脂联素在类风湿关节炎中的研究进展

传统认为脂肪组织是无活性的能量储存器官，自1994年瘦素在脂肪组织中被发现以来，这一传统观念被打破。脂肪组织除了具有储存能量的功能外，还是一个复杂的、具有高度生物学活性的内分泌器官，其能够合成并分泌多种蛋白，     

PSORS1C1/CDSN基因多态性与强直性脊柱炎遗传易感性关系的研究

目的 银屑病易感基因1候选基因1(psoriasis susceptibility 1 candidate 1,PSORS1C1,之前的SEEK1)的5’-UTR区域存在角膜锁链蛋白(corneodesmosin,CDSN)基因.本文探讨PSORS1C1/CDSN基因多态性与强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)遗传易感性之间的关系.方法 本研究首先针对PSORS1 C1/CDSN基因区域的16个SNP位点,采用定制的Illumina 96-SNP VeraCode microarray基因芯片,对51例AS患者DNA进行基因分型.初步筛选到AS疾病易感性相关位点后,再使用同样方法增大样本量,对200例AS患者DNA进行基因分型.最后采用Taqman基因分型方法验证两次芯片结果.结果 基因芯片结果表明rs3130983、rs3778638和rs4959053在AS和对照组中等位基因频率和基因型频率有显著差异.Taqman基因分型技术验证了基因芯片结果.说明rs3130983、rs3778638和rs4959053与AS发病有相关性.结论 PSORS1C1和CDSN基因可能是AS的易感基因.     

高表达碳酸酐酶1参与骨化过程的研究

目的 碳酸酐酶1不仅可以催化二氧化碳水化反应,还可以加速碳酸钙的形成,而钙沉淀是新骨形成的重要步骤.本研究以培养细胞为模型探索碳酸酐酶1在骨形成过程中的作用.方法 用成骨诱导培养基(OM)诱导骨肉瘤细胞Saos-2钙化,然后用茜素红染色法观察细胞矿化结节的形成,用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞骨化标志蛋白核心结合蛋白因子2(Runx2)、成骨细胞特异性转录因子(OSX)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素和骨涎蛋白(BSP)的表达.用蛋白印迹法和荧光定量PCR检测细胞钙化前后碳酸酐酶1的表达量的变化.用碳酸酐酶抑制剂乙酰唑胺处理Saos-2细胞,观察细胞钙化过程是否被抑制.2组间比较采用t检验,不同时间点的统计学分析采用重复测量的方差分析.结果 Saos-2 细胞在OM诱导后形成大量矿化结节(0.68±0.03与2.76±0.13,P＜0.01),Runx2、ALP、骨钙素、OSX和BSP 转录水平明显升高,显示OM可诱导Saos-2细胞钙化和骨化.Saos-2细胞钙化后碳酸酐酶1表达明显增高(0.25±0.03与0.94±0.06,P＜0.01).Saos-2细胞经乙酰唑胺处理后,碳酸酐酶1的表达量减少(1.09±0.05与0.55±0.07,P＜0.05),矿化结节形成明显减少(2.76±0.13与2.19±0.07,P＜0.01),骨化标志蛋白的表达也明显下降,说明抑制碳酸酐酶1表达可以抑制Saos-2细胞矿化和骨化过程.结论 碳酸酐酶1在新骨形成过程中起着重要作用.     

维生素D结合蛋白在类风湿关节炎滑膜中表达的研究

目的 本研究通过蛋白质组学的方法比较类风湿关节炎(RA)、骨关节炎及强直性脊柱炎(AS)滑膜组织中表达的蛋白,筛选RA滑膜中表达特异性下调的蛋白,并通过单核苷酸多态性(SNPs)分析方法分析靶蛋白编码基因对RA的遗传易感性.方法 提取RA( 10例)、骨关节炎(10例)及AS(10例)滑膜组织总蛋白,每类疾病的样本等比例混合,然后用2-D凝胶电泳进行分析,对RA样本中表达量明显低于骨关节炎和AS的蛋白进行飞行时间质谱鉴定,检测结果用蛋白印迹法验证.用Taqman方法对中国人群中267例RA患者和160名健康对照的维生素D结合蛋白(VDBP)编码基因的标签SNPs进行基因分型,并扩大样本量(389例RA和371名健康对照)验证分型结果.采用单因素方差分析和Fisher确切概率法进行检验.结果 蛋白质组学研究发现,在RA患者滑膜中VDBP表达量明显下降,蛋白印迹法也验证了这一结果.基因分型研究发现,SNP位点rs2282679与RA密切相关(P=0.026 794).进一步扩大样本实验也得出了一致结果,rs2282679与RA有相关性[比值比(OR )=0.678 639,95％可信区间(CI)0.541 113～0.851 118,P=0.000 776].结论 与骨关节炎和AS患者相比,VDBP在RA患者滑膜中表达量明显下降.VDBP基因上的SNP位点rs2282679与RA有相关性.VDBP在RA中的表达下调及其基因的遗传效应显示VDBP可能参与RA的病理过程.