q-TOF-MS分析黄精糕化学成分,网络药理学预测其干预T2DM的作用靶点与通路。将72只大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、二甲双胍组（112.5 mg/kg）及黄精糕低（2.7 g/kg）、中（5.4 g/kg）、高（10.8 g/kg）剂量组,每组12只。1日1次,连续给药30 d。除正常组外,其余大鼠参照保健食品“辅助降血糖功能评价方法”中的方案,采用高脂高糖饮食联合链脲佐菌素（streptozotocin, STZ）诱导T2DM大鼠模型。造模成功后,每隔1周大鼠尾静脉针刺采血测定血糖,末次给药后酶标仪比色法检测血清胰岛素、低密度脂蛋白胆固醇（low de...     

高血压急症的院前急救

在院前急救中,高血压急症是我们经常遇到并需紧急处理的.本文对30例高血压急症患者给予硝酸甘油,硝苯地平(心痛定)舌下含服,疗效显著,报告如下.     

抗人卵巢癌-抗人CD3单链双特异性抗体体外介导的细胞毒作用及其机制

目的了解抗人卵巢癌-抗人CD3（BHL—I）单链双特异性抗体（scBsAb）体外介导的外周血淋巴细胞（PBL）对靶细胞SKOV3的细胞毒作用及可能的机制。方法二苯基溴化四氮唑蓝（MTr）法检测BHL-I体外介导PBL对SKOV3细胞的杀伤作用；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测BHL—I介导的细胞毒作用过程中效应细胞PBL对穿孔素（perforin）、颗粒酶（GrB）mRNA表达的影响；酶联免疫吸附（ELISA）法检测细胞培养上清液中人肿瘤坏死因子-α（hTNF—α）和人干扰素-γ（hIFN-γ）含量的变化。结果BHL-I体外介导PBL对SKOV3细胞的细胞毒作用显著高于对MCF-7细胞的作用（P〈0.01），并且在效靶比为12．5：1、作用时间为36h、BHL-I浓度为25μg/ml时，PBL对靶细胞的细胞毒作用最为显著；BHL—I体外介导的细胞毒作用中，PBL表达perforin、GrBmRNA及混合细胞培养上清液中hTNF—α和hIFN-γ的含量均显著升高，并且白介素2（IL-2）的存在有利于这些因子的表达。结论BHL—I介导PBL对靶细胞的细胞毒作用具有一定的特异性，并且IL-2能增强BHL—I介导PBL的细胞毒作用。