葛根总黄酮提取工艺优化研究

目的优选葛根总黄酮的最佳提取工艺。方法以乙醇为提取溶剂,正交试验L9（3^4）设计对提取溶剂浓度,提取时间和料液比进行考察;选用特征峰图谱方法所测得的特征峰面积总和、葛根素转移率和固体含量作为评价指标,计算综合得分,以最终得分确定葛根总黄酮的最佳工艺条件。结果影响葛根总黄酮提取的主要因素是溶剂浓度,其次是提取时间,再次是料液比,最佳提取工艺为A2B3C2D2,即,乙醇浓度70%,提取时间3 h,提取次数2次,料液比为1∶8。结论验证试验表明最佳工艺下总黄酮提取率稳定,提取率高,提取工艺合理可行。     

郁金醇提取物对过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤的保护作用

目的:探讨郁金醇提取物(CR)对过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化应激损伤的保护作用.方法:HUVEC细胞培养在含10％胎牛血清的Dulbecco's Modified Essential Medium (DMEM)培养基中.建立过氧化氢诱导HUVEC细胞(104细胞/mL)的氧化应激损伤模型.实验分为正常对照组、800μmol·L-1过氧化氢模型组、100 mg·L-1CR+ 800 μmol·L-1过氧化氢组、50 mg·L-1CR+ 800 μmol·L-1过氧化氢组、25 mg·L-1CR+ 800 μmol·L-1过氧化氢组,0.1 mmol·L-1阳性对照维生素E(VE)组.细胞给予药物处理48 h后,分别测定培养液中的超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性以及丙二醛(MDA)的含量.细胞以超氧化物阴离子荧光探针二氢乙锭(DHE)处理,荧光显微镜下测定荧光强度,评价细胞内活性氧(ROS)的生成.结果:800.μmol·L-1过氧化氢与正常组相比,显著下调SOD活性[(87.65±7.82),(110.57±10.32)nU·mg-1],增加MDA含量[(19.72±3.68),(12.04 ±2.33) nmol·mg-1]和LDH活性[(6.93±0.27),(3.62 ±0.42) U·nmg-1]以及ROS产物[(119.47±2.46)％,(100.00±5.73)％,(P＜0.01)];与模型组相比,100,50,25 mg·L-1CR能显著提高SOD活性[(109.39 ±5.28),(101.43±6.41),(96.37 ±8.03) nU·mg-1],下调MDA含量[(12.47±1.90),(14.51±2.08),(16.88±2.15)nmol·mg-1],下调LDH活性[(3.77±0.53),(4.68±0.63),(5.74 ±0.49) U·mg-1],降低ROS产物(P＜0.01).结论:郁金醇提取物具有抗氧化应激活性,对内皮损伤具有保护作用.     

不同产地黄芪总黄酮HPLC指纹图谱研究

目的:建立黄芪总黄酮的HPLC指纹图谱分析方法,评价不同来源药材的质量.方法:采用二极管阵列检测器,色谱柱为AglientExtend C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.2％甲酸水溶液(B),梯度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长为280nm.结果:建立14个共有特征峰的HPLC指纹图谱,方法学考察结果符合指纹图谱技术要求.结论:该方法稳定可靠、重复性好,可结合含量测定用于全面控制黄芪的质量.     

不同产地桑白皮HPLC的指纹图谱的研究

目的 建立简单可行的桑白皮药材指纹图谱方法.方法 采用高效液相色谱法,Agilent Extend-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相:以乙腈-0.2%甲酸进行梯度洗脱,流速:1 mL·min-1,柱温:30℃,检测波长:280 nm,进样量为10μL.结果 用梯度洗脱得到的色谱图中各色谱峰分离较好,达到指纹图谱分析的效果.结论 该方法重复性好、检测方法简便,可为桑白皮指纹图谱的质量控制提供依据.     

桑白皮多糖提取工艺正交试验优化研究

目的优选桑白皮多糖最佳提取工艺。方法采用正交试验设计,以提取次数、提取时间及醇沉浓度作为工艺因素,每个因素采用3个水平,选择L9（34）正交表进行试验,同时用硫酸-苯酚法测定桑白皮多糖的含量作为评价指标。结果桑白皮多糖的最佳提取工艺为超声提取30 min,提取2次,醇沉浓度为80%。结论优选的工艺多糖提取率稳定,提取率高,提取工艺合理可行。     

不同产地夏枯草中抗非小细胞肺癌成分科罗索酸的差异比较

目的:比较不同产地夏枯草中抗非小细胞肺癌活性成分科罗索酸的含量差异。方法:通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)和吖啶橙(AO)/溴化乙啶(EB),评价科罗索酸对非小细胞肺癌细胞的增殖抑制以及凋亡作用;建立高效液相色谱法,比较14个产地夏枯草中科罗索酸的含量差异。结果:科罗索酸抑制SPC-A-1人非小细胞肺癌的生长增殖(IC50=1.05×10-6mol/L),并且诱导SPC-A-1细胞凋亡。14个产地夏枯草中科罗索酸的含量差异较大,山西产地的含量最高,河南-2产地的含量最低。结论:科罗索酸为夏枯草中的抗非小细胞肺癌的活性成分,不同产地夏枯草的科罗索酸含量差异较大。     

醋酸群勃龙注射剂的制备及质量控制

目的制备醋酸群勃龙注射液并建立其质量控制方法。方法以醋酸群勃龙为主药,大豆油、苄基苯甲酸酯、苯甲醇为辅料制备注射剂;采用HPLC法测定醋酸群勃龙的含量,并考察其稳定性。结果所得制剂为淡黄色油状液体,鉴别、检查均符合2010年版《中国药典》的相关规定;醋酸群勃龙HPLC分析的线性范围为0.630～3.150μg(R2=0.9996);平均回收率为100.34%(RSD=1.06%);室温在暗处放置6个月,样品各检查指标均未见明显变化。结论本制剂制备工艺简便可行,质量稳定可控。     

正交试验优化板蓝根总生物碱的提取工艺

目的:优选板蓝根中总生物碱的超声提取工艺.方法:以总生物碱提取量为指标,采用L9(34)正交试验考察乙醇体积分数、超声时间,料液比对提取工艺的影响,确定最佳提取工艺.结果:各因素对超声提取工艺的影响顺序为乙醇体积分数＞超声时间＞料液比;最佳提取工艺为乙醇体积分数80％,提取时间20 min,料液比1∶10.结论:优选的提取工艺稳定可行,提取率高.     

葛根素自微乳在大鼠体内药代动力学分析

目的:考察葛根素自微乳在大鼠体内的血药浓度经时过程,评价葛根素自微乳的药代动力学及相对生物利用度。方法:单剂量给予大鼠葛根素自微乳和葛根素混悬液,采用HPLC测定血浆中葛根素质量浓度,检测波长250 nm,流动相甲醇(A)-0.1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0~30 min,20%~25%A;30~40 min,25%~40%A;40~50 min,40%A),运用DAS2.1.1程序拟合药物浓度-时间曲线,计算药代动力学参数及生物利用度。结果:葛根素自微乳和混悬液的tmax分别为0.71,1.1 h,Cmax分别为2.052,1.120 mg·L-1,AUC0-24 h依次为2.901,2.013 mg·h·L-1,葛根素自微乳相对于混悬液的生物利用度144.11%。结论:与葛根素混悬液相比,葛根素自微乳能显著提高葛根素在大鼠体内的生物利用度。