端粒酶核酶hTERT 5''RZ时辰治疗人肝癌裸鼠移植瘤

我们在既往的研究中 ,为探讨肝癌裸鼠移植瘤细胞DNA合成与端粒酶表达的生物节律 ,在时辰同步化裸鼠中构建了肝癌细胞SMMC 772 1裸鼠移植瘤。继续在程控光照条件下饲养 ,于光照后 3,6 ,9,1 2 ,1 5 ,1 8,2 1小时取样 ,用流式细胞仪测定各时期细胞DNA含量 ,细胞周期分布及端粒酶活性水平。结果 ,肝癌裸鼠移植瘤细胞DNA合成随昼夜节律变化 ,且伴随端粒酶活性的同步节律变化 ,均在光照后 2 1小时达高峰 ,光照后 9小时处于低谷 ;节律周期呈余弦分布。表明 ,肝癌裸鼠移植瘤的生长与端粒酶活性表达在静止相达高峰 ,为制定肿瘤时辰化疗方案提…     

汉族人群组织激肽释放酶基因调控序列多态性分析

目的　分析组织激肽释放酶基因 5’端启动子区域多态性在四川地区汉族人群中的分布。方法　应同PCR技术结合等位基因特异寡核苷酸片段分析的方法 (ASO)对 13 2例四川地区健康汉族人的组织激肽释放酶基因用十种探针进行检测 ,分析等位基因频率的分布。结果　组织激肽释放酶基因的A、B、C、D、E、H、K、P的频率分别为 2 2 .7%、9.8%、9.8%、3 .0 %、9.1%、2 3 .1%、16.3 %、6.1%。结论　在我国四川地区的健康汉族人群中 ,该位点确实存在多态性。     

组织激肽释放酶家族、激肽释放酶—激肽原—激肽系统及其重要应用

目前已明确，人组织激肽释放酶基因家族至少由15个基因组成，都定位于19q13．3—13．4，在基因结构、蛋白水平及三级结构上都有明显同源性。本总结了组织激肽释放酶基因家族、激肽释放酶—激肽原—激肽系统的研究近况，并介绍了其在心血管疾病和肿瘤方面的重要应用。     

时间治疗学的计量研究

以《中国生物医学文献光盘数据库》(CBM)、《中文生物医学期刊文献数据库》(CMCC)和 OVID为数据源 ,全面检索时间治疗学的文献信息 ,利用文献管理软件 Pro Cite5辅助以手工方法对获取的信息进行管理和计量分析 ,以纳入文献的年代、期刊、著者、主题、国别和机构分布等科学和文献计量学指标全面揭示和评价时间治疗学的研究现状和发展趋势。研究结果显示 :时间治疗学的中文文献 91篇 ,分布于 73种期刊中 ,主题分布于中医学、心血管系统疾病、肿瘤、哮喘、消化性溃疡、糖尿病和时间治疗学总论等方面 ;同时纳入来自 35个国家和地区的有关外文文献 4 80篇 ,主要数据来源于 EMBASE和 MEDL INE,分布于 2 85种期刊中 ,收录时间治疗学文献 5篇以上的期刊有 14种 ,著者包括 12位 ,收录时间治疗学文献前 11名的机构分别为鲍尔勃罗斯医院、德州大学、康涅狄格州医学院、日本自治医学院、明尼苏达大学等。有关时间治疗学的研究 ,国内尚处于临床应用初期 ,国外已经形成核心著者、核心期刊和核心研究机构 ,主要分布在欧美等发达国家 ,已经在多个方面取得成绩。     

基因工程的下游技术

基因工程的下游技术是现代生物技术的关键技术，它的重要性已越来越为人们所重视。生物技术产品的下游处理技术包括基因工程产物的分离、纯化及分析鉴定。本综述了基因工程产物的分离、纯化及鉴定的具体方法及鉴定标准。     

组织激肽释放酶基因调控序列多态性与高血压关系的初步分析

目的　初步探讨组织激肽释放酶基因调控序列启动子多态性与中国人原发性高血压 (EH)的相关性。方法　应用PCR技术结合等位基因特异寡核苷酸片段分析 (ASO)方法 ,对 40例EH患者和正常人的组织激肽释放酶基因用A、B两种探针检测 ,比较两组间的等位基因分布频率差异 ,初步分析该SNP位点与高血压的关系。结果　组织激肽释放酶基因A、B型在对照组中频率为 65 %、10 % ,在高血压组中频率为 60 %、10 % ,两组比较有差异 ,但无统计学意义。结论　在中国汉族人群中 ,该基因位点确实有多态性 ;A、B两型均有分布 ,以A型最广     

心元对狗心肌缺血的改善作用研究

心元对心肌缺血引起的心肌收缩力下降和心输出量减少等有改善作用，并抑制缺血所致的血清磷酸酸激酶的升高，减少缺血区组织的范围。     

SERPINA3K原核表达系统的构建及其表达

目的：通过构建丝氨酸蛋白酶抑制因子SERPINA3K的原核表达载体,并将其转化到Rosetta-g ami2感受态细胞中,表达重组SERPINA3K,从而为对其功能的深入研究奠定了基础.方法：以小鼠MS-1细胞cDNA为模板通过PCR的方法扩增Serpina 3k基因的表达全片段,再将其插入到原核表达载体pET-41a中,酶切并测序鉴定重组体.将构建好的重组质粒转化大肠杆菌Rosetta-gami2感受态细胞,表达产物用Western blot鉴定.结果：原核表达载体pET-4 1a-Serpina 3k成功构建,可在大肠杆菌Rosetta-gami2中高效表达,得到重组蛋白SERPINA3K,经Western blot鉴定正确.结论：成功构建SERPINA3K原核表达载体且获得表达,为研究SERPINA3K生物学活性及产品开发提供了实验基础.     

hPeriod1PAS结构域相互作用蛋白的筛选和研究

目的寻找与近日节律系统核心基因Period1（Per1）相互作用的新蛋白,揭示近日节律相关的可能信号通路。方法采用酵母双杂交方法,以人Per1的PAS结构域为诱饵,扫描人下丘脑cDNA文库,并通过体外转录、免疫共沉淀验证蛋白间相互作用;通过RT—PCR检测RACK1（receptors for activated Ckinase）表达的组织特异性及节律性;运用RNAi技术初步研究RACK1与Per1的信号联系。结果人下丘脑区域RACK1蛋白与Per1存在相互作用;RACK1在多器官组织保守表达,但其表达未呈现明显节律性;上调及下调Per1表达,RACK1的RNA水平无显著变化。结论细胞内接头分子RACK1是一种新的Per1作用蛋白,可能介导、调控Per1的功能。     

节律基因mPeriod2过表达对体外Lewis肺癌细胞γ射线敏感性的影响

目的评价mPeriod2(mPer2)基因转染后过表达对小鼠Lew is肺癌细胞(LLCs)60Coγ-射线放射敏感性的影响。方法采用脂质体介导方法将mPer2基因转染至LLC细胞,以空白组及空载体质粒pcD-NA3.1为对照,采用RT-PCR及流式细胞术检测mPer2基因在LLC细胞中的表达,给予60Coγ-射线4Gy单次照射后,流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡,采用增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化、细胞集落形成实验检测细胞增殖及存活情况。结果60Coγ-射线照射后,与转染空载体质粒组及空白组比较,转染mPer2基因细胞表现为G2/M期阻滞,凋亡率下降(contro l:8.10±0.03;pcDNA3.1-vector:11.20±0.07;pcDNA3.1-mPer2:4.40±0.02;P<0.05),细胞克隆形成增加(contro l:14%;pcDNA3.1-vec-tor:11%;pcDNA3.1-mPer2:32%;P<0.01)及PCNA阳性表达增加(contro l: ,pcDNA3.1-vector: ,pcDNA3.1-mPer2: ,P<0.05)。结论节律基因mPer2过表达使60Coγ-射线照射的小鼠Lew is肺癌细胞凋亡下降,细胞增殖明显,降低了该细胞对放射损伤的敏感性。