基于谱-效相关黄芩提取物抑菌药效物质基础及质量评价系统的研究

目的： 建立黄芩提取物抑菌谱-效相关质量评价系统,对其药效物质基础进行分析。方法： 自制黄芩提取物,建立HPLC指纹图谱检测方法;采用微量稀释法测定黄芩提取物样品水提液的抑菌率。利用灰色关联分析、相关分析及偏最小二乘回归分析对谱-效数据进行关联分析,挖掘药效物质基础;同时采用最小二乘支持向量机（LS-SVM）方法建立数学模型。结果： 成分4,7,8,9,10与抑菌率呈正相关关系;相关分析显示,成分3,7,4,5,6,9与抑菌率药效呈（非常）显著的相关关系;偏最小二乘回归分析显示,成分3,4,5,6,7,9的标准化回归系数绝对值较大,VIP值大于或接近于1,对抑菌率贡献率较大;数学模型预测值与实测值相对误差在6%以下。结论： 初步确定黄芩提取物抑菌药效物质基础主要为汉黄芩苷、汉黄芩素以及白杨素-7-O-葡萄糖醛酸苷;数学模型的建立,达到了从抑菌作用评价黄芩提取物质量的目的,并为中药谱-效相关质量评价系统的建立提供了详细的数据支撑。     

银黄颗粒中药材-中间体-成方制剂抑菌谱-效相关质量评价系统的建立

目的构建银黄颗粒中药材-中间体-成方制剂抑菌谱-效相关质量评价系统。方法首先采用最小二乘支持向量机(LS-SVM)方法,建立银黄颗粒体外抑菌谱-效相关质量评价系统;再采用有监督的偏最小二乘判别分析(PLS-DA)方法,对黄芩药材、金银花药材、黄芩提取物、金银花提取物、银黄颗粒谱-效相关抑菌药效评价结果进行评判。结果建立的银黄颗粒体外抑菌谱-效相关质量评价数学模型,预测结果平均相对误差在5%以下;黄芩药材、黄芩提取物、金银花药材、金银花提取物的抑菌率分别大于43%、5.5%、11%、37%,可以保证银黄颗粒87%的样品抑菌率大于11%(优质样品)。结论建立的银黄颗粒中药材-中间体-成方制剂抑菌谱-效相关质量评价系统,能够实现中成药生产投料关键环节的质量控制,评价结果更科学、全面、准确。     

基于HS-GC-MS及网络药理学技术解析艾叶不同炮制方法减毒的物质基础及分子机制

目的：基于艾叶、清炒艾叶、醋炙艾叶中挥发性成分的差异性,探究艾叶炮制减毒的物质基础和分子机制。方法：采用顶空-气相色谱-质谱(HS-GC-MS)法鉴定艾叶及炮制品中的挥发性成分;运用多元统计方法分析生品与炮制品的差异成分,解析其可能的减毒物质基础。借助网络药理学技术挖掘差异成分与肝毒性相关的靶点和通路,探究艾叶炮制减毒的分子机制。结果：实验共鉴定出41个化学成分,清炒后含量降低的差异成分有17个,醋炙后含量降低的差异成分有16个。网络药理学结果表明艾叶经清炒、醋炙后分别有10、12个成分通过作用于133、50个交集基因,并调控多条信号通路达到降低肝毒性的目的。结论：该研究初步阐释了艾叶不同炮制方法对挥发性成分的影响及减轻肝毒性的潜在分子机制,可为阐明艾叶炮制减毒的科学内涵提供实验依据和数据支持。     

基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS结合诊断离子过滤技术快速分析石榴皮的鞣质类成分

目的 应用UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS结合诊断离子过滤技术,对石榴皮鞣质类化学成分进行快速鉴定。方法 色谱条件为Agilent ZORBAX SB-Aq C₁₈色谱柱(3.0 mm×100 mm, 1.8μm);以乙腈(A)-0.05%甲酸水(B)为流动相进行梯度洗脱(0～0.5 min, 95%B;0.5～7 min, 95%→75%B;7～15 min, 75%B;15～30 min, 75%→5%B;30～31 min, 5%B;31～31.1 min, 5%→95%B;31.1～35 min, 95%B),流速0.3 mL·min^-1,柱温30℃;质谱分析采用加热电喷雾离子源(H-ESI),正、负离子模式扫描,扫描模式为Full MS/dd-MS2,扫描范围m/z 100～1500,碰撞能20、40、60 eV。进而采用质谱数据采集-诊断离子过滤(DIF)-化合物推测及验证的研究流程对鞣质类化合物结构进行鉴定。结果 石榴皮中共鉴定出61种鞣质类化合物,含鞣花酸鞣质类43种,没食子酸鞣质类10种,缩合鞣质类8种...     

文冠果果壳提取物的分离及对MCF-7细胞抑制作用初探

目的:研究文冠果果壳提取物的分离方法,对得到的提取物进行抗乳腺癌活性初步研究。方法:采用硅胶柱色谱、制备液相色谱法等方法,对文冠果果壳提取物进行系统分离,采用MTT法对Fr.2、Fr.2-1、Fr.2-1-1这3种提取物,进行抗乳腺癌活性的筛选。结果:分离得到的Fr.2-1-1纯度为97.6%,对人乳腺癌细胞MCF-7抑制作用最强,Fr.2-1次之,Fr.2效果最弱,各样品对MCF-7细胞抑制作用均有浓度、时间依赖性。结论:文冠果果壳各提取物对人乳腺癌细胞MCF-7有明显的抑制作用。     

黄芩水提物体外抗呼吸道合胞病毒作用

目的:为了建立黄芩谱-效相关质量评价系统,对黄芩药材的抗病毒活性进行研究,筛选适宜的抗病毒指标,建立黄芩谱-效相关质量评价抗病毒试验标准操作规程(SOP).方法:采用体外细胞病变效应(CPE)法对黄芩抗病毒疗效进行筛选,选择黄芩抗病毒活性高的毒株进行抗病毒实验.结果:通过毒株筛选,发现黄芩对呼吸道合胞病毒作用明显;通过对抗病毒试验的细胞种类、细胞数量、染色方法、灭菌方法和加药顺序进行考察,建立了黄芩体外抗呼吸道合胞病毒实验方法,对100组黄芩样品进行测定,结果TI值为2.3~78.79,平均值为20.2875.结论:建立的黄芩体外抗病毒实验方法灵敏度高、可重复性好.     

基于代谢组学的甘草及其蜜炙品改善顺铂致大鼠急性肾损伤的作用机制研究

本研究采用代谢组学技术探究生、炙甘草对急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)大鼠改善作用。所有动物实验均经过山东省中医药研究院动物伦理委员会批准(批准号:SDZYY20200101001)。随机将SD大鼠分为对照组、模型组、生甘草组(0.9 g·kg^-1)、炙甘草组(0.9 g·kg^-1),每组6只。采用单次腹腔注射顺铂(cisplatin,CP)构建急性肾损伤模型,给予生、炙甘草治疗,苏木精-伊红染色(hematoxylin and eosin,HE)、PAS染色评估肾组织病理变化,检测血清中肌酐(creatinine,Cr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)含量。UPLC-Q-TOF/MS进行组织代谢组学研究,筛选生、炙甘草干预的生物标志物,并进行代谢通路进行分析。结果表明,与模型组相比,生、炙甘草可改善肾组织病理变化,降低血清中Cr、BUN含量,升高SOD活性,此外炙甘草还可以显著降低肾脏指数。组织代谢组学分析筛选得到45种与...     

青蒿琥酯联合用药及作用机制研究进展

青蒿素是一种从菊科蒿属植物黄花蒿（Artemisia annua）中分离出来的倍半萜类天然产物，青蒿琥酯（artesunate）是其衍生物之一，具有经济、速效、低毒、不易产生耐受等特点。目前临床主要用于脑型疟疾及各种重症疟疾的抢救，对疟原虫红内期有强大且快速杀灭的作用，能够迅速控制临床发作及症状。除此之外，青蒿琥酯还具有抗肿瘤、抗病毒、抗肝纤维化、抗炎、抗菌、保护肝细胞、免疫调节等药理作用，抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡及下调血症水平。以青蒿素类化合物为基础的联合疗法（ACTs）是多国治疗疟疾的一线方法，主要包括蒿甲醚-本芴醇、青蒿琥酯-阿莫地喹和青蒿甲醚-苯甲酰胺等。近年来国内外学者对青蒿琥酯进行了研究，发现相对于单一疗法而言，青蒿琥酯联合疗法在增强药理作用、缩短用药时长和减少不良反应等方面更具有优越性。该文通过Web of Science核心合集（Web of Science Core Collection）系统检索并通过CiteSpace（6.2.1）软件对其进行整合，综述了近5年来青蒿琥酯联合其他药物在抗疟、抗肿瘤、抗菌和抗病毒等方面的作用机制并对其进行阐述，旨在为进一步合理开发利用青蒿琥酯及新药研发提供一定的理论依据。