角膜基质细胞体外长期培养过程中生物学特性的改变

目的 研究兔角膜基质细胞在体外长期培养传代过程中,细胞增殖能力和胞外基质表达水平的改变。方法 取体外培养兔角膜基质细胞,由光镜对各代细胞的形态学变化进行观测。通过对各代细胞生长曲线的绘制,得出其各自的群体倍增时间;MTT法比较各代细胞增殖能力的改变。RT-PCR和Western杂交检测各代细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原表达水平的改变;爱茜蓝法检测糖胺聚糖(GAG)的含量。结果 体外培养兔角膜基质细胞随着传代的进程,逐渐显现衰老的形态特征。细胞群体倍增时间由第7代起显著延长(P<0.01);MTT比色法的结果亦显示,第7代细胞的增殖能力开始大幅下降(P<0.01)。第9-11代时,Ⅰ、Ⅲ型胶原在mRNA和蛋白水平的表达都有明显减少(P<0.01),降至第1代细胞的30％左右;GAG的含量也降至40％左右。结论 兔角膜基质细胞经历长期体外培养后,细胞增殖能力和胞外基质表达水平显著下降,逐渐丧失原有的功能。但作为构建组织工程化角膜的种子细胞,在它的生物学特性未发生改变之前,经3次传代培养,获取的细胞量达到组织块消化所得细胞的240倍左右,已足以用于构建之用。     

老年难治性鼻出血20例分析

<正>难治性鼻出血又称顽固性鼻出血,因不能准确找到出血点,治疗效果往往不理想,尤其老年患者多合并全身其他系统疾病,治疗更为棘手。我科自2000年10月至2006年5月对老年难治性鼻出血患者20例,经鼻内镜行手术治疗取得满意效果,现报告如下:     

急性心肌梗死后心律失常发生的时间及治疗分析

随着社会老龄化的到来，冠心病的发病率越来越高，急性心肌梗死(AMI)的病死率也逐年增高，急性心肌梗死常并发的心律失常是造成患者死亡的常见原因，心律失常与梗死的发生时间、部位和范围有关。为探索急性心肌梗死后心律失常发生的时间规律，降低患者病死率，现对我院心内科收治急性心肌梗死后心律失常的患者，进行回顾性分析，以便尽早采取积极有效的防治措施，减少急性心肌梗死及其心律失常的发生。     

维持性血液透析患者高血压的护理措施

维持性血液透析 (ＨＤ)是慢性肾功衰竭患者一项安全有效的治疗措施。高血压是血透患者常见的并发症。伴有高血压其发生心衰、脑血管病变明显高于无高血压透析患者。因此 ,高血压直接影响着透析患者的存活率。为使患者顺利进行ＨＤ治疗 ,提高生活质量和存活率 ,现将透析患者高血     

建立一种用重组蛋白检测抗口蹄疫病毒抗体的间接ELISA方法

目的研究以重组蛋白作为包被抗原检测口蹄疫病毒（FMDV）感染后的动物血清中特异性抗体的可能性,为建立一种非病毒颗粒的ELISA检测试剂盒提供实验依据。方法利用自行构建表达的O型口蹄疫病毒VP1表位肽重组蛋白（VP1epi）作为包被抗原,采用间接ELISA方法确定抗原的最佳工作浓度和包被方法,优化各项实验条件,并以FMDV感染后的豚鼠血清作为标准阳性血清确定ELISA方法的特异性和灵敏度。结果FMDV感染后的阳性豚鼠血清可以很好地识别VP1epi重组蛋白,用此蛋白包被检测抗FMDV抗体的灵敏度可达1∶3200,并证明所检测的抗体是FMDV特异性的。结论VP1epi重组蛋白可以替代FMDV颗粒用于建立检测抗FMDV抗体的ELISA试剂盒。     

云南省HIV-1 CRF01AE毒株分子网络分析

目的了解云南省HIV-1 CRF01_AE毒株的分子网络特征及相关影响因素。方法收集2018—2021年云南省耐药监测数据库中HIV/AIDS患者的人口学资料, 采集患者血浆, 逆转录聚合酶链反应扩增HIV-1pol基因蛋白酶和逆转录酶区并进行序列测定, 选择最适基因距离, 基于基因型为CRF01_AE的序列构建分子网络。结果通过序列测定共获得967余CRF01_AE亚型毒株序列, 在1.75%最适基因距离阈值下, 共有320条序列进入网络, 入网率为33.1%, 共鉴别出84个簇。在地区分布网络中形成1个多地区连接的簇, 1个以昭通为主的簇, 1个以红河为主的簇以及5个以文山为主的簇。网络中75.8%异性传播的男性与其他异性传播的男性连接, 其次与异性传播的女性连接(54.1%)。66.7%的男男同性性行为人群(MSM)之间存在潜在传播关联。入网影响因素分析结果显示, 与昆明市比较, 楚雄州、大理州、德宏州、红河州、临沧市、普洱市、文山州、玉溪市以及昭通市的HIV/AIDS患者更容易进入网络。年龄≥50岁人群较<25岁...     

子宫肌瘤行米非司酮治疗的剂量选择与效果评估

目的:探究子宫肌瘤行米非司酮治疗的剂量选择与效果评估。方法:选取海南西部中心医院2013年5月至2016年5月收治的84例子宫肌瘤患者,将患者随机分成两组,每组42例,一组为观察组,采用小剂量治疗,每日服用12mg米非司酮。另一组为对照组,采用大剂量治疗,每日服用24mg米非司酮。观察两组患者的治疗效果。结果:观察组患者用药后的总有效率为90. 48%,对照组为85. 71%,观察组略优于对照组,两组数据差异无统计学意义(P 0. 05)。观察组患者不良反应的发生率为9. 52%,明显低于对照组患者28. 57%,两组数据差异具有统计学意义(P 0. 05)。治疗前两组患者的各血清激素水平差异无统计学意义(P 0. 05),治疗后都有下降,观察组明显对照组低,数据差异具有统计学意义(P 0. 05)。治疗前两组患者的肌瘤体积差异无统计学意义(P 0. 05),治疗后肌瘤体积都有下降,观察组明显小于对照组,两组数据差异具有统计学意义(P 0. 05)。结论:子宫肌瘤患者采用低剂量米非司酮治疗有更好的效果,患者的不良反应能够有效降低,而且能够更好地缩小肌瘤体积,提高安全性,促进患者的治疗。     

超脉冲CO2点阵激光辅助中药苦参油膏治疗增生性瘢痕的临床疗效观察

目的探讨超脉冲CO₂点阵激光辅助中药苦参油膏治疗增生性瘢痕的临床疗效。方法选取增生性瘢痕患者72例,随机分为对照组和研究组,每组各36例。对照组采用CO₂点阵激光治疗,冷敷冷疗后直接包扎,研究组在此基础上配合中药苦参油膏外敷,观察疗效和不良反应情况,比较两组患者疼痛指数、创面愈合时间、温哥华瘢痕量表(VSS)评分以及治疗后色沉发生率。结果每次治疗后研究组疼痛指数评分及创面愈合时间均低于对照组(P<0.05)。治疗前两组患者VSS评分无统计学差异(P>0.05);治疗后2个月和6个月时,研究组VSS评分均明显小于对照组(P<0.05)。研究组色沉发生率38.88%,明显低于对照组的72.22%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论超脉冲CO₂点阵激光辅助中药苦参油膏治疗增生性瘢痕,可明显降低疼痛指数和VSS评分,缩短创面愈合时间,且不良反应较少,值得临床推广应用。     

谷氨酰胺对大鼠肠缺血再灌注损伤后闭合蛋白的保护作用

目的:探讨谷氨酰胺(Gln)对大鼠肠缺血再灌注损伤后闭合蛋白(occludin)的保护作用及其可能机制。方法:成年雄性Wistar大鼠30只随机分为假手术组(sham组)、缺血再灌注损伤组(I/R组)和谷氨酰胺预处理组(Gln组)。Gln组给予谷氨酰胺1 g·kg-1·d-1连续灌胃7 d。Sham组和I/R组以同等剂量生理盐水灌胃7d。Sham组仅分离肠系膜上动脉而根部不夹闭。I/R组和Gln组均用无损伤血管夹夹闭SMA根部30 min后放松血管夹形成再灌注损伤模型。各组大鼠均于制模后24 h采集静脉血和回肠标本。酶联免疫吸附试验检测血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-10和IL-2水平。全自动生化仪检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平。免疫组化及Western blotting法检测occludin蛋白的表达情况。结果:I/R组occludin蛋白表达明显低于正常对照组及谷氨酰胺处理组(P0.05);I/R组TNF-α和MDA水平均高于sham组和Gln组(P0.05)。I/R组血清的SOD活力、GSH、GSH-Px、IL-10和IL-2均低于sham组和Gln组(P0.05)。结论:谷氨酰胺对肠缺血再灌注损伤后的occludin蛋白具有保护作用,其机制可能与抑制炎症反应、抗氧化应激有关。