兔骨髓间充质干细胞的分离培养与鉴定

［摘要］ 目的 寻求一种安全高效的兔骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs )的体外分离培养和鉴定方法。方法 采集兔胫骨骨髓组织,采用全骨髓贴壁培养法体外分离培养和扩增BMSCs;倒置相差显微镜观察细胞,取生长良好的第5代细胞成骨,免疫细胞化学染色和流式细胞术检测细胞表面标志物。结果 原代和传代的 BMSCs 贴壁生长,呈漩涡状排列生长;诱导后碱性磷酸酶活性持续高,有钙结节形成并茜素红染色阳性;CD29、CD44、CD105分子呈阳性, CD45、C-kit、CD34分子呈阴性。结论 成功建立了兔BMSCs 体外分离纯化、培养的有效方法,扩增的 BMSCs 具有多向分化潜能,是理想的组织工程种子细胞。     

2-(咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)乙酸的合成工艺改进

目的改进骨质疏松治疗药米诺膦酸的关键中间体2-(咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)乙酸的合成工艺。方法以反式-4-氧基-2-丁烯酸乙酯和2-氨基吡啶为起始原料,经环合、水解得到2-(咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)乙酸。结果与结论该合成方法首次以纯水替代有机溶剂作为反应溶剂,采用"一锅法"合成目标化合物,降低了该中间体的制备成本,而且环境友好,更适合于工业化生产。     

蛋白精氨酸甲基转移酶5在前列腺癌组织中的表达及其与患者临床病理特征的关系

目的:探讨蛋白精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)在前列腺癌组织中的表达及其与患者临床病理特征的关系。方法:选取行根治性前列腺癌切除术的96例患者为观察组，另选取同期经尿道前列腺电切术的70例良性前列腺增生患者作为对照组，抽取两组患者外周静脉血，并取前列腺组织分别置于4%多聚甲醛和液氮中保存。采用免疫组织化学染色检测组织中PRMT5水平；采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测两组患者组织PRMT5 mRNA水平；采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清PRMT5水平；比较不同前列腺癌病理特征下PRMT5的表达情况；利用Pearson相关性分析比较PRMT5与血清前列腺特异度抗原(PSA)的相关性；利用多因素Logistic回归法分析前列腺癌的风险因素，并采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清PRMT5及PRMT5、PSA联合诊断前列腺癌的效能。结果:观察组PRMT5的表达水平高于对照组(P<0.001);PRMT5表达与前列腺癌患者Gleason评分、微血管侵犯、TNM分期、淋巴结转移以及血清PSA水平有关；Pearson相关性分析显示，PRMT5与PSA的表达水平呈显著正...