丹参酮ⅡA对波动性高糖体外诱导人脐静脉内皮细胞损伤保护作用的机制研究

目的探讨丹参酮ⅡA对波动性高糖诱导人脐静脉内皮细胞株（HUVEC）损伤后丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、Rho/Rho激酶Ⅰ（ROCKⅠ）mRNA含量影响的机制。方法将HUVEC分为6组,正常对照组的培养基中加入5.50 mmol·L^-1葡萄糖200μL,培养48h;损伤组的培养基中先后加入5.50,20.00 mmol·L^-1葡萄糖200μL,培养48h;丹参酮ⅡA低、中、高浓度组在损伤组的基础上,加入10.00,30.00,50.00μg·mL^-1丹参酮ⅡA 200μL,培养48 h;阳性对照组在损伤组的基础上,加入100.00 mg·L^-1维生素C 200μL,培养48 h。比较6组细胞的MDA、SOD、NO、NOS、ROCKⅠmRNA等指标。结果正常对照组、丹参酮ⅡA低、中、高浓度组及阳性对照组的SOD、NO、NOS含量均较损伤组增高,MDA及ROCKⅠmRNA含量均较损伤组降低,但除丹参酮ⅡA低浓度组外,其余差异均有统计学意义（P<0.05）,其中上述指标以丹参酮ⅡA高浓度组最为明显（P<0.05）。结论丹参酮ⅡA对波动性高糖体外诱导的HUVEC损伤有保护作用,可增强其SOD、NO、NOS活性、降低MDA及ROCKⅠmRNA表达,并呈现一定的浓度依赖,其作用机制可能与清除活性氧、降低脂质过氧化、提高内皮细胞抗氧化酶体系的活力,通过Rho/Rho激酶系统抑制NOS表达,进而影响NO分泌等有关。     

低强度脉冲超声波对早中期兔膝骨性关节炎软骨细胞外基质及MAPKs信号通路的影响

目的:研究低强度脉冲超声波(LIPUS)对早中期兔膝骨性关节炎(OA)软骨细胞外基质(ECM)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路的影响,探讨LIPUS对关节软骨损伤修复和延缓退变的作用机制。方法:36只健康新西兰兔随机分成6组,早期对照组(EC组)、早期OA组(EO组)、早期治疗组(ET组)、中期对照组(MC组)、中期OA组(MO组)和中期治疗组(MT组),6只/组。EO、ET、MO及MT组均接受左后肢前交叉韧带切断术(ACLT),对照组仅接受左侧膝关节囊切开术。ET组和MT组分别于术后第3天和第5周起接受LIPUS治疗。超声频率3MHz,强度40mW/cm2,作用时间20min,1次/d,6d/周,持续6周。EO与MO组的LIPUS方案与治疗组相同,但无超声输出。LIDUS6周后,采用甲苯胺蓝染色进行关节软骨的组织学观察,并进行Mankin评分。采用免疫印迹法检测蛋白多糖、Ⅱ型胶原、磷酸化的细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)及p38(p-p38)的变化。结果:③组织学观察及Mankin评分:EO组关节软骨表面不规则、甲苯胺蓝染色变浅、软骨细胞减少,与EC组相比,Mankin评分显著升高(P<0.01);MO组关节软骨损伤明显,Mankin评分较MC组显著升高(P<0.01)。与EO组相比,ET组病理学改变程度轻,Mankin评分显著降低(P<0.01);但MT组Mankin评分较MO组无显著降低(P>0.05)。③Ⅱ型胶原、蛋白多糖检测:与EC组比较,EO组和ET组均下降,但EO组较ET组明显下降(P<0.05);与MC组相比,MO和MT组均显著降低(P<0.05),MO组与MT组间无显著差异(P>0.05)。③p-ERK1/2、p-p38检测:与EC组相比,EO组表达量显著升高(P<0.05),但与EO组相比,ET组显著降低(P<0.05);与MC组相比,MO组和MT组表达显著升高(P<0.05),MT组与MO组间无明显差异(P>0.05)。结论:LIPUS可以减轻关节软骨ECM的损伤程度,其作用与LIPUS治疗后关节软骨中p38、ERK1/2表达下调有关,这种作用与OA的病变阶段密切相关,即在OA早期进行LIPUS作用更明显。     

实体瘤外周血循环肿瘤细胞与转移相关性的研究进展

目的:总结实体瘤外周血中循环肿瘤细胞(CTC)和转移相关性的研究进展。方法:以"循环肿瘤细胞、实体瘤、转移"为关键词,检索2000-01-2010-10 PubMed、Science Direct、Ovid、Springer、CNKI和维普等数据库的相关文献。纳入标准:关于实体瘤CTC与转移密切相关的分子机制、临床相关性的文献。共纳入分析42篇文献。结果:随着分子生物学和材料技术的发展,越来越多的方法有效地富集和鉴定不同类型实体瘤外周血CTC。细胞基因水平证实CTC具有恶性生物学特性,CTC自身基因和转移相关蛋白谱的表达、肿瘤微环境、免疫系统等因素影响着CTC远处器官转移灶的形成。CTC数目、特定基因、蛋白的表达与治疗疗效、预后等具有相关性。结论:研究CTC参与血液播散转移的机制,为全面、准确地阐明恶性实体瘤转移的机制、个体化的治疗提供新的工具。     

血管外肺水在慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者液体管理中的意义

目的 探讨血管外肺水（ELWI）在慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者液体管理中的指导价值,为慢性阻塞性肺疾病急性加重期合并呼吸衰竭患者的液体管理提供临床策略.方法 2010年10月-2013年4月,选择江苏省苏北人民医院重症医学科符合慢性阻塞性肺疾病急性发作合并呼吸衰竭的患者63例,应用脉搏指示下连续心输出量技术监测患者胸腔内血容积指数（ITBI）和ELWI,比较ELWI与氧合指数、ITBI与ELWI之间的相关性,采用简单相关分析法进行统计学分析.结果 ELWI与氧合指数呈明显负相关（r=-0.741,P＜0.01）.进一步以ELWI=14 ml/kg进行分层分析,当ELWI＜ 14 ml/kg时,两者仍呈负相关（r=-0.524,P=0.080）,但差异无统计学意义;当ELWI≥14 ml/kg时,两者呈明显负相关（r=-0.952,P＜0.01）.ELWI与ITBI无明显相关性（r=0.477,P=0.072）.进一步以ITBI=1 000 ml/m^2做分层分析,当ITBI＜1 000 ml/m^2时,两者无明显相关性（r =0.332,P=0.117）,ITBI≥1 000 ml/m^2时,两者呈明显正相关（r =0.677,P＜0.01）.结论 过多的血管外肺水是导致慢性阻塞性肺病急性发作患者并发呼吸衰竭的重要因素.     

普伐他汀预处理对香烟提取物诱导的小鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响及可能机制研究

目的探讨普伐他汀预处理对香烟提取物(CSE)诱导的小鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的影响及可能机制。方法 2017年6月—2018年1月,采用负压吸引装置抽吸香烟烟雾并经过滤除菌制备CSE原液,取10代以内生长状态良好的对数期VSMCs进行实验。(1)将实验细胞分为不同浓度CSE诱导组,其中空白组使用不含CSE的DMEM培养基培养12 h,低浓度组、中浓度组、高浓度组分别于含1%、5%、10%CSE的DMEM培养基培养12 h。(2)将实验细胞分为不同剂量普伐他汀预处理组,其中对照组使用不含普伐他汀的DMEM培养基培养12 h;低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予1μM、10μM、100μM普伐他汀预处理2 h,然后使用含5%CSE的DMEM培养基培养12 h;部分实验设置阳性对照组,阳性对照组给予4-苯丁酸(4-PBA)2 m M预处理2 h,然后使用含5%CSE的DMEM培养基培养12 h。采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测Bcl-2、Bax、GRP78、Chop m RNA相对表达量,采用Western Blot检测Bcl-2、Bax、GRP78、Chop蛋白相对表达量。结果 (1)低浓度组、中浓度组和高浓度组细胞凋亡率高于空白组,中浓度组和高浓度组细胞凋亡率高于低浓度组,高浓度组细胞凋亡率高于中浓度组(P0.05)。(2)低浓度组、中浓度组和高浓度组Bcl-2 m RNA和蛋白相对表达量低于空白组,中浓度组和高浓度组Bcl-2 m RNA和蛋白相对表达量低于低浓度组,高浓度组Bcl-2蛋白相对表达量低于中浓度组(P0.05);低浓度组、中浓度组和高浓度组Bax m RNA和蛋白相对表达量高于空白组,中浓度组和高浓度组Bax m RNA和蛋白相对表达量高于低浓度组,高浓度组Bax m RNA相对表达量高于中浓度组(P0.05)。(3)低浓度组、中浓度组、高浓度组GRP78、Chop m RNA和蛋白相对表达量高于空白组,中浓度组、高浓度组GRP78、Chop m RNA和蛋白相对表达量高于低浓度组,高浓度组GRP78 m RNA、Chop蛋白相对表达量高于中浓度组(P0.05)。(4)低剂量组、中剂量组、高剂量组细胞凋亡率低于对照组,中剂量组细胞凋亡率低于低剂量组和高剂量组(P0.05)。(5)低剂量组、中剂量组、高剂量组Bcl-2蛋白相对表达量高于对照组,Bax蛋白相对表达量低于对照组(P0.05);中剂量组Bax蛋白相对表达量低于低剂量组和高剂量组(P0.05)。(6)阳性对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组GRP78和Chop蛋白相对表达量低于对照组,低剂量组、中剂量组、高剂量组GRP78蛋白相对表达量低于阳性对照组,中剂量组GRP78蛋白相对表达量低于低剂量组、Chop蛋白相对表达量低于阳性对照组(P0.05)。结论 CSE可诱导小鼠VSMCs凋亡,且呈浓度依赖性;普伐他汀预处理对CSE诱导的小鼠VSMCs凋亡具有一定保护作用,其中10μM普伐他汀预处理的抗细胞凋亡作用最佳,其机制可能与调控内质网应激信号途径有关。     

骨髓干细胞复合纳米骨用于脊柱融合的研究

目的 探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合纳米羟基磷灰石/胶原(nHAC)用于脊柱融合的可行性.方法 将20只新西兰大白兔根据双侧L5～L6横突间植入物不同分为复合材料组和自体髂骨组,每组10只.术后4周每组取材2只,术后8周取材剩余兔,行X线、大体观察、手触检测和组织学观察,评估腰椎融合情况.结果术后8周复合材料组和自体髂骨组融合率分别为75.0%(6/8)和87.5%(7/8),两组融合率差异无统计学意义(P>0.05).结论 BMSCs复合nHAC是一种较好的植骨替代材料,用于脊柱融合可获得与自体骨移植近似地融合效果.     

血清CA19—9、CEA、CA125联合检测诊断食管癌的价值

目的探讨多抗原联合检测诊断食管癌的价值。方法应用全自动化学免疫分析检测254例食管癌患者、40例食管炎患者和100例健康体检者血清CA19-9、CEA、CA125的表达。结果三项指标联合检测诊断食管癌的灵敏度和特异度均明显高于单独检测及任两项联合检测（P均〈0．01）。结论三项指标联合检测可提高诊断食管癌的灵敏度和特异度,有利于早期诊断食管癌。     

原发性高血压患者醛固酮/肾素比值与心率变异性和QT间期的关系研究

目的探讨高血压患者醛固酮/肾素比值(ARR)与心率变异性(HRV)及QT间期的相关性。方法选取研究对象179例,根据ARR中位数分为ARR低值组和ARR高值组,比较2组24 h动态心电图(Holter)、24 h动态血压(ABPM)、常规心电图、血清钾、血清钠等,比较2组的HRV、QT间期等指标以及相关性。结果 2组Holter中的SDNN、SDNN Index、SDANN Index、RMSSD以及QTc、血钾、血钠有显著差异(P0.05)。校正相关因素后,ARR与SDNN、SDNN Index、SDANN Index、RMSSD、血钾呈负相关(r=-0.444、-0.677、-0.381、-0.623、-0.432,P0.05),与QTc、血钠呈正相关(r=0.391、0.379,P0.05)。多因素Logistic回归分析显示,SDNN、SDNN Index、SDANN Index均是ARR的独立相关因素(P0.05)。结论原发性高血压患者中醛固酮高与心率变异性减少密切相关。     

NEP1-40对缺氧缺血性脑病新生大鼠的Wnt信号通路胞增殖的调控作用

目的探讨Nogo-A受体拮抗剂NEP1-40对Wnt信号通路和神经细胞增殖的调控作用。方法 40只大鼠被均分为HIBD(缺氧缺血性脑损伤)组和HIBD+NEP1-40组,采用PCR定量、Western blot分析、细胞增殖的免疫组化试验、8-异前列腺素评估等检测分析缺氧缺血性脑病新生大鼠的修复过程中Wnt信号通路中NgR的转录因子调控与神经细胞增殖。结果NEP1-40处理后,c Jun和c-Myc的表达在蛋白水平上调,基因表达水平上调,Ki-67增加,8-异前列腺素无显著变化。结论通过抑制NgR后发现,c-Jun和c-Myc是Wnt通路的主要转录因子,同时脑室下区神经细胞的增殖增加。     

氧化应激在动脉粥样硬化发生发展中作用的研究新进展

心脑血管疾病占西方发达国家发病率和死亡率的首位,近年来其发病率在发展中国家也不断增加.动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)作为心脑血管疾病的主要病理基础,其发生发展与氧化应激有着密切关系.正常情况下体内氧化与抗氧化处于动态平衡,过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)等内源性抗氧化酶可清除活性氧,维持细胞氧化还原自稳态.然而,当活性氧生成过多、抗氧化酶活性降低时,就会对DNA、RNA、蛋白质以及脂质等造成过氧化损伤引起细胞功能障碍,导致相关疾病的发生和发展[1]. 研究表明,氧化应激存在于AS从脂纹病变到斑块破裂的整个发展过程中,并介导了血管内皮细胞、平滑肌细胞及单核巨噬细胞功能改变及损伤[2].因此,阐明AS发生发展中细胞氧化应激分子机制对于减缓AS进展、预防急性心脑血管事件的发生具有重要意义.我们综合国内外文献探讨氧自由基的产生以及氧自由基对血管内皮细胞、平滑肌细胞和单核巨噬细胞的影响两个方面,阐述AS发生、发展过程中细胞氧化应激反应的分子机制.