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目的 克隆并表达纯化人类PIF1蛋白,分析其生物化学活性.方法 从HeLa细胞的cDNA文库中克隆得到PIF1解链酶基因,插入融合有组氨酸的表达载体pET24b,构建pET24b-PIF1重组质粒,转化RosettaTM2(DE3)感受态细胞,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)观察PIF1蛋白表达;通过快速液相蛋白色谱纯化(FPLC)系统,采用亲和层析和凝胶过滤,纯化人类重组PIF1蛋白.薄层层析(TLC)法检测纯化PIF1蛋白的ATP酶活性.结果 克隆了人类PIF1基因,PIF1蛋白在大肠埃希菌(E.coli)中成功表达.结论 建立了PIF1蛋白纯化的方法,PIF1蛋白具有依赖镁离子和DNA的ATP酶活性. 相似文献
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目的 克隆并表达纯化人类PIF1蛋白,分析其生物化学活性.方法 从HeLa细胞的cDNA文库中克隆得到PIF1解链酶基因,插入融合有组氨酸的表达载体pET24b,构建pET24b-PIF1重组质粒,转化RosettaTM2(DE3)感受态细胞,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)观察PIF1蛋白表达;通过快速液相蛋白色谱纯化(FPLC)系统,采用亲和层析和凝胶过滤,纯化人类重组PIF1蛋白.薄层层析(TLC)法检测纯化PIF1蛋白的ATP酶活性.结果 克隆了人类PIF1基因,PIF1蛋白在大肠埃希菌(E.coli)中成功表达.结论 建立了PIF1蛋白纯化的方法,PIF1蛋白具有依赖镁离子和DNA的ATP酶活性. 相似文献
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参与DNA修复的PIF1解链酶的纯化和ATP酶活性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 克隆并表达纯化人类PIF1蛋白,分析其生物化学活性.方法 从HeLa细胞的cDNA文库中克隆得到PIF1解链酶基因,插入融合有组氨酸的表达载体pET24b,构建pET24b-PIF1重组质粒,转化RosettaTM2(DE3)感受态细胞,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)观察PIF1蛋白表达;通过快速液相蛋白色谱纯化(FPLC)系统,采用亲和层析和凝胶过滤,纯化人类重组PIF1蛋白.薄层层析(TLC)法检测纯化PIF1蛋白的ATP酶活性.结果 克隆了人类PIF1基因,PIF1蛋白在大肠埃希菌(E.coli)中成功表达.结论 建立了PIF1蛋白纯化的方法,PIF1蛋白具有依赖镁离子和DNA的ATP酶活性. 相似文献
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目的 克隆并表达纯化人类PIF1蛋白,分析其生物化学活性.方法 从HeLa细胞的cDNA文库中克隆得到PIF1解链酶基因,插入融合有组氨酸的表达载体pET24b,构建pET24b-PIF1重组质粒,转化RosettaTM2(DE3)感受态细胞,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)观察PIF1蛋白表达;通过快速液相蛋白色谱纯化(FPLC)系统,采用亲和层析和凝胶过滤,纯化人类重组PIF1蛋白.薄层层析(TLC)法检测纯化PIF1蛋白的ATP酶活性.结果 克隆了人类PIF1基因,PIF1蛋白在大肠埃希菌(E.coli)中成功表达.结论 建立了PIF1蛋白纯化的方法,PIF1蛋白具有依赖镁离子和DNA的ATP酶活性. 相似文献
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薰衣草活性成分的提取和抗氧化能力的测定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的比较不同溶剂对提取熏衣草花穗活性成分抗氧化能力的影响,找到较好提取溶剂;比较不同蒸馏法对提取熏衣草花穗挥发油抗氧化能力的影响。方法采用石油醚、醋酸乙酯、丙酮、正己烷、无水乙醇等有机溶剂提取新疆伊犁的熏衣草花穗活性成分,并通过分光光度法测定其抗氧化能力;水中蒸馏法提取熏衣草花穗挥发油,测定其挥发油的抗氧化能力,并与水上蒸馏法得到的挥发油进行比较。结果熏衣草花穗中抗氧化能力强的活性成分在无水乙醇中含量较多;水中蒸馏法提取熏衣草花穗挥发油的抗氧化能力大于水上蒸馏法。结论极性强的无水乙醇提取熏衣草花穗的活性成分效果较好;水中蒸馏法较水上蒸馏法,其原料与沸水接触更加充分,并可能促使熏衣草花穗中酯类成分发生水解。 相似文献
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目的:探讨外周血和盆腔积液T淋巴细胞斑点试验(T-SPOT.TB)检测在盆腔结核诊断中的应用价值。方法采集28例确诊为盆腔结核患者及36例盆腔肿瘤患者(对照组)的外周血和盆腔积液,分离单个核细胞,采用T-SPOT.TB法检测特异度T淋巴细胞反应,同时对盆腔积液进行荧光定量PCR法检测,根据检测结果比较3种方法的灵敏度及特异度。结果外周血和盆腔积液T-SPOT.TB检测、盆腔积液荧光定量PCR法检测灵敏度分别60.71%,75.00%和28.57%,外周血和盆腔积液T-SPOT.TB检测2种方法比较,差异无统计学意义(χ2=1.310,P>0.05),外周血和盆腔积液T-SPOT.TB检测与荧光定量PCR法均有统计学意义(χ2=7.292,P<0.01和χ2=14.000,P<0.001)。外周血和盆腔积液T-SPOT.TB检测、荧光定量PCR法检测特异度分别为91.97%、88.89%和86.11%。结论外周血和盆腔积液T-SPOT.TB检测对于盆腔结核的诊断有较好的应用价值。 相似文献
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目的 克隆并表达纯化人类PIF1蛋白,分析其生物化学活性.方法 从HeLa细胞的cDNA文库中克隆得到PIF1解链酶基因,插入融合有组氨酸的表达载体pET24b,构建pET24b-PIF1重组质粒,转化RosettaTM2(DE3)感受态细胞,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)观察PIF1蛋白表达;通过快速液相蛋白色谱纯化(FPLC)系统,采用亲和层析和凝胶过滤,纯化人类重组PIF1蛋白.薄层层析(TLC)法检测纯化PIF1蛋白的ATP酶活性.结果 克隆了人类PIF1基因,PIF1蛋白在大肠埃希菌(E.coli)中成功表达.结论 建立了PIF1蛋白纯化的方法,PIF1蛋白具有依赖镁离子和DNA的ATP酶活性. 相似文献
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现代仪器分析在中药指纹图谱研究中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
本文综述了薄层色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法、高效毛细管电泳法、紫外光谱法、红外光谱法、核磁共振和X-射线衍射法、质谱及分子生物学技术在中药指纹图谱研究中的应用。 相似文献